蘇州聖約翰堂位於江蘇省蘇州市滄浪區十梓街18號（東端），蘇州大學本部西校門外。是美南監理會在蘇州創建的第一座教堂（另外2座是宮巷的
樂群社會堂和
養育巷的救世堂。
該堂始建於1881年（清光緒七年），由美國監理會傳教士潘慎文在
天賜庄（意為上帝所賜的地方）建造，名為首堂，有400個座位。
20世紀初，蘇州的基督徒人數增加，到1915年，監理會拆除了首堂，新建了一座
建築面積1855平方米，有800座位的西式教堂，並為紀念
衛理公會的創始人
約翰·衛斯理而改名為
聖約翰堂。聖約翰堂的設計者是美國人約翰.M.慕爾博士，與天賜庄聖約翰堂建築風格一致、面積大小一樣的目前還有兩座，一座在美國聖路易斯，一座在日本神戶。
諾貝爾物理學獎得主
李政道博士的祖父李仲覃牧師（1870-1936）為該堂的首任華人主任牧師（教區長），毛吟槎、
江長川、朱味腴、楊鏡秋等牧師亦相繼在該堂事奉。
1959年，蘇州基督教實行聯合禮拜，將聖約翰堂獻出，由蘇州市第一人民醫院租用。到1995年教會收回聖約翰堂，1996年10月開始按原貌修復，到1998年3月竣工。1997年先作為市
基督教兩會辦公用房及蘇南義工培訓中心。2003年4月，終於被批准恢復為
宗教活動場所。現在
主日早晨9點舉行主日崇拜。每月的第一個主日舉行聖餐禮拜。