Trichostatin A

Trichostatin A 是有效的，特異的組蛋白去乙醯化酶類型 I 和 II (HDAC class I/II) 抑製劑，對 HDAC 的 IC50 值為 1.8 nM。Trichostatin A抑制HDAC后可以導致histone乙醯化水平升高，一些基因的轉錄水平提高；也可以升高其它一些蛋白的乙醯化水平改變其活力或穩定性。Trichostatin A處理細胞后可以導致細胞周期抑制，目前被看作是一種潛在的抗癌藥物。

化學信息別名：TSA分子量：302.4分子式：C₁₇H₂₂N₂O₃CAS號：58880-19-6SMILES：CN(C1=CC=C(C=C1)C([C@@H](/C=C(/C=C/C(NO)=O)C)C)=O)C化學名：(R,2E,4E)-6-(4-(dimethylamino)benzoyl)-N-hydroxy-4-methylhepta-2,4-dienamide穩定性：3年 -20°C粉狀/2年 -80°C溶於溶劑生物活性 Trichostatin A 抑制八種乳腺癌細胞系，包括MCF-7, T-47D, ZR-75-1, BT-474,MDA-MB-231, MDA-MB-453, CAL 51, 和 SK-BR-3增殖，平均IC50為124.4 nM (範圍為26.4-308.1 nM),作用於表達ERα的細胞系比作用於表達 ERα陰性的細胞系更有效。Trichostatin A作用於全部乳腺癌細胞系，抑制HDAC活性，平均IC50為 2.4 nM (範圍為0.6-2.6 nM), 產生顯著的組蛋白 H4高度乙醯化。與 Trapoxin (TPX) 和 Chlamydocin 有效抑制HDAC1 或 HDAC4而不是 HDAC6不同，Trichostatin A 抑制這些HDACs，且抑製程度相似， IC50 分別為6 nM, 38 nM, 和8.6 nM。 Trichostatin A (100 ng/mL) 作用於MIA PaCa-2細胞，通過招募p300和 PCAF進入Sp1-NF-Y HDAC複合體，而誘導轉化生長因子βⅡ型受體(TβRII) 表達，複合體與TβRII 啟動子的DNA片段結合，伴隨著Sp1乙醯化，且與複合體相關的HDAC數理全部降低。Administration of Trichostatin A 按 0.5 mg/kg 劑量處理N-甲基-N-亞硝基脲致癌物誘發的大鼠乳腺癌模型，持續處理4周，具有有效的抗癌活性，即使按按高達5 mg/kg劑量處理也沒有任何可測量到的毒性。Trichostatin A 按10 mg/kg 劑量單獨腹腔注射給葯非轉基因和脊髓性肌萎縮症（SMA）模型鼠，導致乙醯化的 H3 和 H4組蛋白水平提高，也導致活運動神經元(SMN) 基因表達稍微提高。Trichostatin A 每天按10 mg/kg劑量處理SMA模型鼠，促進存活, 減輕體重下降，且增強運動行為。作用機制Trichostatin A對細胞周期素D1調控的影響方法：以不同濃度(20、100、400 nmol/L)的TSA處理A549細胞24 h,以RT-PCR、Western blot等方法檢測細胞周期素D1 mRNA和蛋白的表達水平；以染色質免疫沉澱技術分析400nmol/L的TSA處理A549細胞24 h后，細胞周期素D1基因核心啟動子組蛋白3第9位賴氨酸乙醯化(AcH3k9)水平。結果隨著TSA處理濃度的增加細胞周期素D1 mRNA和蛋白表達水平下降。在400 nmol/L TSA作用下，細胞周期素D1啟動子區組蛋白乙醯化程度下降。結論：TSA造成細胞周期素D1表達下調可能與細胞周期素D1啟動子乙醯化程度下降有關。Trichostatin A對多巴胺能神經細胞的影響方法：將體外培養多巴胺能神經細胞 SH - SY5Y 分為6組，DMSO 處理為對照組，不同濃度（50、100、200、500、1000 nmol/ L） TSA 處理為 TSA 組，處理48 h 後行 MTT 法檢測細胞活力；採用200 nmol/ L TSA處理細胞不同時間段，MTT 法檢測細胞活力，Western blot 檢測 Fra1表達；構建腺病毒載體過表達 Fra1或對照 GFP，檢測正常或 TSA 處理條件下過表達 Fra1對細胞活力的影響。結果對照組與50 nmol/ L TSA 組比較，細胞存活率差異無統計學意義，與100 nmol/ L TSA 組比較，細胞活力明顯減少（P ＜0.05），隨 TSA 濃度升高，活力減少更顯著（P ＜0.05）；200 nmol/ L TSA 處理細胞8 h 未檢測到抑制細胞存活（ P ＜0.05），處理16 h 有顯著抑制作用，處理時間越久抑制效應越明顯（ P ＜0.05）；Western blot 結果顯示，TSA 處理6 h 未抑制 Fra1表達（P ＜0.05），處理12 h 明顯抑制 Fra1表達，24 h 抑制效應更顯著（P ＜0.05）；過表達 Fra1促進細胞存活（P ＜0.05），顯著拮抗 TSA 的抑制存活效應（P ＜0.05）。結論：TSA 抑制多巴胺能神經細胞存活通過抑制 Fra1表達。Trichostatin A抑制乳腺癌細胞增殖能力方法：聯合應用兩種藥物作用於腫瘤細胞,應用RT-PCR的方法檢測MDA-MB-435細胞株p21和p27的mRNA轉錄水平的改變。通過WST方法來檢測乳腺癌細胞的增殖能力變化，將MDA-MB-435細胞根據藥物處理共分四組:①對照組;②AZA+TSA組;③AZA+TSA+4-OH TAM組;④4-OH TAM組。並且採用流式細胞儀來分析腫瘤細胞周期分佈的改變，將MDA-MB-435分成另外四組:①對照組;②AZA+TSA組;③AZA+TSA+E2組;④AZA+TSA+E2+4-OH TAM組。結果:TSA以及AZA聯合應用能使腫瘤細胞MDA-MB-435的p27的mRNA水平增加，而p21mRNA水平略減弱。增殖分析的四個組中:AZA+TSA組細胞增殖能力減弱(P＜0.01),同時出現細胞阻滯於S期，加入雌激素后細胞阻滯稍減弱.AZA+TSA+4-OH TAM組增殖能力進一步減弱(P＜0.01).4-OH TAM組增殖能力沒有改變。細胞周期分析的四個組中:AZA+TSA組出現細胞阻滯於S期,AZA+TSA+E2組細胞阻滯稍減弱.AZA+TSA+E2+4-OH TAM組細胞阻滯再次提高。結論：兩種藥物聯合應用能使得乳腺癌腫瘤細胞增殖能力下降，對於腫瘤細胞有一定抑制作用.