槲皮苷

中文名稱：槲皮苷

中文別名：榭黃甙；槲皮甙；櫟素；橡皮甙

英文名稱：quercetin

英文別名：C.I. 75720; Quercitrin; 2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-4-oxo-4H-chromen-3-yl 6-deoxy-alpha-L-mannopyranoside; 2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-4-oxo-4H-chromen-3-yl 6-deoxyhexopyranoside; 2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-4-oxo-4H-chromen-3-yl 6-deoxy-alpha-L-galactopyranoside; 2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-4-oxo-4H-chromen-3-yl (5xi)-6-deoxy-alpha-L-lyxo-hexopyranoside

CAS：522-12-3

EINECS：208-322-5

分子式：CHO

分子量：448.3769

槲皮苷作對照品測定總黃酮的含量

香柏為柏科圓柏屬植物，主要用於園林裝飾，其葉中較多的揮髮油用作香精的原料。柏科圓柏屬植物中主要含有：揮髮油、黃酮、萜類等成分。從香柏水提取物中分離純化出13個化合物，其中雙黃酮2個，5個黃酮；初步的HPLC分析結果表明槲皮苷含量較大。該屬植物中的總黃酮具有清除 DPPH 自由基活性能力。下面為香柏總黃酮含量測定方法，為香柏總黃酮的含量測定提供科學依據。

1 實驗材料

香柏樣品於2008年8月采自四川小金縣，經鑒定為柏科圓柏屬植物香柏。槲皮苷從香柏中分離純化，其結構經Ms，UV，IR， HNMR， CNMR等波譜進行表徵，純度經HPLC分析大於99．5%。

通用UV-1901紫外分光光度計，METTLER AE24O電子天平，其餘試劑均為國產分析純。

2 實驗方法及結果

2.1 對照品溶液的製備

精密稱取在50C下，真空乾燥至恆重的槲皮苷標準品35．02mg，用無水乙醇溶解，定容至100ml，配製成濃度為0．35mg/ml的對照品溶液。

2.2 供試品的製備

精密稱取1g乾燥的香柏乾粉，置於50ml圓底燒瓶中，加60%的乙醇溶液迴流提取50min，用布氏漏斗抽濾，旋轉蒸發儀蒸干作為供試品，精密稱重。

2.3 最大吸收峰的選擇

精密吸取槲皮苷標準液3ml，加入無水乙醇9ml，振搖溶解，置於50ml容量瓶中，靜置5min，再加入5%的 NaNO溶液2ml，振搖，靜置6min，加入10%的AI(NO)溶液2ml，振搖，靜置6min，最後加入5%的NaOH溶液20ml，振搖，靜置15min，用無水乙醇定容至刻度，以沒加入槲皮苷且按照上述相同方法配製的乙醇溶液為空白溶液。在200nm～700nm的波長範圍內掃描，結果槲皮苷在270nm，355nm，505nm處均有最大吸收，空白溶液無干擾。

精密稱取供試品浸膏2mg，加入無水乙醇10ml溶解，按上述方法操作。在255nm，325nm，500nm處均有較大吸收。精密稱取供試品浸膏2mg，加入無水乙醇10ml溶解，不加NaNO-Al(NO)。NaOH顯色，定容至50ml，在200nm～700nm的波長範圍內掃描，結果在220nm～400nm處有吸收，而在500nm左右沒有吸收，因此選用 500nm作為檢測波長。

2.4 標準曲線的製備

分別精密量取1．0ml、2．0ml、3．0ml、4．0ml、5．0ml、6．0ml的槲皮苷標準品(0．35mg/ml)儲備溶液，按照2．3 項下的操作方法進行操作。以第一瓶為空白液，在500nm波長處測定吸光度A值，以A值(y)為橫坐標、槲皮苷的含量(x，mg/ml)為縱坐標作線性回歸，得標準曲線：Y=12.923x-0.0048，r=0．9994。結果表明槲皮苷濃度在 0.017mg/ml一0.040mg/ml之問呈線性關係，滿足含量測定要求。

2.5 供試品顯色穩定性實驗

將2．2項下製備的供試品，按2．3項下的顯色方法進行顯色，在500nm波長下每隔5min測定其吸光度。

實驗結果表明，供試品溶液在30min內顯色穩定，滿足含量測定要求。

2.6 重複性實驗

精密稱取1g乾燥的香柏乾粉，共5份，分別置於50ml圓底燒瓶中，加60%的乙醇溶液迴流提取50min，用布氏漏斗抽濾后，旋轉蒸發儀蒸干，50C下真空乾燥至恆重．稱所得浸膏總重，然後從該總浸中精密稱取供試品浸膏約2．00mg，加入無水乙醇10ml溶解，按2．3項下的方法操作，在500nm處測定吸光度。然後計算生葯中總黃酮的含量。5份生葯樣品中黃酮含量的RSD為0．92%。實驗結果表明，香柏中總黃酮的含量測定方法重現性好。

2.7 精密度實驗

取2．5項下的同1份溶液按相同的方法在500nm波長下，測定5次吸光度值，其精密度的RSD為1．0%。試驗結果表明該方法精密度滿足含量測定要求。

2.8 加標回收實驗

精密稱1g乾燥的香柏乾粉，共5份，放入50ml圓底燒瓶中，將2．1項下配置的標準品溶液，量取10．00ml，放入100ml容量瓶中，定容至100ml，用移液管精密量取2．0ml分別加入前述圓底燒瓶中，(相當於加標準品0．07mg) 按2．2項下的方法製得供試品溶液，按2．4項下的顯色方法顯色，測定吸光度值。測得加標平均回收率為105．4%， RSD為0．25%。

3 討論

槲皮苷是香柏中含量較多的一種黃酮類成分，其母核結構和吸收波長與蘆丁基本一致，本實驗採用 NaNO一AI(NO)-NaOH方法顯色，顯色穩定，方法重現性好，準確度滿足含量測定要求。選用500nm吸收波長，能較好的排除其他非黃酮類成分的干擾，較準確的反應提取物中總黃酮的含量。用上述含量測定方法測定三批香柏樣品的總黃酮含量，分別為：4．14%，4．15%，4．14%．因此該方法可以作為香柏總黃酮含量的測定方法。

對中樞神經系統的作用

多項研究表明槲皮苷對中樞神經系統有抑制作用，從百合花中分離出槲皮苷進行動物實驗，研究表明槲皮苷能延長戊巴比妥誘導的小鼠睡眠時間，具有一定的鎮定催眠作用。

對心血管系統的作用

槲皮苷具有抗動脈粥硬化（AS）的作用，研究證實oxLDL是誘發動脈粥樣硬化的關鍵因素。最新研究表明槲皮苷能顯著降低高脂血症大鼠的TC、TG、LDL-C水平，明顯升高HDL-C水平，對家兔離體主動脈環具有舒張作用，且其舒張作用為非內皮依賴性，具有潛在調血脂、降血壓作用。

抗氧化作用

槲皮苷具有清除多種活性氧自由基的能力，能抑制促氧化性藥物誘導的TBARS產生，且對不同的促氧化性藥物的抑制作用亦有所差異。

抗腫瘤作用

槲皮苷能抑制TPA誘導的腫瘤轉化，下調UVB或TPA誘導的AP-1和NF-kB轉錄激活。此外，槲皮苷還可以促進Nrf2激活和提高GST活性。

抗炎鎮痛作用

槲皮苷具有一定的抗炎活性，主要表現為致炎性因子的抑制作用。

抗病毒作用

槲皮苷能顯著抑制HSV2活性，能強烈抑制流感病毒A/W3/33的感染作用，在病毒感染的初級階段即可通過間接與病毒因子反應來抑制病毒複製，且抗病毒作用強於奧司他韋。

此外，槲皮苷還有降血糖血脂、止血、防治基因突變性疾病的作用。

槲皮素及其糖苷常用的提取方法有浸漬法、鹼提酸沉法、迴流法和超聲法等。

（1）浸漬法 浸漬法是最簡單的提取方法，即選用一定量的溶劑，將被提取物浸漬一定時間，過濾除去濾渣，濃縮濾液即可。該方法耗時長且得率較低，故近年來很少用於化合物的提取，但在比較不同提取方法的優劣時可用作對照。王文清等以 70% 乙醇作為溶劑，分別採用超聲提取30min，加熱迴流1h，浸漬12h 三種方法提取20g細梗胡枝子藥材，得到槲皮素的含量分別為4. 89、5.39 和 4.71μg/ g，蘆丁的含量分別為36.70、37.53和 34.68μg/ g。結果顯示，採用加熱迴流法提取槲皮素和蘆丁的提取率均較高，浸漬法提取率最低。

（2）鹼提酸沉法 鹼提酸沉法是提取植物中槲皮素及其糖苷的傳統方法之一，該方法主要是利用黃酮苷類化合物易溶於鹼性水溶液，難溶於酸性水溶液的性質。趙希等提取槐米中蘆丁和槲皮素時，20g的槐米粗粉加入0.4%的硼酸水溶液200ml，用石灰乳調節pH值8~9。在微沸條件下攪拌提取30min，將濾液用濃鹽酸調節pH值2~3，靜置12h后離心處理，沉澱用pH值1~2的濃鹽酸洗滌一次，蒸餾水洗滌至中性，沉澱物經65℃真空乾燥得到蘆丁粗品。精製蘆丁后取1g，用2%的HSO溶液80ml，加熱迴流90 min 轉化得到槲皮素。

（3）迴流法 迴流法也是提取槲皮素及其糖苷常用的方法之一，通常是將藥材加入到一定溶劑中進行迴流，採用正交試驗法考察提取時間、溶劑用量和濃度等因素的影響。吳傑等分別用迴流法與浸漬法提取仙人掌中的槲皮素，結果得到提取物中槲皮素的含量分別0. 2423、0. 2018 mg / g，可見迴流法的提取率比浸漬法更高。該研究還用正交試驗法考察了溶劑、溶劑濃度、迴流時間、仙人掌粉末粒度四個因素對提取效率的影響，確定最佳迴流提取條件為過60目篩的乾燥仙人掌粉末10g，加95%甲醇 200ml，迴流3 h。用迴流法提取槲皮素及其糖苷操作簡單，提取率高，存在溶劑有毒以及加熱時易發生危險等缺點。

（4）超聲提取法 近年來，超聲提取法得到了廣泛的應用，它具有時間短、得率高、安全、可靠、無毒等優點。吳景林以不同提取試劑分別用迴流法和超聲提取兩種方式提取魚腥草中的槲皮素，並對提取率進行了比較。結果表明，超聲提取的提取率稍低於迴流提取，差異不顯著，但超聲提取更簡捷、快速。因此，考慮到經濟性，超聲提取法優於迴流提取。