濕熱滅菌法

濕熱滅菌的原理是使微生物的蛋白質及核酸變形導致其死亡。這種變形首先是分子中的氫鍵分裂，當氫鍵斷裂時，蛋白質及核酸內部結構被破壞，進而喪失了原有功能。蛋白質及核酸的這種變形可以是可逆的，也可以是不可逆的。雖然無所謂動能行結構被破壞，若氫鍵破裂的數量未達到微生物死亡的臨界值，則其分子很可能恢復到它原有的形式，微生物就沒有被殺死。為有效地使蛋白質變形，如採用高壓蒸汽滅菌時，就需要水蒸氣有足夠的溫度和持續時間，這對滅菌效果十分重要。高溫飽和水蒸氣可迅速使蛋白質變形，在規定操作條件下，蛋白質發生變形的過程即微生物死亡的過程，是可預見和重複的。微生物的滅活符合一級動力學方程，微生物死亡速率是微生物耐熱參數D和殺滅時間的函數。即在給定的時間下被滅活的微生物與仍然存活數成正比。

LgNt=lgNo-F(T,Z) /DT

Nt：t分鐘后微生物計數值；

No：初始微生物計數值；

DT：在T溫度下的微生物降低一個對數單位所需要的時間，分鐘；

F（T，Z）：滅菌程序在確定溫度係數Z的T溫度的等效滅菌時間。

影響濕熱滅菌的主要因素有：微生物的種類與數量、蒸汽的性質、藥品性質和滅菌時間等。

（1）流通蒸氣滅菌法：是指在常壓條件下，採用100攝氏度流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法，滅菌時間通常為30-60分鐘。該法適用於消毒以及不耐高熱製劑的滅菌，但不能保證殺滅所有芽孢，是非可靠的滅菌方法。

（2）間歇蒸汽滅菌法：利用反覆多次的流通蒸汽加熱，殺滅所有微生物，包括芽胞。方法同流通蒸汽滅菌法，但要重複3次以上，每次間歇是將要滅菌的物體放到37℃孵箱過夜，目的是使芽胞發育成繁殖體。若被滅菌物不耐100℃高溫，可將溫度降至75℃～80℃，加熱延長為30～60分鐘，並增加次數。適用於不耐高熱的含糖或牛奶的培養基。

（3）高壓蒸汽滅菌法：103.4千帕蒸汽壓溫度達121.3℃，維持15-20分鐘。

濕熱滅菌法 濕熱法可在較低的溫度下達到與乾熱法相同的滅菌效果，因為：①濕熱中蛋白吸收水份，更易凝固變性；②水分子的穿透力比空氣大，更易均勻傳遞熱能；③蒸汽有潛熱存在，每1克水由氣態變成液態可釋放出529卡熱能，可迅速提高物體的溫度。

濕熱滅菌法一般採用121℃，滅菌20-30min，如果是產孢子的微生物則應採用滅菌后適宜溫度下培養幾小時，再滅菌一次，以用於殺死剛剛萌發的孢子。