培養平板

培養平板

培養平板(culture plate)是被用於獲得微生物純培養的最常用的固體培養基形式,它是冷卻凝固后的固體培養基在無菌培養皿中形成的培養基固體平面,常被簡稱為平板(plate)。

巧克力培養基


【用途】主要用於嗜血桿菌的分離,亦可用於奈瑟菌的增菌培養。
【原理】流感嗜血桿菌培養時,需要依賴血液中的X及V因子方能生長繁殖,當培養基加熱至80~90℃時,可使血液中的紅細胞破裂,以利於嗜血桿菌,奈瑟菌等的生長培養。凡疑有這些菌種存在的標本,均應接種巧克力平板。血液標本培養,增菌后又細菌生長,若移種巧克力平板上,有利於分離更多的細菌。
【成分】牛肉浸出液1L蛋白腖10氯化鈉5瓊脂15無菌脫纖維馬血、羊血或兔血100mlpH7.2~7.4
【製備】將前四項成分混合,加熱溶化,校對pH高壓滅菌(121℃15min)后在80~90℃以無菌方法加入血液,搖勻後置90℃水浴中。維持該溫度15min,使之呈巧克力色取出,至室溫冷至約50℃,傾制平板。凝固后,抽樣置於35℃培養18~24h,如無細菌生長,冷藏備用。
【接種】將可疑標本直接劃線接種於該培養基上,置35℃普通培養或置含5%~10%二氧化碳環境培養18~24h,取出觀察細菌生長狀況。
【觀察結果】流感嗜血桿菌菌落微小(0.8mm),無色透明、光滑整齊、似露滴狀,48h后達1.5mm,從血液或腦脊液中分離的菌落往往形成液狀,菌落較大,老培養物菌落中心呈凹陷。
【質量控制】流感嗜血桿菌ATCC10211,生長良好,菌落典型。肺炎鏈球菌,ATCC6305,生長良好,菌落典型。
【保存】置冰箱,1周內用完。

血瓊脂培養基


【用途】適用於各類需氧及兼性厭氧細菌生長,一般細菌學檢驗標本的分離培養、溶血鑒別及菌種保存
【原理】羊血或兔血時細菌生長繁殖的良好營養物質。在45℃~50℃的基礎培養基中加加入血液(5~10%)可以保存血液中某些不耐熱的生長因子,同時血細胞不被破壞。若將NaCl的濃度提高到0.85%,則可使血平皿經35℃18~24h后色澤仍然鮮艷。在血平板上除可以觀察菌落的形態外,還可以判斷溶血的情況:菌落周圍的培養基內紅細胞完全破壞為溶血。菌落周圍呈綠色為ɑ溶血。溶血的情況可以顯微鏡下用低倍鏡觀察
【成分】牛肉浸出液1L蛋白腖10氯化鈉5瓊脂15無菌脫纖維羊血60ml pH7.2~7.4
【製備】將前四項成分混合,加熱溶化,校對pH,置三角瓶內,高壓滅菌(121℃15min)后冷至約50℃ ,加入無菌纖維羊血,旋轉式充分搖勻后傾平板。血瓊脂層厚4mm。凝固后,抽樣置於35℃培養18~24h,如無菌生長,冷藏備用。
【接種】取標本增菌培養物或純培養物劃線接種到平板上,置35℃培養1~2d,觀察結果
【觀察結果】在血平板上除可以觀察菌落的形態外,還可以判斷溶血的情況:菌落周圍的培養基內紅細胞完全被破壞為溶血,菌落周圍呈綠色為ɑ
【質量控制】化膿性鏈球菌,ATCC19615,生長良好,-溶血。肺炎鏈球菌,ATCC6303,為ɑ溶血。表皮葡萄球菌,ATCC12228,生長良好,不溶血。

營養肉湯


【用途】用於一般細菌的增加培養,加入1%的瓊脂粉亦可作營養瓊脂。
【原理】該培養基含有氮及微量無機鹽,適宜一般細菌的生長繁殖,因此是最基礎的培養基。
【成分】牛肉浸液1L蛋白腖10氯化鈉5pH7.2~7.4(牛肉浸液可用3.0g牛肉膏和1L蒸餾水代替)
【製備】上述各成分混合溶解,校正...