分子生物學實驗指導

本書是一本簡明實用且與目前高等學校分子生物學實驗教學相適應的實驗指導用書。第二版全書仍分為兩篇，第一

篇簡明介紹了分子生物學的實驗方法和理論；第二篇選編了18個學生實驗，包括感受態細胞的製備和轉化，質粒DNA的提取和分析，瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA，PCR基因擴增，DNA重組，動物、植物、大腸桿菌基因組DNA的分離和分析，DNA序列測定，基因表達和檢測，蛋白質印跡，植物總RNA的提取，定點突變，RT—PCR，差異顯示mRNA，Southern雜交等內容。書中詳細敘述了常用方法的實際操作，並對實驗中應注意的地方給予了提示，初學者依此即可開展工作，並可獲得滿意的結果。書後還有各種有用的附錄。

本書可作為高等院校生物類及農林、醫藥類開設分子生物學實驗的各專業教學用書，也可供有關研究人員、技術人員和中學生物教師參考。

第一篇 常用分子生物學實驗技術及原理

第一章 載體

第二章 分子生物學中常用的工具酶

第三章 電泳

第四章 真核生物基因組文庫的構建

第五章 eDNA文庫的構建

第六章　DNA序列測定

第七章　PCR基因擴增

第八章　基因表達

第九章 印跡法及分子檢測

第十章 克隆化DNA的定點突變

第十一章mRNA差異顯示技術

第二篇　學生實驗

實驗一 大腸桿菌感受態細胞的製備及質粒DNA的轉化

實驗二 質粒DNA的提取及其定性定、量分析

實驗三 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA

實驗四　PCR基因擴增及擴增產物的回收

實驗五　DNA重組

實驗六 外源基因在大腸桿菌中的誘導表達和檢測

實驗七 蛋白質印跡

實驗八 哺乳動物基因組DNA的分離和分析

實驗九 植物基因組DNA的提取

實驗十 大腸桿菌基因組DNA的提取

實驗十一 植物總RNA的提取

實驗十二 RT—PCR（反轉錄一聚合酶鏈反應）

實驗十三　PCR法差異顯示mRNA

實驗十四 利用聚合酶鏈反應（PCR）定點突變

實驗十五 寡核苷酸介導的定點突變

實驗十六 Southern雜交

實驗十七雙脫氧鏈終止法測定DNA序列

實驗十八　DNA核苷酸序列分析——銀染色法

一、常用核酸、蛋白質換算數據

二、氨基酸符號及相應密碼子

三、常見市售酸鹼的濃度

四、離心機轉速與相對離心力的換算

五、常用電泳緩衝液及凝膠加樣緩衝液

六、常用限制酶酶切位點及緩衝液

七、分子生物學常用試劑和緩衝液的配製

八、常用細菌培養基和抗生素溶液

九、x光底片的沖洗方法

十、溴化乙錠溶液的凈化處理