cd4檢測
細胞表面的CD4抗原進行標記並計數的方法
CD4檢測是指對細胞表面的CD4抗原進行標記並計數的方法。CD4是指分子量為55kDa、存在於細胞膜表面的單鏈糖蛋白,表達於部分T淋巴細胞、胸腺細胞及某些B淋巴細胞、EB病毒轉化的B細胞、單核-巨噬細胞及腦細胞膜上。CD4檢測有助於某些免疫疾病、感染疾病等的診斷。
● 向被檢測者解釋本操作的目的、方法等,消除顧慮;一般選取靜脈血進行檢測,采血前一天應清淡飲食、晚8點后避免進食和劇烈運動、避免飲酒以免影響結果,采血時避免情緒緊張。
● 1.免疫組織化學染色法
● (1)免疫熒光顯微技術:使熒光抗體與標本切片中細胞表面的CD4進行反應,洗滌除去遊離的熒光抗體后,在熒光顯微鏡下觀察。
● (2)免疫金銀染色技術:利用膠體金標記CD4對應的特異性抗體,通過免疫反應使膠體金顆粒沉積在抗原位置,加入銀顯影液,用對苯二酚將銀離子還原成銀原子,被還原的銀原子沉積在膠體金顆粒周圍形成“銀殼”,最終在光鏡下就能看到被放大的黑褐色物質。易於辨別陽性物質,而且能檢測微量的抗原。
● 2.流式細胞術
● 利用熒光素標記的CD4對應的單克隆抗體做分子探針,在流式細胞儀上檢測CD4的表達,計數CD4陽性細胞的百分率。