粘貼劑
粘貼劑
在用石蠟切片製作植物切片和組織切片時需用粘貼劑，將切成的蠟帶粘附在玻片上而且經染色和各種處理后要保證不脫落。常規切片染色用蛋白粘貼劑，明膠粘貼劑，火棉膠粘貼劑即可，但在一些特殊組化染色，如免疫組化往往經不起反覆振蕩洗滌、胰酶消化等處理過程，造成脫片，影響觀察與結果分析。為保證免疫組化實驗的正常進行，要求在貼片前對載玻片作適當處理，必須在清洗乾淨的玻片上進行粘貼劑的處理以防脫片。
配製方法，使用方法，粘貼劑
1.1原料：明膠，蒸餾水，石碳酸，甘油
1.2化學成分分析
明膠(Gelatin)：無味、無色，是一種半透明、堅硬的非晶態物，不溶於有機溶劑，吸水性強、粘度高，是肽分子聚合物質，是膠原蛋白質的水解產物，是一種無脂肪的高蛋白，且不含膽固醇，是一種天然營養型的食品增稠劑。組成
明膠的蛋白質中含有18種氨基酸，其中7種為人體所必需。除16%以下的水分和無機鹽外，明膠中蛋白質的含量佔82%以上，是一種理想的蛋白源。明膠的成品為無色或淡黃色的透明薄片或微粒。明膠不溶於冷水，但可緩慢吸水膨脹軟化，明膠可吸收相當於其重量5—10倍的水。依據來源不同，明膠的物理性質也有較大的差異，其中以豬皮明膠性質較優，透明度高，可塑性強。
明膠可溶於熱水，形成熱可逆性凝膠，它具有極其優良的物理性質，如膠凍 力、親和性、高度分散性、低粘度特性、分散穩定性、持水性。被覆性、韌性及可逆性等，因此明膠是一種重要的食品添加劑，如作為食品的膠凍劑、穩定劑。增稠劑、發泡劑。乳化劑、分散劑、澄清劑等，被廣泛應用。
1.3配方
1.3.1溶液甲：明膠（粉狀）1g + 100ml（36℃）蒸餾水（明膠溶化后）+石炭（結晶）2g +甘油15ml（溶化）
1.3.2溶液乙：甲醛（40%濃度）4ml+100ml 蒸餾水（即4%的福爾馬林）
1.4配製方法
1.4.1 溶液甲：先將明膠溶於微溫（36℃）的蒸餾水中，加入石炭酸和甘油，攪拌使其完全溶解。然後過濾，將濾紙貯存於有塞玻璃瓶中備用。
1.4.2 溶液乙：取甲醛（40%濃度）4ml，再加入100ml 蒸餾水，混勻（溶液乙的作用是對材料和明膠起到防腐作用）
1.5使用方法：使用時，在擦凈的載玻片上滴上1/4－1/3滴溶液甲，用乾淨的手部將其塗抹均勻，再加大滴溶液乙，然後將蠟片放在液面上（蠟片的光面向下）。
2.1原料：雞蛋清，甘油，麝香草酚
2.2化學成分分析
2.2.2 麝香草酚：片狀結晶，極易溶於乙醇、乙醚、醋酸、氯仿和苯，有百里香油似的辛香和草香香氣，殺菌作用麝香草酚的殺菌作用比苯酚強，且毒性低，可做防腐劑。
2.3配方：新鮮雞蛋青25ml + 甘油25ml + 石炭酸0.5g（為防腐劑）
2.4配製方法：將雞蛋一端打開一個小孔，只讓蛋白慢慢流入燒杯內。將雞蛋清打成雪花狀泡沫，然後用粗濾紙或雙層紗布過濾到量筒中，經數小時或一夜即可濾出透明蛋白液。在其中加入等量甘油並輕輕搖動，使兩者混合。最後加入少許麝香草酚防腐，不用時需放低溫乾燥處（如冰箱中）保存，可保存6個月用蛋白粘貼劑時，切片染色后需將著色的粘貼劑痕迹擦去。
2.5使用方法：使用時，在擦凈的載玻片上滴上小半滴蛋白粘貼劑，用乾淨的小指將其塗抹均勻，再加大滴水溶液，其他操作同明膠法。
2.6特點
2.6.1此劑在動物上應用更廣，在植物上效果也很好
2.6.2粘性比明膠弱
2.6.3配好后1-2個月內易失效，所以一般是每次實驗臨時配
3.1原料：火棉膠，酒精（100%），乙醚
3.2化學成分分析
3.2.1火棉膠：硝化纖維素的無水乙醇和乙醚的混合溶液，為無色到淡黃色透明或微有乳色糖漿狀液體，有醚的氣味。
3.4配製方法：火棉膠1-2g溶解在純酒精和乙醚各半的混合液中，即為火棉膠粘貼劑
3.6特點：火棉膠粘貼劑適用於粘貼較厚的材料（如木材切片、種子切片等等）
4.1原料：3- 氨丙基三乙氧硅烷，丙酮
4.2化學成分分析
3- 氨丙基三乙氧硅烷：為無色至淡黃色低粘度透明液體，是一種通用型氨基硅烷，氨基具有與多種樹脂反應的活性，而乙氧基水解后形成的硅羥基可與無機材料表面的羥基縮合，從而在無機材料和樹脂間架起“分子橋”，起到偶聯的作用
4.3配方：APES （ 3- 氨丙基三乙氧硅烷）1ml,丙酮50ml
4.4 配製方法：取APES 1ml，加丙酮50ml，充分攪拌均勻備用
4.5使用方法：將清潔的載玻片放入APES液中20～30秒后，取出，用丙酮液洗去多餘的APES液，注意不要留有氣泡，置通風櫥中晾乾或60°C烤箱烤乾。經該方法處理的玻片具有良好的防脫片能力。
4.6特點：APES 使用方便，便於大量應用，且價格便宜。為免疫組織化學
中，石蠟切片的常用粘貼劑。
5.1原料：多聚賴氨酸，蒸餾水
5.2化學成分分析
Polv-L-Lysine (多聚賴氨酸)：分子量30000左右，是廣泛應用的組織切片與玻片黏合劑，該多聚陽離子分子與組織切片上的陰離子相互作用會產生較強的黏合力。
5.3配方：多聚賴氨酸（Poly-L-Lysine）1ml，蒸餾水10ml
5.4配製方法：取市售Poly-L-Lysine 1ml，加入蒸餾水10ml，混勻，置於塑料容器中。
5.5使用方法：將清潔的玻片放入該液中5分鐘，取出放置無塵乾燥箱中晾乾，或用60°C乾燥箱烤乾備用，所需容器不能用玻璃製品。經該方法處理的玻片具有很強的粘合能力。
5.6特點：粘合能力強，但價格較APES貴，為免疫組織化學技術中，石蠟切片的常用粘貼劑。
6.1原料： 40%甲醛，明膠，蒸餾水
6.2配方：40%甲醛 2.5ml ，明膠 0.5g ，蒸餾水 約80ml
6.3配製方法：將少許蒸餾水（約80ml）將明膠加熱溶解，待完全溶解后，加甲醛，最後補充蒸餾水至100ml備用。
6.4使用方法：將清潔的載玻片置於甲醛明膠液液體中浸泡數分鐘后，烤乾備用。
6.5特點：為免疫組織化學技術中常用粘貼劑。
7.1原料：鉻明礬，明膠，蒸餾水
7.2化學成分分析
鉻明礬：硫酸鉻鉀，為紫色或紫紅色等軸晶系八面體結晶，易製成大顆粒結晶。相對密度1.826(25℃)。熔點89℃。加熱至100℃失去10個結晶水，加熱至400℃時失去12個結晶水變成無水物。溶於水、稀酸，不溶於醇。溶於水中呈紫紅色水溶液，加熱至70℃時變成綠色溶液，冷卻后漸變紫色。易吸潮，在乾燥的空氣中能風化。用作鞣劑, 媒染劑及照相定影劑等。
7.3 配方：鉻明礬(chrome alum)0.25g，明膠(gelatine) 2.5g，蒸餾500ml
7.4 配製方法：先將鉻明礬溶解於40°C少量蒸餾水中，再加入明膠及蒸餾水，可在70 °C水浴中使明膠溶化，攪拌均勻后，即可使用。如有殘渣，可過濾后再用。
7.5使用方法：將清潔的載玻片置於甲醛明膠液液體中浸泡數分鐘后，烤乾備用，可防止脫片。
7.6特點：為免疫組織化學技術中常用粘貼劑