豬細小病毒病

由豬細小病毒引起的一種豬的繁殖障礙病

豬細小病毒病(porcine parvovirus infection,PPI)又稱豬繁殖障礙病。是由豬細小病毒引起的一種豬的繁殖障礙病。以懷孕母豬發生流產、死產、產木乃伊為特徵。

豬細小病毒病是由豬細小病毒(PPV)引起的一種豬繁殖障礙病,該病主要表現為胚胎和胎兒的感染和死亡,特別是初產母豬發生死胎、畸形胎和木乃伊胎,但母豬本身無明顯的癥狀。

內容介紹


豬細病毒細病毒科細病毒屬。病毒粒囊膜,徑約,基組單股,約.。病毒熱具較強抵抗,℃℃病毒染血凝均顯改,℃鍾染血凝均喪。病毒℃極穩,酸鹼較強抵抗,pH3.0~9.0之間穩定,能抵抗乙醚、氯仿等脂溶劑,但0.5%漂白粉、l%~1.5%氫氧化鈉5分鐘能殺滅病毒,2%戊二醛需20分鐘,甲醛蒸氣和紫外線需要相當長的時間才能殺死該病毒。短時間胰酶處理對病毒懸液感染性不僅沒有影響,反而能提高其感染效價。在pH9.0的甘油緩衝鹽水中或在一20~C以下能保存一年以上毒力不會下降。

流行病學


各齡、豬野豬均易。傳染源染細小病毒的母豬和帶毒的公豬,後備母豬比經產母豬易感染,病毒能通過胎盤垂直傳播,而帶毒豬所產的活豬可能帶毒排毒時間很長甚至終生。

發病機理


染豬病尚完清楚,研究:豬影響:豬精卵細胞影響,二胎育影響。

臨床癥狀


豬群暴發此病時常與木乃伊、窩仔數減少、母豬難產和重複配種等臨床表現有關。在懷孕早期30-50天感染,胚胎死亡或被吸收,使母豬不孕和不規則地反覆發情。
懷孕中期50-60天感染,胎兒死亡之後,形成木乃伊,懷孕後期60-70天以上的胎兒有自免疫能力,能夠抵抗病毒感染,則大多數胎兒能存活下來,但可長期帶毒。

主要病變


病變主要在胎兒,可見感染胎兒充血、水腫、出血、體腔積液、脫水(木乃伊化)及壞死等病變。

診斷


根據流行病學、臨床癥狀和病理變化可做出初步診斷,確診需進一步做實驗室診斷。
實驗室診斷
病原分離:取流產胎兒、死產仔豬的腎等材料處理後接種細胞進行病毒分離。
病原鑒定:免疫熒光試驗、PCR診斷試驗、分子雜交試驗。
病毒抗原的檢查:(1)PPV熒光抗體直接染色法:在熒光顯微鏡下觀察,若發現接種的細胞片中細胞核不著染,即可確診。(2)PPV酶標抗體直接染色法:在普通生物顯微鏡下觀察染色情況,若未接種PPV的正常對照細胞片中細胞核無棕色著染現象,而接種的PPV的細胞片中細胞核著染,即可確診。(3)PPV血凝試驗:若發現稀釋后的樣品有凝集紅細胞的現象,而正常PBS紅細胞對照無自凝現象,則可認為樣品可疑還需用特異性的PPV標準陽性血清作血凝抑制試驗,如能抑制樣品的血凝現象,即可確診為PPV。
血清學檢查:血凝和血凝抑制試驗(最為常用)。PPV血清中和試驗、酶聯免疫吸附試驗、免疫熒光試驗。
病料採集:取流產胎兒、死產仔豬的腎、睾丸、肺、肝、腸系膜淋巴結或母豬胎盤、陰道分泌物,製成無菌懸液,備用。

防治


採取綜合性防治措施:細小病毒(PPV)對外界環境的抵抗力很強,要使一個無感染的豬場保持下去,必須採取嚴格的衛生措施,盡量堅持自繁自養,如需要引進種豬,必須從無細小病毒(PPV)感染的豬場引進。當HI滴度在1:256以下或陰性時,方准許引進。引進后嚴格隔離2周以上,當再次檢測HI陰性時,方可混群飼養。發病豬場,應特別防止小母豬在第一胎採食時被感染,可把其配種期拖延至9月齡時,此時母源抗體已消失(母源抗體可持續平均21周),通過人工主動免疫使其產生免疫力后再配種。
疫苗預防公認使用疫苗是預防豬細小病毒病、是提高母豬抗病力和繁殖率的有效方法,已有10多個國家研製出了細小病毒(PPV)疫苗。疫苗包括活疫苗與滅活苗。活疫苗產生的抗體滴度高,而且維持時間較長,而滅活苗的免疫期比較短,一般只有半年。疫苗注射可選在配種前幾周進行,以使懷孕母豬於易感期保持堅強的免疫力。為防止母源抗體的干擾可採用兩次注射法或通過測定HI滴度以確定免疫時間,抗體滴度大於1:20時,不宜注射,抗體效價高於1:80時,即可抵抗PPV的感染。在生產上為了給母豬提供堅強的免疫力,最好豬每次配種前都進行免疫,可以通過用滅活油乳劑苗兩次注射,以避開體內已存在的被動免疫力的干擾。將豬在斷奶時從污染群移到沒有細小病毒(PPV)污染地方進行隔離飼養,也有助於本病的凈化。
要 嚴格引種檢疫,做好隔離飼養管理工作,對病死屍體及污物、場地,要嚴格消毒,做好無害化處理工作。
一、流行病學調查
感染母豬所產的死胎、仔豬及子宮內的排泄物中均含有很高滴度的病毒,而帶毒豬所產的活豬可能帶毒排毒時間很長甚至終生。感染種公豬也是該病最危險的傳染源,可在公豬的精液、精索、附睾、性腺中分離到病毒,種公豬通過配種傳染給易感母豬,並使該病傳播擴散。
污染的豬舍是豬細小病毒的主要儲藏所。在病豬移出、空圈4.5個月,經徹底清掃后,再放進易感豬,仍可被感染。污染的食物及豬的唾液等均能長久地存在傳染性。
仔豬、胚胎、胎豬通過感染母豬發生垂直感染;公豬、肥育豬和母豬主要是經污染的飼料、環境經呼吸道、生殖道或消化道感染;初產母豬的感染多數是經與帶毒公豬配種時發生的;鼠類也能傳播本病。
本病具有很高的感染性,易感的健康豬群—旦病毒傳入,3個月內幾乎可導致豬群100%感染;感染群的豬只,較長時間保持血清學反應陽性。本病多發生於春、夏季節或母豬產仔和交配季節。母豬懷孕早期感染時,胚胎、胎豬死亡率可高達80%~100%。母豬在懷孕期的前30~40天最易感染,孕期不同時間感染分別會造成死胎、流產、木乃伊、產弱仔豬和母豬久配不孕等不同癥狀。病毒的感染率與動物年齡呈正比。
二、臨床癥狀
懷孕母豬出現繁殖障礙,如流產、死胎、產木乃伊、產後久配不孕等。其他豬感染后不表現明顯的臨床癥狀。
三、診斷
豬細小病毒感染可以依據臨診癥狀和流行病學做出初步診斷,一般認為,如果僅妊娠母豬發生流產、死胎、木乃伊胎、胎兒發育異常等繁殖障礙癥狀,同時有證據表明是傳染性疾病時,應考慮到豬細小病毒感染的可能,但是進一步確診必須進行實驗室診斷。自從首次報道豬細小病毒病以來,國內外學者對該病的診斷方法進行了大量研究,從病毒分離鑒定、血凝及血凝抑制試驗、酶聯免疫吸附試驗、熒光抗體試驗、乳膠凝集試驗等,到核酸探針、聚合酶鏈式反應(PCR)等,但是各種診斷方法各有利弊,其中血凝及血凝抑制試驗已經得到了國內外學者的普通認可,在臨診檢測中被廣泛應用。
病毒分離和鑒定是直接檢測病原,其用於診斷的最大優點是結果準確可靠,可以作為最後確診,但是檢測結果常受胎兒死亡時間的影響。一般用於檢測該病的病料為流產或死產胎兒的新鮮臟器(如腦、腎、肝、肺、睾丸、胎盤及腸系膜淋巴結等),其中以腸系膜淋巴結和肝臟的分離率最高。間接免疫熒光技術是鑒定豬細小病毒病抗原可靠而又敏感的診斷技術。取胎豬組織製備冰凍切片,再與標準化試劑反應,在幾小時內可以完成試驗。免疫熒光抗體技術其有特異、敏感、快速、檢出率高的特點,是實驗室進行病毒分離鑒定常用的輔助方法。
在豬細小病毒的血清學診斷方法中,血凝抑制(HI)試驗是檢測豬細小病毒抗體最常用的方法,一般採用試管法或微量法。該方法相對比較簡單、方便,靈敏度也較高,不過在該方法操作中,需要對待檢血清進行熱滅活處理,然後用紅細胞泥吸附,以除去血清中的非特異性血凝素,進而用高嶺土吸附以除去或減少血清中非特異性血凝抑制因子。影響血細胞凝集的因素有:試驗溫度、紅細胞種類、供血動物的年齡等。近些年,建立了檢測PPV血清抗體的乳膠凝集診斷方法,致敏的乳膠抗原與PPV陽性血清反應,可以產生肉眼可見的凝集顆粒,其特異性較高,具有簡便、快速、經濟等優點,尤其適合於臨診上的現場檢測和該病的早期定性診斷,被許多學者譽為“傻瓜技術”。
核酸探針技術是一種分子水平的檢測技術,具有快速、敏感、特異性強等特點,特別適用於疾病的早期診斷和類症鑒別診斷,是近二十年來應用較多的一項診斷技術,適宜於實驗室進行豬細小病毒感染的診斷。但該方法的技術含量高,只能在專業實驗室應用,不適合大面積臨診診斷和現場應用。
本病應與流行性乙型腦炎偽狂犬病、豬繁殖與呼吸障礙綜合征、慢性非典型豬瘟、衣原體感染豬布氏桿菌病等疾病進行鑒別區分。
四、治療
1.肌肉注射英國意康的英國多聯特配合頭孢注射液,每日2次,連用3~5天。
2.對延時分娩的病豬及時注射前列腺烯醇注射液引產,防止胎兒腐敗,滯留子宮引起子宮內膜炎及不孕。
3.對心功能差的使用強心藥,機體脫水的要靜脈補液。
五、體會
.據調查,豬細小病毒病發病率有升高趨勢,可能與未經免疫或免疫程序不科學,引種不慎有關。為此要加強該病的引種檢疫及免疫工作,實施科學的免疫程序。
2.豬細小病毒病免疫一定要謹慎,使用不當可人為傳入病情。豬場無該病感染,最好不免疫,必須免疫時,最好使用滅活苗。
3.對延時分娩的豬要及時引產。實踐證明,用前列腺烯醇注射液注射安全可靠,並有利於胎衣排出。
豬細小病毒病,豬乙型腦炎,豬藍耳病豬偽狂犬病是母豬四大繁殖障礙性疾病。

病原學


豬細小病毒病的病原是豬細小病毒,屬於細小病毒科(Parvoviridae)、細小病毒屬(parvovirus)的自主型細小病毒,血清型單一,很少發生變異,所有分離株的血凝活性、抗原性、理化特性及複製裝配特性等均十分相似或完全相同,而且豬細小病毒與同型的其他自主型細小病毒在結構與功能方面也存在許多相似之處。成熟的豬細小病毒完整病毒粒子外觀呈六角形或圓形,具有典型的二十面立體對稱結構,無囊膜,衣殼由32個殼粒組成,直徑約為25~28nm。本病毒對外界理化因素有很強的抵抗力,對熱具有強大抵抗力,56℃30min不影響其感染性和血凝活性,70℃2h仍不使其喪失感染性和血凝活性,但是80℃5min可使其喪失感染性和血凝活性;對脂溶劑(如乙醚、氯仿等)有抵抗力;對酸、甲醛蒸汽和紫外線均有一定抵抗力;但是在0.5%漂白粉或氫氧化鈉溶液中5min即可被殺死。該病毒具有良好的血凝活性,能夠凝集人的O型、豚鼠、大鼠、雞、貓、猴的紅細胞,但是不能凝集牛、綿羊、倉鼠、豬的紅細胞,其中以凝集豚鼠紅細胞為最好,在凝集雞紅細胞時存在個體差異。
本病毒一般只能在來源於豬的生長分裂旺盛的細胞(如原代豬腎、豬睾丸細胞和傳代細胞PK-15,IBRS-2等)上增殖,其體外複製是殺細胞性的,細胞病變表現為細胞隆起、變圓、核固縮和溶解,最後許多細胞碎片黏附在一起使受感染的細胞單層外形不整,呈“破布條狀”。另外,不同毒株間存在培養溫度依賴性差異,從而可以解釋不同分離株在豬體內的複製能力和毒力差異的現象。

病理變化


在非妊娠母豬沒有發現大體病變和鏡下病變,懷孕母豬在自然感染時也沒有大體病理變化,但在妊娠後於子宮內人工接種病毒,可以出現固有膜深層和子宮內膜區域出現單核細胞的聚集,導致胎豬出現組織病理變化,引起胎兒的細胞浸潤,在胎兒的大腦、脊髓和眼結膜有漿細胞淋巴細胞形成的血管套,但是子宮的病變更加明顯。
妊娠早期的胎兒免疫力低下,感染后可以出現較多肉眼變化,包括不同程度的發育不良,偶爾可見充血和血液滲入組織內,伴隨體腔內漿液性滲出物的淤積,出現淤血、水腫和出血,胎兒死亡后隨著逐漸變成黑色,體液被重吸收后,呈現“木乃伊化”。由於病毒和病毒抗原大量分佈於感染的胚胎組織,死亡胎兒的鏡下病變主要是多數組織和血管廣泛的細胞壞死

疫苗市場


需求

2011年我國能繁母豬平均存欄量約6,380萬頭,加上種公豬的存欄量,我國種豬平均存欄量約為7,000萬頭。按每頭種豬每年應免2次測算(每次配種前免疫一次),我國豬細小病毒病疫苗市場容量約有2億毫升,市場空間巨大。豬細小病毒病尚未納入國家重大動物疫病政府強制免疫範圍,屬於養殖戶自願接種。但隨著生豬養殖業集約化程度不斷提高,該病對生豬養殖業的危害也日趨嚴重。可以預見,未來幾年對豬細小病毒病的自願接種預防規模將不斷擴大。

供應

目前國內生產豬細小病毒病滅活疫苗的企業主要有齊魯動物保健品有限公司上海海利生物藥品有限公司、武漢科前動物生物製品有限責任公司、中牧實業股份有限公司成都葯械廠。豬細小病毒病滅活疫苗採用的毒株系自主研發的CP-99 株,具有產生病毒含量高、免疫原性好的特點,在工藝技術上則採用了新型佐劑、新型滅活劑以及美國先進的超濾系統和乳化技術,產品具有免疫效力強、應激反應小、安全性高的特點,獲得了市場廣泛認可。