Lowry法

Lowry法

Lowry 法指的是在雙縮脲法的基礎上通過添加福林一酚試劑來增加蛋白質的分析靈敏度,可以適用於雙縮脲法無法測定的低蛋白含量樣品。此反應中,福林酚試劑被蛋白質中的酪氨酸殘基還原,形成的藍色化合物在750 nm、405 nm 附近有最大吸收。

其原理是蛋白質與鹼性銅溶液中的銅離子絡合,使得肽鍵伸展,從而使暴露出的酪氨酸和色氨酸在鹼性銅條件下與福林試劑反應,產生藍色,在一定濃度範圍內,其顏色的深淺與蛋白質中的酪氨酸和色氨酸的含量成正比,由於各種蛋白質中的酪氨酸和色氨酸的含量各不相同,因此在測定時需使用同種蛋白質作標準。

基本內容


Lowry 法中蛋白質與銅離子作用生成的亞銅離子作為催化劑,催化福林-酚試劑還它的缺點是分析時使用的試劑多、反應慢、干擾物質較多、需要對PH 進行控制以避免試劑分解(用pH= 10~10.5 的緩衝溶液),在進行準確分析時需要進行時間控制。