衛生部糖複合物重點實驗室

衛生部糖複合物重點實驗室

◆ 性質：部級

◆ 服務領域：糖複合物

◆ 主要成員：實驗室主任查錫良(教授)

學術委員會主任陳惠黎(教授)

◆ 依託單位：復旦大學

◆ 主管單位：教育部

該實驗室建於 1994 年，現有工作人員：名，其中管理人員：名，檢測/校準人員：名。主要儀器設備 台（套），佔地面積 平方米，其中試驗場地 平方米。

實驗室研究方向: 1．糖複合物結構與功能;2．糖基轉移酶基因表達調控及新功能;3．糖蛋白及相關分子在腫瘤信號轉導中的作用。實驗室近三年主要工作及成就：衛生部複合物重點實驗室三代科學家從事糖生物學研究二十餘年，在糖基轉移酶以及糖鏈結構與功能的研究中取得了突出的成績，申請的項目、獲得的獎項以及發表的論文在國內都居領先地位。在N－糖鏈單個糖基改變與功能關係方面，發現N-乙醯氨基葡萄糖轉移酶-Ⅴ(GNT-V)可改變整連蛋白亞基α5,α6和β1的表達以及細胞的轉移潛力，提示糖鏈結構改變可能會引起某些基因表達的改變。最近利用基因晶元技術，更驚奇地發現轉染反義GnT-V后，有兩類蛋白質，即有伴侶蛋白功能的蛋白質和促進蛋白質分解的蛋白質的表達明顯上調；而內質網上促進蛋白質合成的微粒體蛋白則明顯下調。這一現象與新近提出的“unfolded protein response”或所謂內質網應激(ER Stress)十分相似，提示一個反義糖基轉移酶的轉染有可能引起內質網內一些正在合成的糖蛋白的肽鏈摺疊障礙，使不能正常摺疊的糖蛋白滯留在內質網內，繼而引起降解和伴侶蛋白基因表達的代償性增加。這說明由糖基轉移酶表達改變造成的糖鏈結構的改變可能會導致某些基因表達的變化。研究還發現GnT-V能改變PKB的信號轉導。GnT-V還能通過影響EGF-R受體N-糖鏈的變化而改變受信號轉導的效率，這是單個糖基轉移酶引起糖鏈結構改變而影響糖鏈功能的極好例子。在β1，4半乳糖基轉移酶（β1,4GT）的研究方面：1、復旦大學在國內率先建立了β1,4GT活性的測定方法，並研究了其酶促反應動力學。以此為基礎研究了細胞周期及細胞增殖分化過程中β1,4GT的調節。在β1,4GT 1 轉錄調控的分子機制方面也做了部分工作。現已得到了β1,4GT 1的5’調控序列，發現β1,4GT 1的5’調控區存在激活及抑制兩種調控序列並發現了一批可能的反式作用因子。2、研究還發現？1,4GT 1在小鼠腦和睾丸發育的過程以及腦膠質瘤等一些腫瘤發生和神經再生的過程中均有？1,4GT 1轉錄及活性的改變，3、已有的研究還發現環己亞胺（CHX）誘導7721細胞凋亡過程中有1,4GT 1表達升高，而且轉染？1,4GT 1的7721細胞更易於在CHX誘導下發生凋亡。1,4GT 1還與一些與p58PITSLRE等凋亡相關的蛋白發生作用從而參與細胞凋亡的調控。4、在腦膠質瘤SHG44細胞株模型中，發現β1,4GT5能影響細胞表面粘附分子的表達及其下游的信號轉導途徑，從而影響腫瘤的惡性程度。5、為了進一步闡明β1，4半乳糖基轉移酶的作用機制，復旦大學通過篩選與,4GT 1相互作用的蛋白並對這些蛋白的下游分子進行了進一步探索，由此提出了β1，4半乳糖基轉移酶網路調控的新概念。以上研究結果已經在J Biol Chem等期刊上發表。在糖鏈與細胞表面粘附分子的研究中發現：在肝癌細胞粘附和遷移的過程中，整連蛋白所介導的細胞粘著斑激酶（FAK）磷酸化與肝癌的惡性程度有關。研究表明表明，AK調節β1,4GT1的表達和活性可能與FAK對細胞周期的影響有關，並且FAK可能是通過PI3K及Src途徑參與調節β1,4GT1的表達。還分析了整連蛋白糖鏈在其與配體分子結合時的作用，整連蛋白糖鏈的變化可以影響其整合至細胞膜及與配體的結合力。癌細胞（肝癌，HL60）在誘導分化過程中有表面N－糖鏈的特徵性變化，與細胞的生物學行為有密切關係。糖鏈結構的變化的酶學機制是相應的糖基轉移酶表達的變化。