DNA文庫

DNA文庫

DNA文庫嚴格來講應稱作cDNA文庫,中文名稱是基因文庫,是指某生物基因組中所有可表達的基因片段,經mRNA反轉錄后獲得相應的cDNA的集合,將這些cDNA的集合經轉入和克隆后貯存於受體細胞群落中,這個受體細胞群落即構成該生物的cDNA文庫。

教科書定義


某種生物的基因組轉錄的所有mRNA經反轉錄產生的各種cDNA片段分別與克隆載體重組,貯存在一種受體菌克隆子群體之中,這樣群體稱為cDNA文庫。

基本途徑


1.將某種生物的基因組轉錄部分,通過mRNA反轉錄,產生大量相應的cDNA片段。
2.將這些不同的cDNA片段與載體結合形成各種相應DNA重組體。
3.將DNA重組體導入宿主細胞。注意:因為轉入過程是隨機的,因此宿主細胞要有一定的數量,以確保能夠獲得所有類型的DNA重組體。
4.經克隆后,這些cDNA片段就貯存在一個受體細胞的群落中,其中每個受體細胞都含有一種或幾種cDNA,而整個群落則含有這個生物全部的cDNA,這個群落就構成了這種生物的cDNA文庫。

用途


由於cDNA文庫包含了該生物所有的可表達基因片段,因此可隨時篩選出需要的目的基因片段。不必再通過PCR製備,可以節省時間和成本,提高效率。
cDNA文庫與基因組文庫的區別:
1.途徑不同:cDNA文庫是經mRNA反轉錄cDNA獲得的;基因組文庫是將完整的DNA經限制性內切酶切割得到的。
2.內容不同:cDNA文庫只含有部分基因組信息,即可編碼能轉錄的那部分基因片段;基因組文庫包含了基因組內所有的基因片段。