黃色短桿菌

黃色短桿菌

短桿菌屬放線菌目中的一屬專性好氧、過氧化氫酶陽性、無芽孢的革蘭氏陽性短桿狀細菌。菌落自黃色至橙色均有。生長溫度20~25℃。氧化性代謝。在含4%NaCl的胰蛋白腖-黃豆腖瓊脂上生長良好。分佈在某些乾酪上。G+C%(摩爾)值為60~64。模式種為擴展短桿菌(B.linens)。本屬中的黃色短桿菌(B.flavum)能發酵葡萄糖生產L-谷氨酸,是重要的工業菌種。

分類


分 類:Bacteria; Actinobacteria; Actinobacteria (class); Actinobacteridae; Actinomycetales; Corynebacterineae; Corynebacteriaceae; Corynebacterium

形態


形態:細胞橢圓形,不形成孢子,不運動,在瓊脂培養基上形成1.2mm菌膜,菌落圓形,奶油色,邊緣光滑,在水中為均勻懸浮液。

特性


特性:革蘭氏染色陽性。短桿近球形,G+,不運動,無鞭毛,無芽孢,菌落產生非水溶性黃色素。兼性厭氧,化能異養型,葡萄糖、果糖、甘露糖、麥芽糖蔗糖產酸不產氣,水解明膠硝酸鹽還原、接觸酶陽性,抗酸染色陰性,M·R試驗陽性。最適生長溫度25-32℃。

培養基


培養基:蛋白腖1%,酵母膏1%,NaCl0.5%,pH7.0。30℃培養。
保存方法:礦物油法,定期移植法
保藏溫度:-70攝氏度

菌株來源


黃色短桿菌
黃色短桿菌
菌株來源:DSM 20300, 1412, 10150, 20137 , 20156, 20163, 20297, 20301, 20411, 20412, 20598, 44475, 46307
採集地:土壤。

培養


培養基:蛋白腖1% ,酵母膏1% ,NaCl 0.5% ,pH 7.0。30 ℃培養。
保藏溫度: -70 攝氏度

主要用途


黃色短桿菌
黃色短桿菌
黃色短桿菌能夠利用天冬氨酸合成賴氨酸蘇氨酸等。賴氨酸是一種人和高等動物的必需氨基酸,在食 品、醫藥和畜牧業上的需要量很大。在生產賴氨酸的過程中,當黃色短桿菌細胞內的賴氨酸和蘇氨酸都超過一定濃度時,就會抑制天冬氨酸激酶的活性,使賴氨酸的合成停止。科學家通過人工誘變,選育出了不能合成高絲氨酸脫氫酶的黃色短桿菌,從而解決了這一問題。因為高絲氨酸脫氫酶是合成蘇氨酸過程中不可缺少的一種酶,不能合成高絲氨酸脫氫酶的黃色短桿菌,就不能合成蘇氨酸。這就解除了蘇氨酸等對天冬氨酸激酶的抑制作用,使黃色短桿菌能不斷合成賴氨酸。在谷氨酸的生產過程中,可以採取一定的手段改變細胞膜的透性,是谷氨酸能迅速排放到細胞外面,從而解除谷氨酸對谷氨酸脫氫酶的抑制作用,提高谷氨酸的產量。而賴氨酸單獨過量就不會出現這種現象。
例如,天津科技大學代謝控制發酵研究室長期從事代謝控制發酵,特別是在氨基酸生產菌的選育及發酵條件的研究領域,積累了豐富的經驗,取得了驕人的成績。他們選育的谷氨酸、賴氨酸、鳥氨酸亮氨酸、L-異亮氨酸、色氨酸、L-纈氨酸等生產菌及肌苷鳥苷生產菌在國內均處領先地位。其中“TG866-174新菌種擴大試驗”課題榮獲天津市科技進步三等獎,天津市科技協作二等獎。該菌種在全國推廣,產生了巨大的社會效益和經濟效益。據項目負責人陳寧博士介紹,中國味精產量居世界首位,進一步提高谷氨酸發酵水平,是中國在“十五”期間生物技術領域重點研究的方向之一。他們以黃色短桿菌TJ1為出發菌株,定向選育出溫度敏感突變株CN1021,在最佳發酵條件下,谷氨酸溫度敏感型菌株CN1021在6m3發酵罐上產酸達146g/L,糖酸轉化率達62.8%,達到國際同類研究的先進水平。L-纈氨酸是廣泛應用於醫藥、食品及調味劑、動物飼料和化妝品的必需氨基酸。陳寧博士帶領的實驗室以黃色短桿菌TV10為出發菌株,選育出L-纈氨酸高產菌菌株TV2564。在5L發酵罐上補料分批發酵60h,產L-纈氨酸50.71g/L,達到中國同類研究的領先水平及國際先進水平。

合成途徑


人工控制微生物代謝的措施包括改變微生物遺傳特性、控制生產過程中的各種條件(即發酵條件)等。例如,黃色短桿菌能夠利用天冬氨酸合成賴氨酸、蘇氨酸和甲硫氨酸

誘變育種


黃色短桿菌
黃色短桿菌
以黃色短桿菌為出發菌,採用誘變育種的方法選育得到一株能高產L-組氨酸的突變菌株。在加有150g·L- 1葡萄糖;35g·L-1硫酸銨;10g·L-1蛋白腖的發酵培養基中培養72h,產L-組氨酸128.28mg·L-1。選育具有遺傳標記(Met-+IleL+2-TAr+α-ABr+β-HLr+Rifr+SGr)的突變株TK0303,使其具有L-亮氨酸的生物合成能力。用黃色短桿菌突變株TK0303經擴培、發酵培養、及L-亮氨酸的提取步驟可得到L-亮氨酸粗品,進一步精製可得到L-亮氨酸純品。本發明利用突變株發酵生產L-亮氨酸,可以大大提高L-亮氨酸的產率,最高產量可達30g/L,其產量完全滿足實現大規模工業化生產的要求。本發明利用金屬膜過濾法預處理發酵液,並以離子交換法提取L-亮氨酸,純度可達98%以上,提取率55%。