雞病毒性關節炎
雞的重要傳染病
雞病毒性關節炎(Viral Arthritis)是一種由呼腸孤病毒引起的雞的重要傳染病。病毒主要侵害關節滑膜、腱鞘和心肌,引起足部關節腫脹,腱鞘發炎,繼而使腓腸腱斷裂。病雞關節腫脹、發炎,行動不便,跛行或不願走動,採食困難,生長停滯。
雞病毒性關節炎
病毒性關節炎的病原為禽呼腸孤病毒(Avainreovirus)。該病毒與其他動物的呼腸孤病毒在形態方面基本相同,病毒粒子無囊膜,呈20面體對稱排列,直徑約為75nm,在氯化銫中的浮密度為1.36~1.37g/ml。其基因組由10個節段的雙鏈RNA構成。
呼腸孤病毒可通過卵黃囊和絨毛尿囊膜(CAM)接種而在雞胚中生長繁殖。通過卵黃囊接種,一般在接種后3~5天雞胚死亡;通過CAM接種,通常在接種后7~8天雞胚死亡。除雞胚之外,Reov還可在原代雞胚成纖維細胞、肝、睾丸細胞,以及vero、BHK-21等傳代細胞中生長。
由於缺乏對多種動物紅細胞的凝集特性而使禽Reov區別於其他動物的呼腸孤病毒。Reov各毒株之間具有共同的沉澱抗原,但中和抗原具有明顯的異源性。由於採用的試驗方法不同,對毒株的分型結果也不盡相同。Rosenberger等認為呼腸孤病毒經常以抗原亞型,而不是以獨特的血清型存在。我國從1985年首次報道雞病毒性關節炎以來,已經在全國各地分離了多個Reov毒株,但不同毒株之間的相互關係還沒有進行過系統研究。
雞病毒性關節炎
雞病毒性關節炎的感染率和發病率因雞的年齡不同而有差異。雞年齡越大,敏感性越低,10周齡之後明顯降低。一般認為,雛雞的易感性可能與雛雞的免疫系統尚未發育完全有關。
自然感染髮病多見於4~7周齡雞,也有更大雞齡發生關節炎的報道。發病率可高達100%,而死亡率通常低於6%。在山東部分地區進行的一次血清學調查結果顯示,在11萬羽肉仔雞中,呼腸孤病毒感染的陽性率達75.2%,5萬羽蛋雞中陽性率為23.5%。
本病大多數野外病例均呈隱性感染或慢性感染,要通過血清學檢測和病毒分離才能確定。在急性感染的情況下,雞表現跛行,部分雞生長受阻;慢性感染期的跛行更加明顯,少數病雞跗關節不能運動。病雞食慾和活力減退,不願走動,喜坐在關節上,驅趕時或勉強移動,但步態不穩,繼而出現跛行或單腳跳躍。
病雞因得不到足夠的水分和飼料而日漸消瘦,貧血,發育遲滯,少數逐漸衰竭而死。檢查病雞可見單側或雙側躡部、跗關節腫脹。在日齡較大的肉雞中可見腓腸腱斷裂導致頑固性跛行。
種雞群或蛋雞群受感染后,產蛋量可下降10%~15%。也有報道種雞群感染后種蛋受精率下降,這可能是病雞因運動功能障礙而影響正常的交配所致。
1.剖檢變化患雞跗關節上下周圍腫脹,切開皮膚可見到關節上部腓腸腱水腫,滑膜內經常有充血或點狀出血,關節腔內含有淡黃色或血樣滲出物,少數病例的滲出物為膿性,與傳染性滑膜炎病變相似,這可能與某些細菌的繼發感染有關。其他關節腔呈淡紅色,關節液增加。根據病程的長短,有時可見周圍組織與骨膜脫離。大雛或成雞易發生腓腸腱斷裂。換羽時發生關節炎,可在患雞皮膚外見到皮下組織呈紫紅色。慢性病例的關節腔內滲出物較少,腱鞘硬化和粘連,在跗關節遠端關節軟骨上出現凹陷的點狀潰爛,然後變大、融合,延伸到下方的骨質,關節表面纖維軟骨膜過度增生。有的在切面可見到肌和腱交接部發生的不全斷裂和周圍組織粘連,關節腔有膿樣、乾酪樣滲出物。有時還可見到心外膜炎,肝、脾和心肌上有細小的壞死灶。
雞病毒性關節炎
1.根據癥狀和病變進行初步診斷雖然此病的類症鑒別頗為困難,但根據癥狀和病變的特點,在臨診中可對該病做出初步診斷。以下幾點具有診斷價值:
(1)病雞跛行,跗關節腫脹。
(2)心肌纖維之間有異噬細胞浸潤。
(3)患病毒性關節炎的雞群中,常見有部分雞呈現發育不良綜合征現象,病雞蒼白,骨鎢化不全,羽毛生長異常,生長遲緩或生長停止。
2.病原學診斷
(1)病毒的分離與鑒定:病原的分離鑒定是最確切的診斷方法。可從腫脹的腱鞘、跗關節的關節液、氣管和支氣管、腸內容物及脾臟等取病料進行病毒分離。從病變部分分離病毒時,要注意取病料的時間,感染后2周之內較易分離到病毒。病料在接種前的處理可參考其他病毒分離時的操作程序。從野外病料分離病毒,最好採用5~7日齡的雞胚卵黃囊內接種,雞胚應來自SPF或沒有Reo感染的種雞群。接種后3~5天,雞胚死亡,胚體出血,內臟器官充血、出血、胚體呈淡紫色。如種蛋帶有Reo母源抗體,或者病料含毒量低,則雞胚死亡的時間會推遲,也可能有部分雞胚會孵出。在接種后較長時間才死亡的雞胚,其胚體發育不良,肝、脾、心腫大並有細小壞死灶,胚體呈暗紫色。如將含病毒材料接種於CAM上,接種后的胚胎死亡規律和胚體變化與卵黃囊接種的結果基本相同,特徵變化是絨毛尿囊膜增厚,有白色或淡黃色的痘斑樣病變,CAM細胞內可見到胞漿內包含體。
(1)分離到病毒之後,可通過病毒理化特性測定、電鏡觀察、病毒核酸電泳、血清學檢驗皮動物敏感性試驗等進行鑒定。
(2)酶聯免疫吸附試驗(ELISA):應用ELISA雙抗體夾心法可以檢測雞Reo病毒。該法具有較高的特異性和敏感性,在人工感染后2~27天,關節滑膜、腱鞘和脾臟中病毒檢出翠為100%。
(3)熒光抗體法(FA)FA是檢測雞Reo病毒的一個比較有效、快速、特異的方法。將病雞的腱鞘、肝、脾等進行冰凍切片、丙酮固定后,用抗Reo病毒的熒光抗體染色,熒光顯微鏡下可見到亮綠色的團塊狀抗原,據此可對本病進行診斷。肖成蕊等採用FA檢測8例人工感染雞及18例自然感染雞,脾臟和肝臟檢出率為100%,認為脾和肝是FA檢測Reo病毒的首選器官。
3.血清學診斷血清學檢驗的方法很多,除了常用的瓊脂擴散試驗(AGP)、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)外,還有間接熒光抗體方法(IFA)及中和試驗(VN)等。
(1)瓊脂擴散試驗(AGP):AGP是最常用的雞病毒性關節炎的診斷方法。病毒感染2~3周后,該方法能檢查出呼腸孤病毒的群特異性抗體。王錫望等採用S1133株接種雞胚尿囊膜,製備雞呼腸孤病毒AGP抗原。用該抗原對腳掌部接種的雞血清進行AGP檢測,接種后7天的陽性率為93%,14~90天為100%,105天為94%,120天為64%,150天為25%。該法雖然敏感性稍低,不適宜檢測低滴度抗體,但操作簡便,易於推廣,實用性強,既可用於雞群流行病學調查,又可用於雞病毒性關節炎的診斷。
(2)酶聯免疫吸附試驗(ELISA):Slaght等首次建立了ELISA方法檢測禽Reo病毒抗體,使用S1133毒株作抗原,發現它與Reo25和WVV2939株的抗體發生反應,同源抗體滴度最高。國內陳士友等、單松華等先後建立了檢測禽Reo抗體的ELISA方法。該法與AGP相比,具有敏感性高、快速、適合自動化等優點。目前,ELISA系統已商品化。該系統適合於群體Reo抗體水平的分析。
對該病目前尚無有效的治療方法,所以預防是控制本病的唯一方法。由於Reo病毒本身的特點,加上現代養雞的高密度,要防止雞群接觸病毒是困難的,因此,預防接種是目前條件下防止雞病毒性關節炎的最有效方法。為了防止本病流行,在國外研製出了許多種弱毒苗和滅能的禽呼腸孤病毒疫苗,並制定了相應的免疫程序。目前國外應用的弱毒疫苗有通過雞胚72代致弱的S-1133弱毒株,可飲水免疫30周齡或10~17周齡種雞,其後代能抵抗經口攻毒;完全減毒疫苗P100苗,此苗是用S-1133毒株通過雞胚傳235代后,再通過雞胚成纖維細胞培養100代致弱而成。P-100苗可用於1日齡雛雞,皮下接種,經14日後免疫雛雞能抵抗同源病毒的攻擊。還有UMI-203弱毒苗,蓋淼對8~18周齡的種雞無致病力,但對雛雞的毒力很強。該苗的優點是交叉免疫比S-1133株強,因其抗原性較寬。
由於雛雞對致病性Reo病毒最易感,而至少要到2周齡開始才具有對Reo病毒的抵抗力,因此,對雛雞提供免疫保護應是防疫的重點。接種弱的活疫苗可以有效地產生主動免疫,一般採用皮下接種途徑。但用S-1133弱毒苗與馬立克氏病疫苗同時免疫時,S1133會幹擾馬立克氏病疫苗的免疫效果,故兩種疫苗接種時間應相隔5天以上。無母源抗體的後備雞,可在6-8日齡用活苗首免,8周齡時再用活苗加強免疫,在開產前2~3周注射滅活苗,一般可使雛雞在3周內不受感染。這已被證明是一種有效的控制雞病毒性關節炎的方法。將活疫苗與滅活疫苗結合免疫種雞群,可以達到很好的免疫效果。但在使用活疫苗時要注意疫苗毒株對不同年齡的雛雞的毒性是不同的。
一般的預防方法是加強衛生管理及雞舍的定期消毒。採用“全進全出”的飼養方式,對雞舍徹底清洗和消毒,可以防止由上批感染雞留下的病毒的感染。由於患病雞長時間不斷向外排毒,是重要的感染源,因此,對患病雞要堅決淘汰。