生物化學與分子生物學實驗技術

生物化學與分子生物學實驗技術

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作者：王曉華、朱文淵 主編

出版日期：2008年2月 書號：978-7-122-01939-4

開本：16 裝幀：平 版次：1版1次 頁數：184頁

全書共分為三部分，前兩部分側重於理論，第三部分為實驗部分。在理論部分，介紹了生物化學和分子生物學的基本知識，常用實驗技術及其原理，使得學生在開始實驗前能夠對實驗涉及的技術有一個理論層面的認識。第三部分精選了29個實驗。附錄中包括了常用生物化學試劑的配製方法。

本書適合臨床醫學、醫學檢驗、影像學、預防醫學、生物科學、生物技術等相關學科的本科學生使用。

第一部分生物化學與分子生物學實驗基本知識1

第一節生物化學與分子生物學實驗室規則1

第二節生物化學實驗的基本操作3

第二部分生物化學與分子生物學實驗原理與技術7

第一節分光光度法7

第二節離心技術15

第三節層析技術27

第四節電泳41

第五節分子克隆49

第六節聚合酶鏈式反應(PCR)54

第七節核酸分子雜交技術62

第三部分生物化學與分子生物學實驗71

第一節生物化學基本實驗71

實驗1雙縮脲法測定蛋白質濃度71

實驗2Folin酚試劑法(Lowry法)測定蛋白質濃度74

實驗3考馬斯亮藍染色法測定蛋白質含量76

實驗4紫外分光光度法測定蛋白質79

實驗5血清蛋白質醋酸纖維素薄膜電泳81

實驗6預染血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳86

實驗7聚丙烯醯胺凝膠電泳分離血清乳酸脫氫酶同工酶88

實驗8SDS聚丙烯醯胺凝膠電泳(SDSPAGE)92

實驗9等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點97

實驗10影響酶活性的因素100

實驗11蔗糖酶的專一性103

實驗12底物濃度對酶促反應速度的影響——過氧化氫酶Km的測定105

實驗13抑製劑對酶促反應速度的影響109

實驗14血清丙氨酸氨基轉移酶（ALT）活性測定(賴氏法)111

實驗15血清甘油三酯含量的測定——乙醯丙酮法114

實驗16血漿高密度脂蛋白（HDL）膽固醇含量的測定116

實驗17酮體的生成118

實驗18運動對全血乳酸含量的影響120

第二節生物化學綜合實驗122

實驗19激素對血糖濃度的影響122

實驗20血清γ球蛋白的分離與純度鑒定126

實驗21血清清蛋白的分離及電泳鑒定130

實驗22核酸的分離提取、成分鑒定及含量測定133

第三節分子生物學實驗148

實驗23大腸桿菌感受態細胞製備及外源DNA的轉化148

實驗24質粒DNA的提取152

實驗25質粒DNA的限制性內切酶酶切154

實驗26DNA的瓊脂糖凝膠電泳157

實驗27PCR基因擴增159

實驗28Southern雜交分析162

實驗29Northern雜交分析166

附錄169

附錄Ⅰ化學試劑分級及注意事項169

附錄Ⅱ常用緩衝液配製方法170

附錄Ⅲ重鉻酸洗液的配製與再生173

參考文獻175

第一部分生物化學與分子生物學實驗基本知識1

第一節生物化學與分子生物學實驗室規則1

第二節生物化學實驗的基本操作3

第二部分生物化學與分子生物學實驗原理與技術7

第一節分光光度法7

第三部分生物化學與分子生物學實驗15

第一節生物化學基本實驗15

實驗1雙縮脲法測定蛋白質濃度15