鐵皮石斛多糖
鐵皮石斛多糖
鐵皮石斛多糖的提取方法鐵皮石斛全草粉末經95%乙醇和丙酮提取后,加20倍水,於90℃溫度下水浴1h,殘渣反覆提取3次。
藥材鐵皮石斛是石斛的一種,為蘭科植物鐵皮石斛(Dendrobium.candidumWall.ex Lindl.)的新鮮或乾燥莖,屬被子植物門單子葉綱微子目蘭科石斛屬,又稱鐵吊蘭、鐵皮蘭和里書草。野生的鐵皮石斛大多分佈在東亞、東南亞及澳大利亞等國家和地區,我國主要集中在雲南和貴州等省。鐵皮石斛性微寒,味甘、淡。具有滋陰清熱、養胃生津之功效。可用於治療具有陰虛證的急性及慢性咽喉炎、慢性支氣管炎、結核病、甲狀腺功能亢進、糖尿病、慢性肝炎、慢性萎縮性胃炎、免疫功能綜合征和癌症放化療調理等病症,並可增強中老抗病能力。
鐵皮石斛全草粉末經95%乙醇和丙酮提取后,加20倍水,於90℃溫度下水浴1h,殘渣反覆提取3次。過濾,合併濾液,減壓濃縮,4倍體積的95%乙醇沉澱數次,再溶解、濃縮、透析、凍干,得石斛粗多糖。稱取0.2g石斛粗多糖樣品溶於20ml雙蒸水中,置於40ml離心管中,按樣品溶液和脫蛋白試劑體積比為4:1加Sevag試劑(異戊醇:氯仿為1:4)5ml,振蕩2min,常溫下3000r/min離心20min,取上清重複上述操作,直至脫蛋白完全。上清加4倍95%乙醇,收集沉澱物依次用無水乙醇、丙酮和乙醚洗滌,揮去溶劑,真空乾燥得粗製品,溶於熱水,濾去不溶物。濃縮,乾燥得石斛粗多糖。
稱取1.0g石斛粗多糖溶於50ml水中,DEAE-纖維素柱(3.6cm×70cm)分批上樣,然後依次用水、0.05mol/L、0.1mol/L、0.2mol/L、0.3mol/L和0.5mol/L的NaCl溶液洗脫,部分收集儀收集,以1.5倍洗脫液,柱溫為12℃,流速為2ml/min。各洗脫峰分別收集合併,減壓濃縮后水洗部分用透析袋脫鹽,鹽洗部分用Sephadex G-10凝膠柱色譜脫鹽,再次濃縮,凍干,結果獲得不同組分的純化石斛多糖。
取純種小鼠NIH36隻,每隻體重18~209,隨機分為3組,每組12隻,雌雄各半,分別為空白對照組、模型對照組和石斛多糖組。第1天,空白對照組每隻小鼠腹腔注射0.5ml生理鹽水,模型對照組和石斛多糖組每隻小鼠腹腔注射環磷醯胺1.5mg。從第2天開始,直至第10天,石斛多糖組每天每隻小鼠口服鐵皮石斛多糖0.5mg,空白對照組和實驗對照組口服等量的生理鹽水。第11天,在小鼠的腋窩取血。結果顯示,鐵皮石斛多糖能夠強有力地抵消實驗條件下免疫抑製劑環磷醯胺的加入所引起的外周白細胞數的劇烈下降,消除其破壞性的副作用。同空白對照組相比,鐵皮石斛多糖能夠明顯提升外周血白細胞數。鐵皮石斛多糖具有促進免疫系統淋巴細胞產生移動抑制因子的作用,能夠有效地抵消免疫抑製劑環磷醯胺加入所引起的提升移動抑制指數的副作用。表明鐵皮石斛能夠提高機體的免疫功能。