血清IGE檢測
血清IGE檢測
正常情況下血清IgE僅在ng/ml水平,用常規測定IgG或IgM的凝膠擴散法檢測不出IgE,必須用高度敏感的放射免疫測定法及酶聯免疫測定法進行檢測。
1.放射免疫吸附劑試驗(radioimmunosorbenttest,IRST)是將抗IgE吸附到固相載體上用以檢測血清IgE的方法,故又稱固相放射免疫測定(SPRIA);臨床常用雙抗體夾心法,多以濾紙為載體。將抗IgE抗體偶聯到經溴化氟活化的濾紙上,使其與待檢血清及IgE參考標準進行反應;洗滌后加入125I標記的抗人IgE,再經洗滌后測定濾紙片的放射活性,其測定值與標本中的IgE含量呈正相關。
2.酶聯免疫測定法測定血清IgE時也常用雙抗體夾心ELISA法,操作方便,敏感性也很高,在臨床上經常應用。
3.間接血凝試驗用抗IgE至敏紅細胞,將標本血清做系列稀釋后與致敏紅細胞反應。此法更加簡便易行,便於普及,但敏感性比上兩法稍低。
血清總IgE水平一般用國際單位(IU)或ng表示,1IU=2.4ng,相當於WHO標準凍干血清製劑0.00928mg內所含的IgE量。正常人群IgE水平受環境、種族、遺傳、年齡、檢測方法及取樣標準等因素的影響,以致各家報道的正常值相差甚遠。嬰兒臍帶血IgE水平小於0.5IU/ml,出生后隨年齡增長而逐漸升高,12歲時達成人水平。成人血清IgE水平約在20~200IU/ml之間,一般認為大於333IU/ml(800ng/ml)時為異常升高。
IgE升高相關的常見疾病有:過敏性哮喘、季節性過敏性鼻炎、特應性皮炎、藥物性間質性肺炎、支氣管肺麴菌病、麻風、類天皰瘡及某些寄生蟲感染等。上述疾病時IgE升高的程度並不一致,在過敏性支氣管肺麴菌病時最為顯著,其值可達5000~20000ng/ml,除了此病和特應性皮炎以及在花粉季節之外,任何血清總IgE水平大於5000ng/ml的患者均應考慮寄生蟲感染的可能性。
特異性IgE是指能與某種過敏原特異性結合的IgE,因此需要用純化的變應原代替抗IgE進行檢測;常用的方法仍然是放射免疫技術和酶標免疫技術。
1.放射變應原吸附劑試驗(radioallergosorbenttest,RAST)將純化的變應原與固相載體結合,加入待檢血清及參考對照,再與同位素標記的抗IgE抗體反應,然後測定固相的放射活性,通過標準曲線求出待檢血清中特異性IgE的含量,或在標本放射活性高於正常人均數加3S時判為陽性。
2.酶聯免疫測定法試驗原理及步驟基本同RAST,僅是最後加入酶標記的抗IgE,利用酶底物進行顯色。測定結果的表示也與RAST相同。
RAST是目前公認的檢測型變態反應的有效方法之一,具有特異性強、敏感性高、影響因素少、對患者絕對安全等優點;不但有助於過敏性哮喘的診斷,對尋找變應原也有重要價值。RAST與皮膚試驗和支氣管激發試驗的符合率在80%左右,但不能完全代替后兩種試驗,因為活體試驗還能反映嗜鹼性粒細胞和靶細胞的反應性。
但是RAST也有許多缺點:費用昂貴、花費時間長、放射性同位素易過期而且污染環境、不同來源試劑盒的參比血清不同而不易相互比較、待檢血清含有相同特異性IgG時可干擾正常結果。因此一般只在下列情況下才做RAST:①皮試結果難以肯定、但需提供進一步的診斷證據者;②不適宜做皮試或激發試驗者,例如老年、幼兒、妊娠婦女、患有皮膚病、對變應原有嚴重過敏史或正服用抗過敏藥物以及重病者;③觀察脫敏治療效果或研究變態反應機制。
ELISA法與RAST有相似的優點,而且還有獨特的長處,如沒有同位素污染、酶標抗體可長期保存,因此在國內應用較多。用ELISA測試屋塵和一些花粉的結果與RAST符合率較高,且與臨床也較符合,但與皮膚試驗的符合率可能不夠理想。