Marker

應用：

在運動信息獲取領域中（如三維動作捕捉、三維步態分析等），通常在捕捉對象上粘貼Marker，Marker可以反射設備發出的光線（通常是紅外光線），反射的數據再被設備接收，然後系統對接收數據進行處理。這樣，就可以實現物體/人體運動信息的獲取。

Marker 作為英文單詞有很多含義。

標記（Marker），染色體上一個可以被識別的區域（比如限制性內切酶的酶切點，基因的位置等）。標記的遺傳能夠被檢測出來。標記可以是染色體上有表達功能的部分（比如基因），也可以是沒有編碼蛋白質功能但遺傳特性能夠被檢測出來的部分。

蛋白marker可分為：

一、未預染的Marker即寬分子量蛋白標準、高分子量蛋白標準以及低分子量蛋白標準;

二、預染的Marker即單色預染和多色預染。

在western Blot過程中，分子量Marker就像個螺絲釘一樣沒雖然是個小細節，然而就是這樣一個小細節對實驗結果有著不可忽視的作用。這個 Western Blot參照家族的一員的作用主要是用來指示蛋白條帶所對應的分子量大小，只有標準量精確無誤了，實驗結果才有說服力，除此之外，蛋白標準還有表示轉移成功或者蛋白在凝膠上的電泳程度等等的作用，所以選擇正確的蛋白Marker也是western blot實驗成功的必要條件之一。

總體來說，蛋白分子量標準可以分成未染蛋白分子量標準、預染蛋白分子量標準二個級別。以下是關於蛋白分子量標準的小敘：

一. 未染色(pre mixed)蛋白分子量標準

未染色的蛋白分子量標準是最簡單，也是最準確的一種。由於沒有附帶染料分子或者是標記分子，所示大小正好是蛋白原本的大小，是精確判斷蛋白大小必須的。現在的marker多數都選用預混和的Marker，方便不同大小的蛋白比較。預混的Marker通常有幾條帶加倍濃度作為指示，因為混合的條帶越多，越不好記，誰知道哪條是那條！數到眼都花了。所以當看到特別濃的那幾條標誌帶就記得是哪裡了。不過要記得，小帶通常都不那麼容易看清楚的。在選擇上來說，當然是選擇其中至少有一條條帶和自己的目的蛋白大小相近的最好，越近越好。如果你的蛋白不幸在兩條跨度較大Marker條帶之間，選別的Marker吧。預混的Marker使用上不如預染Marker(pre-stained)好用，因為電泳過程中完全看不到，要和目標蛋白一起等到最後染色才“開蠱”，無法對實驗起預示參照作用。完全屬於“後知后覺”型的，當然還是比“不知不覺”不做對照的要好。

① 寬分子量蛋白標準

如果從實驗室總體考慮的，就選範圍盡量寬，條帶分佈比較均勻的，這樣你的蛋白無論在哪個區間都容易判斷，避免正好落在一段空白區的危險。不過條帶越多，每次上樣量也就越費。拿到Marker后，如果買的是大包裝，就應該考慮分裝。多次反覆凍融對於蛋白的危險，不用多說吧。另外要記得，寬譜的Marker不一定每條都能看到的，特別是Mini Cell。如果側重大蛋白，那小的可能就已經跑掉了，不是質量不好哦。

② 高分子量蛋白標準

通常在檢測大分子量蛋白經常使用到高分子量蛋白標準，

③ 低分子量蛋白標準

在一般的蛋白電泳當中，更常用的是低蛋白標準分子量，除了有指示蛋白大小的作用以外，有時還可以用作粗略的定量。實驗室用在一般蛋白電泳的低分子量蛋白標準中。

在低分子量蛋白標準這裡還包括可特別小的蛋白標準，比如30kD以下蛋白或者多肽的分離辨別。其中GE的從2kD到16kD之間有6條帶的蛋白標準挺不錯，另外提醒一句，特別小的蛋白Marker條帶如果要顯色好，上樣一定要上足夠的量哦。

二。預染蛋白分子量標準

預染蛋白分子量是一些純化好的蛋白混合物，通過與染料共價耦聯，在電泳過程中或者轉膜時可以直接觀察到。預染蛋白分子量的出現方便了我們的實驗，這種蛋白分子量標準可以幫助我們在電泳時、電泳后，以及轉膜后監測電泳情況和估計遷移率——比如，已知垂直電泳最佳分辨區域大約在膠的2/3處，如果使用預染Marker就可以預測目標蛋白進入最佳分辨區時停止電泳以得到最佳分辨效果；如果觀察到Marker電泳異常也可以及時終止電泳；另外在Western Blot轉膜以後可以直接觀察蛋白轉膜是否完全，還可以在膜上標記蛋白分子量，所以吸引了許多實驗室人員購買預染蛋白標準。值得注意的是預染蛋白Marker與染料共價耦聯，所以在不同的緩衝條件下電泳時遷移特性可能會發生某些變化，可能導致一些偏差，所以不太適合精確定位蛋白——不過多數情況下Marker的條帶未必能和我們的目標蛋白完全一樣，我們得到的也不過是一種相對Marker指示的參考大小，最後都需要Western來定性，所以如果不是要區分大小相近的條帶，預染Marker還是很好用的，而且也可以和未染色的蛋白標準一起使用。

預染蛋白標準可以分為兩種：單色預染和多色預染，其實區別就在於幫助在實驗過程中辨認某個條帶的大小——Marker條帶越多參考價值越大，可就越難辨認區分，如果用不同的顏色來區別就比較好辨認啦。如果沉悶的電泳實驗中跑出五顏六色的彩虹Marker，此時心情想必會愉快一些！單色的Marker通常是利用其中某些條帶加倍濃度來提示其大小的。還有一點特別要注意，由於轉膜是一個將膠里的Marker濃縮在潔白的膜上，所以需要的上樣量相對少一些，如果想要在電泳過程中看到美麗的“彩虹”，或者單色的Marker往往需要比說明書里多加一些Marker的。

三、Western專用的蛋白分子量標準

①生物素標記蛋白標準

未染色的Marker在做Western時，需要在印跡前先用麗春紅或者是SYPRO熒光蛋白染色液等不干擾Western Blot的染色方法顯色，在膠上做標記最後才能“拼”在最後的結果中，如果是預染的Marker就要在轉膜后標記膜，或者剪膜，最後在“拼上”。要是想直接將Marker結果顯示在最後結果上，不用手工作圖或者拼接，那就要Western專用的Marker了。比如生物素標記的蛋白標準。這種方法主要是配合化學發光法：在蛋白分子量上標記生物素，通過帶有抗生物素的抗體或者偶聯鏈親黴素的抗體，在化學發光檢測到目的蛋白帶時就可以同時看到相應的分子量標準一起發光顯影了。不同於普通蛋白分子量標準的便宜、預染蛋白分子量的方便，這一方法的優點是與Marker和目的蛋白對應性好，同時在同張片上顯示，不用拼接，利於分析。缺點是如果樣品中帶有生物素背景，那個抗生物素抗體有可能影響結果，而且反應體系太過複雜也會幹擾實驗結果。

②特殊標記蛋白標準

在經過修飾的蛋白標準中，除了生物素標記以外，近些年由於下游蛋白操作的豐富化與複雜化，也出現帶有“尾巴”的蛋白標準。比如His-Tag，如果每個Marker條帶都有His –tag，那二抗添加His-Taq抗體很容易將Marker條帶顯示在Western結果上。很方便，問題就是有可能有潛在的干擾，比如樣品中正好有類似Histag的結構。不過這可以通過對照檢測的。

《死亡空間》：神印

EA恐怖遊戲《死亡空間》中的虛構產物。精神作用：又名為神印。EA恐怖遊戲《死亡空間》中的虛構產物。Marker具有精神控制力。Marker可以與人進行交流，並將自己的信息和解碼信息寫到人的大腦中，Isaac和Stross就是與Marker交流過的人，只不過stross可能是因為承受能力不行瘋掉了，主角Isaac目前腦內有紅Marker的完整信息。 2.Isaac不但可能被洗腦，而且似乎Marker寫入的信息會在大腦內複製最後成為一個完整的Marker集群，所以似乎這玩意也會佔用腦內的記憶空間來釋放存儲空間來存這些數據，表現癥狀就是失憶，新近發生的事記不起來。 3.第一個紅Marker是人造的實驗，後來控制不住封印在那了，第二代里Isaac看到的Marker是他腦內信息補出來的，也是人造的。 4.Marker交流的時候會發送編碼，承受能力不行的或者天生解碼不行的人就意味是一堆雜訊啥的，產生各種幻覺被逼瘋，但有體質特別的，有解碼的人則不同，Isaac估計就是體質好，有解碼的人，就好比遊戲機是源碼輸出的音頻，你需要解碼器（集成在功放內）來解這些音頻。 5.Marker上具有異形的純DNA，上面的文字是基因序列，且任何碎片均具有完整的序列。 6.蝙蝠怪可以改造屍體使死亡細胞進化，變成異形（這個蝙蝠怪應該是人為製造的，看動畫里，人類甚至掌握了讓人產生幻覺的科技，也就是說，人類對Marker的研究有一定成果），2代里的這個複製Marker似乎更可在一定範圍內遠程直接改造死亡細胞，估計這跟Marker的大小和能量有關係，可能越大的Marker的控制範圍和改造能力就越大。 7.不論是目前人造的這些個Marker還是始祖Marker，都有自我意識，都可以跟人神交流，且都有自己的目的和任務在身，並且可以自動按照自己被定義的任務執行。 8.根據統一教的教義，Marker是神，也就是高智慧外星人6500萬年前留在地球上的.（統一教的教義是始祖Marker跟他們創始人神交告訴創始人的，估計始祖Marker人品比起這些複製Marker要好，沒在忽悠他），人死後是新生命的開始，所有教徒死後貢獻肉體，最後通過“歸一”將所有人靈魂歸一到marker上，人類補完，進入永生成神之路，人類屬於Marker的產物），人類最後需要將肉體和靈魂還給Marker得到永生。這裡需要注意的是，6500萬年前，正是現在科學家推斷小行星撞擊地球造成恐龍滅絕的時候，所以說呢，製作組這裡是在暗示咱們，恐龍消亡，人類產生是Marker帶來的結果。 9.Marker既可以製造異形，也可以壓制異形，且當Marker完全被粉碎后，其負責控制的異形的肉體也將消失。 10.軍隊政府將Marker當成人類進化的工具和武器來研究，統一教則是崇拜Marker。 11.從2代看，Marker的人類補完計劃終極啟動需要兩個條件：第一，足夠數量的異形聚集（2代里那麼多異形聚集到Marker旁邊后Marker才開始啟動了人類補完計劃），第二，需要足夠的許可權（2代里的人造marker的許可權通過插眼從I工身上提取，此外2代的人造marker還需要把製造者的靈魂接納了才有完整的啟動許可權，2代的人造Marker的人品不如1代的人造Marker的人品好，把Isaac給騙到Marker前準備吸收Isaac，結果Isaac鑒定的用腦內的最高許可權滅了Marker）。