三萜
三萜
三萜類徠成分是一類基本母核由30個碳原子所組成的萜類化合物,以遊離形式或以與糖結合成苷或酯的形式存在於植物體內,具有多方面的生化活性,常將其作為重要製劑定性、定量分析的指標。
如人蔘皂苷能催進RNA蛋白質的生物合成,調節機體代謝,增強免疫功能;柴胡皂苷有明顯的中樞抑制、抗炎、降低血漿中膽固醇和甘油三酯等作用;七葉皂苷有明顯的抗滲出、抗炎、抗淤血作用;甘草皂苷有促進腎上腺皮質激素樣作用,並能防治肝硬化、抗動脈粥樣硬化、抗潰瘍;人蔘皂苷Rh2有抗腫瘤活性等。
根據異戊二烯定則,三萜來成分系由6個異戊二烯單位聚合而成,一般根據三萜類成分碳環的有無和多少進行分類。目前已發行的三萜類成分,多數為四環三萜和五環三萜。三萜皂苷由三萜皂苷元與糖、糖醛酸(部分化合物還含有有機酸)所組成。糖大多數與皂苷元的C3-OH相連,少數情況C3-OH遊離,二糖和其他位置的羥基相連。皂苷元分子中羥基大部分與糖結合,形成苷,少數可與有機酸結合,形成酯。
1.物理性質
三萜皂苷分子大,不易結晶,大多數為白色或乳白色無定形粉末,僅少數為結晶體,皂苷元大多有完好的結晶。皂苷多數為具有苦味和辛辣味,且多具有吸濕性。三萜皂苷有降低水溶液表面張力的作用,其水溶液經常強烈振搖能產生持久性泡沫,不因加熱而消失。三萜皂苷的熔點都很高,常在熔融前分解,分解點多在200℃-300℃之間。
2.溶解度
三萜皂苷一般可溶於水,易溶於熱水、含水稀醇、熱甲醇和熱乙醇中,幾乎不溶或難溶於丙酮、乙醚、苯等有機溶劑。皂苷在正丁醇或戊醇提取皂苷,可使之與親水性雜質分離。三萜皂苷元能溶於石油醚、苯、乙醚、三氯甲烷等有機溶劑,而不溶於水。
3.金屬鹽類反應
三萜皂苷的水溶液可與一些金屬鹽類,如鉛鹽、鋇鹽、銅鹽等產生沉澱。酸性皂苷水溶液,加入中性鹽類即生成沉澱;中性皂苷水溶液則需加入鹼式醋酸鉛或氫氧化鋇等鹼性鹽類才能產生沉澱。
4.顯色反應
三萜皂苷在無水條件下,與強酸(硫酸、磷酸、高氯酸)、中強酸(三氯乙酸)或Lewis酸(氯化鋅、三氯化銻)作用,會出現一系列顯色變化或熒光。
5.光譜特徵
除少數化合物如甘草酸、遠志皂苷等外,大多數三萜化合物無明顯的紫外吸收或僅在200 nm附近有末端吸收。
1 傳統的三萜類成分提取分離方法
一般根據其溶解性採用不同的有機溶劑進行提取分離,如:將藥材用乙醇浸提3次,提取液濃縮得到的浸膏溶於適量水中,然後用氯仿萃取3次,合併氯仿層,減壓濃縮到原體積的1/3,用飽和NaHCO溶液鹼化,取氯仿層部分濃縮,得到棕色浸膏將所得浸膏用硅膠柱層析分離等。該方法需要消耗大量的有機溶劑易造成醫藥污染,且提取的選擇不高,使製得藥物劑型單一,多為湯劑或者丸、散等劑型,服用量大且攜帶不便,不利於中藥的現代化。
2 超臨界流體萃取法(SFE)
由於SFE在萃取過程中幾乎不用有機溶劑,萃取物中無有機溶劑殘留,對環境無污染,且提取效率高,節約能耗等特點,在中藥化學成分的萃取分離領域得到了蓬勃發展。崔星明等採用SFE得到的蘆筍提取物,用甲醇溶解,採用液相色譜-質譜聯用儀檢測得到了56個組分。發現有保留時間和熊果酸基本一致的峰,其質譜分子離子峰和特徵碎片峰都與熊果酸的一致。雒廷亮等採用SFE對山茱萸中熊果酸提取方法的研究,結果表明,在熊果酸提取率基本相同的前提下,SFE不僅可以實現清潔生產,而且易於實現工業 化。
3 半仿生提取
該法模擬口服給葯,為經消化道給葯的中藥製劑設計了一種新的提取工藝,即將藥材先用一定pH值的酸水提取,繼以一定pH 值的鹼水提取,提取液分別濾過、濃縮、製成製劑,據報道此種方法 經濟 實用,可保證療效。龔慕辛等通過比較水、不同濃度的乙醇、半仿生法及鹼水提取對齊墩果酸提出量的影響,結果顯示,半仿生提取齊墩果酸,提出量遠高於一般水提。以pH=12的鹼液提取女貞子可以使齊墩果酸提出量大於75%乙醇的提出量,並且齊墩果酸不是以遊離的形式存在,吸收利用率將提高,提取成本也大大降低。
4 超聲循環技術
黃書銘等研究靈芝三萜類化合物的提取工藝時,在常規提取方法的基礎上,增加超聲循環的處理步驟,通過實驗對比,超聲循環提取所需各種溶劑用量減少,提取時間縮短,目的產物提取率提高了40%。
5 化學衍生法
化學衍生法chemical derivatizationmethod是色譜分析中用未處理樣品的一種方法。衍生化的目的是使那些本不能直接進樣分析的物質經過衍生化反應後轉變為可以很方便地進行色譜分析的物質。仲兆金等用重氮烷和鹵代烴的化學衍生法使結構相近、難以分離的三萜酸酯化,不改變三萜骨架結構,利用其酯化物容易分離的特點,分離后再部分水解,分得茯苓三萜,確定其結構。