厭氧菌培養

專業術語

厭氧菌培養是專業術語,拼音為yàn yǎng jūn péi yǎng,是指在無氧的環境里培養出的細菌。厭氧菌感染近年來已受到外科醫師的重視,在外科感染中厭氧菌的檢出率至少在50%以上。根據中山醫院的資料,厭氧菌在腹部感染中的檢出率為60.67%,在闌尾膿腫、闌尾切除術后切口化膿中佔70.58%。厭氧菌不僅可引起嚴重的胸腹部感染和膿腫,而且很多嚴重的軟組織壞死性感染幾乎都與厭氧菌有關。

發病機理


厭氧菌是人體內主要的正常菌群(表6-3),類桿菌屬在口腔、腸道、泌尿道、女性生殖道最多;梭形桿菌主要存在於上呼吸道和口腔;消化球菌和消化鏈球菌存在於腸道、口腔、陰道和皮膚;丙酸桿菌常存在於皮膚、上呼吸道和陰道;韋永氏球菌則存在於口腔、上呼吸道、陰道和腸道。

培養方法


1.厭氧缸法接種好標本的平板或液體培養基試管,可放入厭氧缸內培養,厭氧缸是普通的乾燥缸,用物理化學的方法使缸內造成厭氧環境,從而將厭氧菌培養出來。
2.厭氧袋(Bio-bag)即在塑料袋內造成厭氧環境來培養厭氧菌。塑料袋透明而不透氣,內裝氣體發生管(有硼氫化鈉碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿)、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、乾燥劑。放入已接種好的平板后,盡量擠出袋內空氣,然後密封袋口。先折斷氣體發生管,后折斷美蘭指示劑管,命名袋內在半小時內造成無氣環境。如不突變表示袋內已達厭氧狀態,可以孵育。
3.厭氧手套箱(Anaerobieglovebox)是迄今為止國際上公認的培養厭氧菌最佳儀器之一。它是一個密閉的大型金屬箱,箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板,板上裝有兩個手套,可通過手套在箱內進行操作,故名。箱側有一交換室,具有內外二門,內門通箱內先關著。欲放物入箱,先打開外門,放入交換室,關上外門進行抽氣和換氣(H2,CO2,N2)達到厭氧狀態,然後手伸入手套把交換室內門打開,將物品移入箱內,關上內門。箱內保持厭氧狀態,也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘餘氧化合成水的原理。該箱可調節溫度,本身是孵箱或孵箱即附在其內,還可放入解剖顯微鏡便於觀察厭氧菌菌落,這種厭氧箱適於作厭氧細菌的大量培養研究,大量培養基可放入作預還原和厭氧性無菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環境和溫度等均系自動調節。
4.厭氧盒:原理同厭氧袋,有成品銷售。
5.生物耗氧法:在一密閉的容器內放以生物(多是植物),消耗氧氣,同時產生二氧化碳,供細菌生長用。我沒見過。
6.焦性末食子酸法:在一潔凈的玻片上鋪上紗布或濾紙,均勻撒上焦性末食子酸,然後再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液,迅速將已接種細菌的平板倒扣在上面,用融化的白蠟封邊,造成一個封閉空間。焦性末食子酸與鹼反應后耗氧。該法用於厭氧不嚴格的厭氧菌的培養,簡單。如有梭狀芽孢桿菌
7.皰肉培養基:本身就是一個不需特殊設備的厭氧培養法。皰肉和肉湯裝入大試管,液面封凡士林,造成無氧環境。