放射免疫技術

放射免疫技術

放射免疫技術是基於競爭性結合反應原理的放射免疫分析(RIA)。

基本介紹


放射免疫技術
一,原理及分類
二,常用的放射性核素
三,標記物製備及鑒定
四,抗血清鑒定
第二節放射免疫分析
一,基本原理
二,實驗方法及測定
一,基本原理
二,IRMA與RIA的比較
思考題
小結
免疫技術:以抗原-抗體反應原理為基礎,對樣品中相應抗原或抗體進行檢測.
標記技術:將可被探測的示蹤物質用化學方法與化合物連接.
標記免疫分析:用可微量或超微量檢測的示蹤劑標記抗原,抗體,檢測免疫反應結果並確定待檢物.
標記免疫技術-基本概念
常見標記免疫技術
放射免疫技術
酶免疫技術
熒光免疫技術
第一節放射免疫技術
稍後又發展了非競爭性結合的免疫放射分析(IRMA).該類技術具有靈敏度高,特異性強,重複性好,樣品及試劑用量少,操作簡便且易於標準化等優點,廣泛應用於生物醫學研究和臨床診斷領域中各種微量蛋白質,激素,小分子藥物和腫瘤標誌物的定量分析,對相關學科的發展起到了極大地推動作用.
放射免疫
RIA
以標記抗原與反
應系統中未標記
抗原競爭結合特
異性抗體來測定
待檢樣品中抗原
量.
免疫放射
IRMA
以過量標記抗體
與抗原非競爭結
合,採用固相免
疫吸附載體分離
遊離和結合標記
抗體.
放射受體分析
RRA
放射配體結合
分析RBA
其它
一,放射免疫技術-原理及分類
二,放射免疫技術-常用的放射性核素
125I3H
射線γβ
理化性活潑差
半衰期60.2d12.3y
標記方法簡單複雜
標記設備低廉昂貴
測量條件簡單複雜
常用標記核素
125碘-標記物的製備-標記
125I-
化學或酶促反應,將
放射性負電碘離子氧
化成碘原子或正電碘
離子,通過取代反應
置換被標記物分子中
酪氨酸酪胺殘基以
組胺殘基上的氫原
子.
125I或125I+
125I-標記物
(混合物)
Ch-T,LPO氧化
取代反應
直接標記法
三,放射免疫技術-標記物製備及鑒定
使用無還原劑的高比放射性碘源
被標記物用量要少
ch-T用量要低
控制總反應體積