293細胞

人腎上皮細胞系

293細胞是人腎上皮細胞系,有多種衍生株,比如HEK293,293T/17等,來源都是人胚胎腎細胞,其極少表達細胞外配體所需的內生受體,且比較容易轉染,是一個很常用的表達研究外源基因細胞株。

293T細胞由293細胞通過基因技術派生出的細胞系,是經過腺病毒E1A基因的轉染,能表達SV40大T抗原,含有SV40複製起始點與啟動子區。許多真核表達載體如pcDNA3.1中含有SV40病毒的複製起始位點,可以在表達SV40病毒T抗原的細胞系中複製,從而提高外源基因的表達水平。因此293T細胞廣泛應用於病毒包裝。用磷酸鈣轉染效率可高達50%。蛋白表達水平高,轉染后2-3天用鹼性磷酸酶分析可較容易地檢測到表達的蛋白。瞬時轉染293T細胞是過表達蛋白並獲得細胞內及細胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。

細胞名稱


293細胞
293細胞
293細胞

形態特點


上皮細胞致瘤性+產物或抗原大T抗原。
細胞名稱293 和 293T
種屬
組織來源
形態特點上皮細胞
致瘤性+
產物或抗原大T抗原
染色體核型亞三倍體人細胞系。染色體眾數為64,30%的細胞有64 條染色體。4.2%的細胞染色體數目更多。多數細胞der⑴t(1;15) (q42;q13),der⒆t(3;19) (q12;q13),der⑿t(8;12) (q22;p13),還有四條標記染色體,有的細胞另有5條標記染色體。der⑴與M8 (or Xq+)常常成對出現。N17 與 N22各有四條。值得注意的是多數細胞有三條X染色體,兩條Xq+,一條Xp+。
生長特性粘附
文獻評價
293細胞系是原代人胚腎細胞轉染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化細胞。[RF32725]
表達轉染的腺病毒5的基因。[RF32725]
早期報道認為此細胞含有Ad 5基因組左端和右端[RF32764],現已清楚僅含有左端序列。[RF50113]
此細胞系人腺病毒滴度高。
室溫不貼壁,37℃幾日後重新貼壁。
表達由整合素beta-1 亞基與玻基結合素受體 alpha-v 亞基組成的玻基結合素細胞表面受體. [RF33793]
The Ad5 insert was cloned and sequenced,and it was determined that a colinear seqment from nts 1 to 4344 is integrated into chromosome 19 (19q13.2).
傳代
293:棄培養基,含0.25% 胰酶,0.03% EDTA 消化液洗滌,棄去,加1-2ml消化液室溫或37℃消化。
加入新鮮培養基,吸出,分到新培養皿中。一傳二至一傳四。
293T:生長快,通常倍增時間不到一天。每3~4 天1:10至1:20稀釋,5% CO2條件下培養。細胞貼壁疏鬆,可只用EDTA消化,不要用胰蛋白酶過度消化。
培養基更換每2-3天一次
凍存液95%培養基;5%,DMSO;culture medium 95%; DMSO,5%;50%培養液,10%DMSO, 40%血清
培養條件
ATCC培養基:90%的MEM Eagle,加入2mM L-谷氨醯胺,1.5g/L碳酸氫鈉,0.1 mM必需氨基酸,1.0 mM 丙酮酸鈉;10%加熱滅活的馬血清
37℃培養