蠟樣芽孢桿菌
芽孢桿菌屬中的一種
蠟樣芽孢桿菌(學名:Bacillus cereus),又稱仙人掌桿菌,是芽孢桿菌屬中的一種。它是一種地方性、土壤生活的,革蘭氏陽性、β溶血性的桿狀細菌,會引起食物中毒,例如“炒飯綜合征(Fried Rice Syndrome)”。蠟樣芽孢桿菌是需氧型,與其他芽孢桿菌相同,它會產生防禦性的內芽孢。
![臘樣芽孢桿菌](https://i1.twwiki.net/cover/w200/mc/d/mcd3dff15eb7e2f59ec242dc8238c777f.jpg)
臘樣芽孢桿菌
蠟樣芽孢桿菌生長溫度為25-37℃,最佳溫度30-32℃。在肉湯中生長混濁有菌膜或壁環,振搖易乳化。在普通瓊脂上生成的菌落較大,直徑3-10mm,灰白色、不透明,表面粗糙似毛玻璃狀或融蠟狀,邊緣常呈擴展狀。偶有產生黃綠色色素,在血瓊脂平板上呈草綠色溶血。在甘露醇卵黃多粘菌素(MYP)平板上,呈伊紅粉色菌落。
蠟樣芽孢桿菌有兩種抗原,一種是耐熱的,一種是不耐熱的。
蠟樣芽孢桿菌生長型不耐熱,100度20分鐘即可被殺死,對酸鹼不敏感。pH6—11對本菌基本上不受影響,pH5以下,生長可受到抑制。
蠟樣芽孢桿菌在生長過程中產生多種活性物質對致病菌或條件致病菌有明顯的抑制作用;同時蠟樣芽孢桿菌能迅速消耗消化道內環境中的遊離氧,形成腸道低氧環境,不利於腸道需氧生物的生長繁殖(球蟲),促進有益厭氧菌生長,併產生乳酸等有機酸類,降低腸道PH值,間接抑制其他致病菌的生長。
蠟樣芽孢桿菌作為一種食源性疾病的報導較多,在各種食品中的檢出率也較高,如1982年犬飼等對日本名古屋所采1641份食品樣品中,有193份檢出了該菌、陽性率為11.8%;1984年我國有關單位對南京市所采211份食品樣品中,有81份檢出了該菌,陽性率為38.4%。
蠟樣芽孢桿菌食物中毒通常以夏秋季(6-10月)最高。引起中毒的食品常於食前由於保存溫度不當,放置時間較長或食品經加熱而殘存的芽胞以生長繁殖的條件,因而導致中毒。中毒的發病率較高,一般為60-100%。但也有在可疑食品中找不到蠟樣芽孢桿菌而引起食物中毒的情況,一般認為是由於蠟桿芽胞桿菌產生的熱穩定毒素所致。1985年9月,美國緬因州的健康局報導了在一家日本餐館發生了食物中毒而導致的胃腸炎事件,經調查所有的食品其加工和儲藏都是規範的,僅用剩飯製作的炒飯其是冷藏儲放還是在室溫放置說不清楚,在炒飯中雖然找不到活的蠟樣芽孢桿菌,但是完全可能存在重新加熱過程中消除了活菌而沒有破壞熱穩定毒素的可能性。
以無菌操作將檢樣25g(m1),用滅菌生理鹽水或磷酸鹽緩衝液做成10-1-10-5的稀釋液按GB/T4789.2測定。取各稀釋液0.1mL,接種在兩個選擇性培養基-甘露醇卵黃多粘菌素(MYP)瓊脂培養基上,用L形棒塗佈於整個表面,置36℃士1℃培養12h-20h,選取適當菌落數的平板進行計數,蠟樣芽孢桿菌在此培養幕上的菌落為粉紅色(表示不發酵甘露醇)周圍有粉紅色的暈(表示產生卵磷脂酶)。計數后,從中挑取五個此種菌落做證實試驗,根據證實的蠟樣芽孢桿菌的菌落數計算出該平板上的菌落數,然後乘其稀釋倍數,即得每克(毫升)樣品中所含蠟樣芽孢桿菌數。例如:將0.1m1的104樣品稀釋液塗佈於MYP平板土,其可疑菌落為25個,取五個鑒定,證實四個菌落為蠟樣芽孢桿菌,則1g(ML)檢樣中所含蠟樣芽孢桿菌數為:
25X4/5X104X10=2X106
取檢樣或稀釋液劃線分離於選擇性培養基(MYP)上置37℃培養12h-20h,挑取可疑的蠟樣芽孢桿菌菌落接種於肉湯和營養瓊脂做成純培養,然後做證實試驗。
本菌為革蘭氏陽性大桿菌,寬度在1um或1um以上,芽胞呈卵圓形,不突出菌體,多位於菌體中央或稍偏於一端。
本菌在生化性狀上與蘇雲菌芽胞桿菌極為相似,但後者可籍細胞內產生蛋白質毒素結晶加以鑒別。其檢查方法如下:取營養瓊脂上純培養物少許,加少量蒸餾水塗於玻片上,待自然乾燥後用弱火焰固定,加甲醇於玻片上,半分鐘后傾去甲醉,置火焰上乾燥,然後滴加0.5鹼性復紅液,並用酒精燈加熱至微見蒸氣維持l.5min,移去酒精燈,將玻片放置半分鐘,傾去染液,置潔凈自來水充分漂洗、晾乾、鏡檢。在油浸鏡下檢查有無遊離芽胞和深染的似菱形的紅色結晶小體(如未形成遊離芽胞,培養物應放室溫再保存1d-2d后檢查)如有即為蘇雲金芽胞桿菌,蠟樣芽孢桿菌檢查為陰性。
蠟樣芽孢桿菌分佈比較廣泛,土壤、水、空氣、動物腸道及許多食物上都能分離到。
蠟樣芽孢桿菌引起食物中毒是由於該菌產生腸毒素。它產生兩種性質不同的代謝物,引起腹瀉型綜合症的是一種大分子量蛋白;而引起嘔吐型綜合症的被認為是一種小分子量、熱穩定的多肽。
致嘔吐型綜合症的腸毒素至今尚未提純,致腹瀉型綜合症的腸毒素已提純,其純化的腸毒素分子量為55-6.0×103。致腹瀉的腸毒素能使小白鼠致死。
![蠟樣芽孢桿菌在羊血培養基上](https://i1.twwiki.net/cover/w200/m6/3/m63442fc80ae4814bd9b4c5dfc794b5bf.jpg)
蠟樣芽孢桿菌在羊血培養基上
蠟樣芽孢桿菌產生的腸毒素有兩種:
1、耐熱性腸毒素:100度30分鐘不能被破壞,為引起嘔吐型中毒的致病因素,常在米飯中形成。
2、不耐熱腸毒素:是引起腹瀉型胃腸炎的病因,能在各種食物中形成。
1、蠟狀芽孢桿菌可產生抗菌物質,抑制有害微生物的繁殖,降解土壤中的營養成分,改善生態環境。
2、可產生細菌蛋白酶;可用於麻脫膠,是各種抗生素抗菌活性的測定菌。
3、可用於明膠液化,牛奶腖化,還原硝酸鹽,水解澱粉。