Dicer酶

Dicer酶

該酶是一種核糖核酸內切酶,屬於RNase III家族中特異識別雙鏈RNA的一員,它能以一種ATP依賴的方式逐步切割由外源導入或者由轉基因,病毒感染等各種方式引入的雙鏈RNA,切割將RNA降解為21-23bp的雙鏈RNAs(dsRNAs),每個片段的3’端都有2個鹼基突出。

內容簡介


在研究RNA干擾機制的過程中,Bernstein等從已經發生RNA干擾的果蠅S2細胞中純化了一種核酸酶Dicer,從中分離出21~23個鹼基對的dsRNA片段。說明該核酸酶具有序列特異性,它能降解與dsRNA具有同源序列的mRNA。研究表明Dicer是來自果蠅RNA干擾必須的RNaseIII型蛋白,含有一個解旋酶、結構域、富含谷氨酸區、一個PAZ結構域、PiWi區、RNaseIII和dsRNA結合區。Dicer在催化過程中以二聚體的形式出現,其催化結構域在dsRNA上反平行排列,形成4個活性位點,但只有兩側的2個位點有內切核酸酶活性。

作用機制


Dicer的作用機制Bernstein認為分二步:
第一步:Dicer結合到dsRNA,dsRNA被加工成許多短片段,每個片段約22nt。
第二步:22nt的siRNA通過PAZ與含有PAZ的Argonaute蛋白結合,而RNase與後者形成多個亞單元的複合物,這樣使得22ntsiRNA特異性的決定靶基因的降解反應。這個22ntsiRNA被稱為引導RNA,它可以將多單元複合物引到靶基因mRNA處。因為有引導siRNA在起作用,所以只要有少量的dsRNA就可以引發大量的切割mRNA反應。