核蛋白體釋放因子

多肽鏈的生物合成過程

1．氨基酸的活化與搬運：氨基酸的活化以及活化氨基酸與tRNA的結合，均由氨基醯tRNA合成酶催化完成。反應完成後，特異的tRNA3’端CCA上的2’或3’位自由羥基與相應的活化氨基酸以酯鍵相連接，形成氨基醯tRNA。

2．活化氨基酸的縮合——核蛋白體循環：活化氨基酸在核蛋白體上反覆翻譯mRNA上的密碼並縮合生成多肽鏈的循環反應過程，稱為核蛋白體循環。核蛋白體循環過程可分為三個階段：

⑴起動階段：①30S起動複合物的形成。在IF促進下，30S小亞基與mRNA的起動部位，起動tRNA（tRNAfmet），和GTP結合，形成複合體。②70S起動前複合體的形成。IF3從30S起動複合體上脫落，50S大亞基與複合體結合，形成70S起動前複合體。③70S起動複合體的形成。GTP被水解，IF1和IF2從複合物上脫落。

⑵肽鏈延長階段：①進位：與mRNA下一個密碼相對應的氨基醯tRNA進入核蛋白體的受位。此步驟需GTP，Mg2+，和EF參與。②成肽：在轉肽酶的催化下，將給位上的tRNA所攜帶的甲醯蛋氨醯基或肽醯基轉移到受位上的氨基醯tRNA上，與其α-氨基縮合形成肽鍵。給位上已失去蛋氨醯基或肽醯基的tRNA從核蛋白上脫落。③移位：核蛋白體向mRNA的3’-端滑動相當於一個密碼的距離，同時使肽醯基tRNA從受體移到給位。此步驟需EF（EFG）、GTP和Mg2+參與。此時，核蛋白體的受位留空，與下一個密碼相對應的氨基醯tRNA即可再進入，重複以上循環過程，使多肽鏈不斷延長。

⑶肽鏈終止階段：核蛋白體沿mRNA鏈滑動，不斷使多肽鏈延長，直到終止信號進入受位。①識別：RF識別終止密碼，進入核蛋白體的受位。②水解：RF使轉肽酶變為水解酶，多肽鏈與tRNA之間的酯鍵被水解，多肽鏈釋放。③解離：通過水解GTP，使核蛋白體與mRNA分離，tRNA、RF脫落，核蛋白體解離為大、小亞基。

多肽鏈合成后的加工與修飾

1．一級結構的加工修飾：

⑴N端甲醯蛋氨酸或蛋氨酸的切除：N端甲醯蛋氨酸是多肽鏈合成的起始氨基酸，必須在多肽鏈折迭成一定的空間結構之前被切除。其過程是：①去甲醯化；②去蛋氨醯基。

⑵氨基酸的修飾：由專一性的酶催化進行修飾，包括糖基化、羥基化、磷酸化、甲醯化等。

⑶二硫鍵的形成：由專一性的氧化酶催化，將-SH氧化為-S-S-。

⑷肽段的切除：由專一性的蛋白酶催化，將部分肽段切除。

2．高級結構的形成：

⑴構象的形成：在分子內伴侶、輔助酶及分子伴侶的協助下，形成特定的空間構象。

⑵亞基的聚合。

⑶輔基的連接。

3．靶向輸送：蛋白質合成后，定向地被輸送到其執行功能的場所稱為靶向輸送。大多數情況下，被輸送的蛋白質分子需穿過膜性結構，才能到達特定的地點。因此，在這些蛋白質分子的氨基端，一般都帶有一段疏水的肽段，稱為信號肽。分泌型蛋白質的定向輸送，就是靠信號肽與胞漿中的信號肽識別粒子（SRP）識別並特異結合，然後再通過SRP與膜上的對接蛋白（DP）識別並結合后，將所攜帶的蛋白質送出細胞。

核蛋白體釋放因子在原核生物中有4種，在真核生物中只有1種。

在原核生物中發現三個釋放因子RF-1，RF-2，RF-3，哺乳動物只有一個釋放因子RRF。

RF與核糖體a位結合后，活性肽基轉移酶水解P位上的tRNA與肽鏈之間的鏈，把P位上的肽基轉移至水分子。隨後；新生肽鏈與最後一個去醯化的tRNA釋放出核糖體。