激發子
激發子
激發子(elicitor)是一類能激活寄主植物產生防衛反應的特殊化合物。從化學組成上,激發子可分為多糖類、糖蛋白、多肽類等。在植物-病原菌互作系統中已發現了許多蛋白和多肽類激發子,其中包括疫霉屬(Phytophthora)產生的激發素(elicitines)、細菌的(harpins)木聚糖酶、植物病毒的蛋白類激發子以及與寄主抗病基因相對應的病原菌專化性無毒基因(avirulance gene)產物無毒蛋白等。最常見的激發子為flg22,是鞭毛蛋白N端保守的一個含22個氨基酸的小肽。常用於植物免疫研究中,處理植物細胞。
西瓜枯萎病菌和香蕉枯萎病菌的細胞壁來源的水溶性、熱穩定激發子對西瓜枯萎病的誘抗作用。結果表明:2種來源的激發子均有明顯的誘導西瓜苗細胞壁木質化的作用,但來源於香蕉枯萎病菌的激發子對木質化的誘導活性比來源於西瓜枯萎病菌的要高;西瓜苗分別經2種激發子處理后,體內過氧化物酶、多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶的活性均有異常的增加,但來源於西瓜枯萎病菌的激發子對這3種防禦酶的誘導速度比來源於香蕉枯萎病菌的要快;經激發子誘導處理后瓜苗對枯萎病菌的抗性有了明顯的提高,但來源於西瓜枯萎病菌的激發子的誘抗效果相對較好.
基因水稻品系CO39(不含已知抗基因)、C101LAC(含Pi-1(t)基因)、C101A51(含Pi-2(t)基因)和C104PKT(含Pi-3(t)基因),分別與廣東省稻瘟菌優勢生理小種ZC13(菌株97-151a)組成了親和性互作、中度非親和性互作、高度非親和性和完全非親和性互作組合。從稻瘟菌菌絲和培養濾液中分別採用高溫高壓法和乙醇沉澱法獲得了兩種激發子。對它們的處理對水稻抗稻瘟病及水稻中過氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的誘導活性進行了研究。
結果表明,所得的濾液激發子的葡萄糖含量為41.88mg/ml,熱解激發子的糖含量為176.83mg/ml,基本不含蛋白質成分。分別用0.084mg/ml(葡萄糖當量)的濾液激發子和0.36mg/ml(葡萄糖當量)的熱解激發子對水稻進行噴霧處理然後再接種稻瘟菌,結果表明,兩種處理的病情指數均比對照有顯著下降,熱解激發子的誘導抗性效果更強些。
用激發子稀釋液以壓傷斑法處理水稻葉片後接種稻瘟菌,發現濾液激發子和熱解激發子分別在葡萄糖當量為0.42mg/ml-4.20mg/ml和1.77mg/ml-17.68mg/ml範圍內明顯誘導水稻對稻瘟菌的抗性,並且濃度越大,誘導效果越好。激發子處理後接種稻瘟菌,免疫品系C101A51出現了典型的過敏性反應。
水處理后抗感病性不同的近等基因水稻品系的POD酶活性變化不大,僅於處理后的第6小時或12小時出現一個小峰,其餘時刻無大的活性峰出現。濾液激發子處理水稻后,四個品系的POD誘導活性變化不一致。高感品系CO39在18小時出現一個高峰,高抗品系C101LAC在6小時有一高峰,中抗和免疫品系與對照相比差異不明顯,無峰值。熱解激發子對四個品系的POD活性的影響很明顯:在高感品系CO39和中抗品系C104PKT中,該激發子處理后,POD活性明顯增加,並分別於24小時和12小時達到一個高峰,但在免疫品系C101A51和高抗品系C101LAC中,POD活性與空白對照相似,其活性最高峰均出現在後期(168小時),說明感病品系較抗病品系對激發子的敏感性更高。
濾液激發子處理后使CO39的PAL活性於6小時達到一個高峰;中抗品系C104PKT的峰值至96小時才出現;在高抗品系C101LAC中,除了12小時有一個小峰外,一直無大峰出現,但酶活平穩上升;免疫品系C101A51分別於48小時和120小時出現峰值。熱解激發子對水稻PAL誘導活性變化的影響更明顯,四個品系誘導的PAL活性峰值均遠遠高於濾液激發子處理和空白對照。高感品系CO39和中抗品系C104PKT的酶活性高峰出現較早,分別為18小時和24小時;免疫品系C101A51的活性峰值至48小時才出現,且最高峰值低於其它品系;高抗品系C101LAC的活性高峰則推遲至144小時才出現。
濾液激發子誘導的POD比活力增值與水稻品系的感病性無明顯相關性。熱解激發子可以迅速提高CO39的POD酶活性,其酶活力增值在18小時、24小時和48小時分別比空白對照增強了10.49、9.76和4.39倍;C104PKT的POD比活力增加也較明顯;C101LAC、C101A51的增值很小,說明熱解激發子誘導的水稻POD酶活增值的動態變化同水稻的抗感稻瘟性有一定的關係,即誘導抗病程度與酶比活力增值相關。
熱解激發子處理后,CO39的PAL的酶比活力分別在6小時、12小時、18小時、24小時和48小時比空白對照增加了2.70、3.26、13.01、3.39和4.94倍;C104PKT的PAL比活力增值分別在6小時、12小時、18小時、24小時和48小時比空白對照增加了3.17、3.43、9.17、7.93和4.20倍;C101LAC和C101A51的PAL酶比活力增值一般為1倍左右,可見熱解激發子處理后PAL比活力增值與水稻誘導抗病性呈正相關。
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