免疫分析法
免疫分析法
免疫分析法是利用毒物 與標記毒物競爭性結合抗體檢測毒物的方 法。可用於某些毒藥物的篩選試驗。利用免 疫分析法進行檢測，當沒有加入非標記毒藥 物時，抗體完全與標記毒藥物結合生成標記 毒藥物-抗體複合物。加入非標記毒藥物后，非標記毒藥物也將與抗體結合，生成非標記 毒藥物_抗體複合物，從而抑制標記毒藥物 與抗體的結合反應，使生成產物中標記毒藥物的含量降低。若抗體和標記毒藥物的量固 定，則加入的非標記毒藥物的量與複合物中 標記毒藥物的含量之間存在一定的函數關 系。選擇合適的方法檢測複合物中的標記毒 藥物，則可據此計算出檢材中毒藥物的量。
在藥物分析中，免疫分析法的應用主要集中在以下幾方面：(1)在實驗藥物動力學和臨床藥物學中測定生物利用度和藥物代謝動力學參數等生物藥劑學中的重要數據，以便了解藥物在體內的吸收、分解、代謝和排泄情況；(2)在藥物的臨床檢測中，對治療指數小、超過安全劑量易發生嚴重不良反應或最佳治療濃度和毒性反應濃度有交叉的藥物血液濃度進行監測；(3)在藥物生產中從發酵液或細胞培養液中快速測定有效組分的含量，以實現對生產過程的在線監測；(4)對藥品中是否存在特定的微量有害雜質進行評價。
非標記免疫分析技術：免疫擴散、免疫電泳
標記的免疫分析技術：酶免疫分析、放射免疫分析、磁敏免疫分析、其它免疫分析法（熒光免疫技術、膠體金免疫技術、發光免疫技術和鐵蛋白免疫技術等）
基本原理：可溶性的抗原和相應的抗體在溶液或凝膠中彼此接觸，形成不溶性抗原-抗體複合物沉澱。
單向免疫擴散(Single immunodiffusion)
基本原理：指抗原和抗體兩 種成分中只有一種擴散，另 一種被固定在凝膠中。
雙向免疫擴散（Double immunodiffusion)
基本原理：指可溶性抗原與相應抗體在瓊脂介質中相互擴散，彼此相遇后形成一定類型的特異性沉澱線。
基本原理：免疫擴散與電泳技術相結合。
類型：對流免疫電泳、火箭免疫電離、免疫電泳、雙向免疫電泳（交叉免疫電泳）
基本原理：多數蛋白質抗原在鹼性緩衝液中帶負電荷，在電泳時從負極向正極移動。抗體在鹼性緩衝液只帶微弱的負電 荷，且相對分子質量較大，電泳力較小，在瓊脂電滲力作用 下由正極向負極移動。結果抗原和抗體定向對流，在兩孔間 相遇時發生反應，並在比例合適處形成肉眼可見白色沉澱線。
（Rocket immunoelectrophoresis)
基本原理：也稱免疫擴散，抗原在含有定量抗體的瓊脂糖中泳動，兩者比例適宜時，在較短時間內生成錐形的沉澱峰。在一定濃度範圍內，沉澱峰的高度與抗原含量成正比。
基本原理：先將待側樣本作瓊脂凝膠電泳，各蛋白抗原組分被分成不同的區帶，然後與電泳方向平行挖一小槽，加入相應的抗血清，把分成區帶的蛋白抗原成分作雙向免疫擴散，在各區帶相應的位置形成沉澱弧。
基本原理：採用熒光素、同位素或酶等示蹤物質 標記抗體（或抗原）進行抗原 -抗體反應，通過對免疫複合物中的標記物的測定，達到對免疫反應進行監測的目的。
標記免疫技術主要類型：放射免疫技術、酶免疫技術、熒光免疫技術、化學發光免疫技術
放射免疫標記技術（RIA）
基本原理：根據抗原抗體特異性結合的原理，以放射性同位素標記抗原或抗體，根據射線的多少定性或定量測定待檢標本中抗體或抗原的量。
酶免疫標記技術（ELISA）
基本原理：指酶標記抗體或酶標記抗體進行的抗原抗體反應，然後通過酶與底物產生顏色反應，用於定量測定。
磁敏免疫分析（MI）
基本原理：通過分子靶標綁定方法，將納米級導磁鐵珠（免疫磁珠）與待測蛋白抗體結合併固化於巨磁阻（GMR, Giant Magneto Resistance）晶元表面，基於GMR晶元的巨磁阻效應，晶元表面的免疫磁珠會劇烈影響GMR的原態電阻，根據GMR電阻變化率實現定量測定樣本中待測抗體含量。磁敏免疫分析技術屬於生物晶元技術家族成員。
熒光免疫分析（FIA）
基本原理：以熒光素標記抗體或抗原作為示蹤劑的一種新的免疫分析技術，其原理與ELISA相似。該法既可對液體中的抗原和抗體定量，也可對組織切片中的抗原、抗體進行定性和定量。一般由於樣品、試劑的自身熒光和激發光的散射，本底熒光高，影響了測定的靈敏度。一般以鑭系元素作為熒游標記（示蹤劑）。示蹤劑與相應抗原或抗體結合后，藉助熒光檢測儀察看熒光現象或測量熒光強度，從而判斷抗原或抗體的存在、定位和分佈情況或檢測受檢標本中抗原或抗體的含量。
膠體金免疫技術（CGIA ）
基本原理：以膠體金作為示蹤標記物，主要利用了金 顆粒具有高電子密度的特性，在金標蛋白結合處，在顯 微鏡下可見黑褐色顆粒，當 這些標記物在相應的配體處 大量聚集時，肉眼可見紅色 或粉紅色斑點。
化學發光免疫技術（CLIA ）
基本原理：利用化學或生物發光系統作為抗原抗體反應的指示系統，藉以定量檢測抗原或抗體的方法，發光物質可直接作為抗原抗體的標記物，也可以遊離形式用於催化劑（酶）和輔助劑標記的抗原或抗體的發光反應中。
基本信息
- 中文名
- 免疫分析法
- 類型
- 分析法
- 方法
- 免疫擴散、免疫電泳
- 定義
- 利用毒物結合抗體檢測毒物的方法
- 領域
- 醫學
- 參考資料
- 《法醫學辭典》