神經膠質細胞

膠質細胞具有複雜多樣的結構和表達豐富的分泌產物，它含有大部分神經遞質、神經肽、激素及神經營養因子受體、離子通道、神經活性氨基酸親和載體、細胞識別分子，並能分泌多種神經活性物質(生長因子、神經營養因子和細胞因子等)。

膠質纖維酸性蛋白(GFAP)分子量為50～52kD，主要存在於中樞神經系統星形膠質細胞。編碼GFAP基因位於17q21，與其他中間絲序列尤其是結蛋白和波形蛋白的鹼基序列具有較高的同源性，其中與結蛋白的同源性達65%，與波形蛋白的同源性達67%。星形膠質前體細胞主要表達Vimentin，而成熟之後表達Vimentin和GFAP，故GFAP被認為是星形膠質細胞成熟的標誌物。有研究發現GFAP陽性細胞在產後小鼠和成年大鼠的中樞神經細胞中呈深染的不規則“星”狀，主要定位在星形膠質細胞的胞體和突起上，在前額皮質的分子層、外顆粒層和錐體細胞層、海馬和黑質中密集分佈，紋狀體只有少量陽性細胞表達；在脊髓的灰、白質主要分佈於脊髓中央管附近大量表達。在人腦中，GFAP最早出現於胚胎髮育的第8周，逐漸表達於膠質細胞中，主要表達於星形膠質細胞中，而在室管膜細胞、少突膠質細胞等膠質細胞也有少量分佈。另外，GFAP還可表達在非中樞神經系統(CNS)細胞如許旺細胞、成纖維細胞、肝星狀細胞。GFAP蛋白作為成熟的星形膠質細胞中間絲的組成部分，具有調節細胞代謝、形成和維護血腦屏障、產生和釋放神經營養因子等作用，而且在維持星形細胞形態和功能上具有重要作用：如形成細胞核和細胞膜的連接、參與細胞骨架重組、黏附和穩定神經元的結構、維持腦內髓鞘形成並作為細胞信號轉導通路等。

O1/O4有研究通過間接免疫熒光法觀察O1、O2、O3以及O4抗原標記產後早期的小鼠小腦、大腦、脊髓、視神經、視網膜細胞中發現在星形膠質細胞、神經細胞、成纖維細胞的表面都沒有檢測O抗體，而在少突膠質細胞的表面上檢測到，並且O抗原在小鼠、大鼠、雞和人類的中樞神經系統中均有表達。O4及O1抗原均為少突膠質細胞標誌物，均為膜表面的一種腦硫酯，O4既可以表達於晚期少突膠質細胞前體細胞，也可表達於未成熟少突膠質細胞，Q1主要表達於未成熟少突膠質細胞。O4陽性的細胞可以成為分化為成熟MBP陽性的少突膠質細胞，該細胞為GC陽性細胞(少突膠質前體細胞)，故可推測O4也特異性表達少突膠質前體細胞。幾乎所有的O4陽性的細胞在成熟的大腦皮質也表達NG2(膠質前體細胞)，而NG2陽性細胞的不表達OX-42單克隆抗體，說明O4/NG2陽性細胞不是小膠質細胞。為了研究O4是否只在少突膠質細胞譜系表達，進行了O4和GFAP、NFP抗體免疫雙標檢測，發現O4在皮質灰質中的NFP陽性的神經元細胞、GFAP陽性的星形膠質細胞均不表達。因此，認為O4抗體和GC、NG2一樣，可作為少突膠質前體細胞的標誌物，但還可標記未成熟少突膠質細胞，不標記神經元細胞、星形膠質細胞、小膠質細胞；而O1僅為未成熟少突膠質細胞的標誌物。

少突膠質細胞因子(OLIG)是一個與鹼性螺旋-環-螺旋結構轉錄因子家族，用Northernblot技術分析表明，OLIG1(2.2kb)和OLIG2(2.4kb)在大腦中特異性表達。在成年嚙齒動物腦組織，OLIG1/2在少突膠質細胞特異性表達，而在星形膠質細胞和神經元細胞不表達。OLIG1和OLIG2位於鼠16號染色體，在人類位於21號染色體。這兩個基因起始於胚胎期脊髓腹側區域，在胚胎期神經管、脊髓、丘腦均有表達，成年後在胼胝體、腦白質、海馬中也可廣泛表達，但灰質表達很少。OLIG2的分佈要比OLIG1範圍廣，在腦室區(VZ)、SVZ橫向(LGE)區和內側神經節的E10.5到E14.5區，OLIG2均可呈陽性表達，而在這些細胞中很少表達OLIG1，這表明OLIG2的表達不限於少突膠質細胞系，在多種類型的神經元祖細胞中均可表達，包括多能神經元、神經膠質祖細胞。OLIG1在胚胎期位於少突膠質細胞及其前體細胞的細胞核中，出生后則由胞核遷移到胞質中，但在發生髓鞘損傷后OLIG1又出現在胞核內；而OLIG2始終存在於胞核中，不會發生遷移現象。利用基因轉染技術使OLIG1和OLIG2基因過表達，發現過度表達能增加少突膠質前體細胞的增殖和運動神經元前體細胞的產生，其中OLIG1作用於少突膠質細胞的成熟過程中；OLIG2在脊髓和後腦的軀體運動神經元發育過程中發揮作用，也參與少突膠質細胞的發育；OLIG1在發育的腦中能夠部分代償OLIG2的功能。

髓鞘鹼性蛋白(MBP)成熟少突膠質細胞的標誌物，廣泛存在於少突膠質細胞及其髓鞘中的骨架蛋白中，具有四個主要類型，根據分子量分為21500kb，18500kb，17000kb，14000kb。人和鼠的MBP基因均位於第18號染色體遠端即18q22-23。MBP分中樞性和周圍性兩種，中樞性MBP由少突膠質細胞合成和分泌，在白質中含量最高，主要在少突膠質細內以共價鍵結合於髓鞘質漿膜面，同時也與細胞骨架、微管、微絲相連；周圍性MBP由雪旺細胞合成和分泌，存在於周圍神經髓鞘中；除了神經組織外，心、肝、腎、腎上腺、骨骼肌等器官組織中也存在，但含量很低，難以測出。在新生小鼠腦的神經膠質細胞培養中採用免疫熒光法和原位雜交的方法研究髓鞘鹼性蛋白髮育階段MBP基因的表達，大量MBP特異性mRNA在產後5～6d不成熟少突膠質細胞內突然出現，在成熟過程中慢慢增加，約有60%～80%的細胞可表達MBP，但在神經元細胞中沒有表達。有研究用雙重標記的方法發現，在小鼠產後8～9d，MBP陽性表達在少量GC陽性的細胞，在產後10～13d，所有的GC陽性細胞均MBP標記陽性，在產後13～14d的細胞培養中MBP標記的細胞比例最高，GC是特異性不成熟的少突膠質細胞的標誌物，MBP在GC陽性后的細胞表達，有力地說明MBP表達成熟少突膠質細胞。因此，認為MBP特異性標記少突膠質細胞，而非神經元細胞。

少突膠質細胞特異性抗體(RIP)有研究用免疫組化的方法發現RIP陽性細胞的主要分佈在小鼠脊髓和小腦少突膠質細胞髓鞘的軸突。此外，分別利用RIP和MBP、GFAP免疫雙標細胞標記實驗表明，RIP在MBP陽性的細胞染色，而在GFAP陽性的細胞不染色，表明RIP選擇性染色少突膠質細胞，非星形膠質細胞。

CD11b單克隆抗體(OX42)特異性標記小膠質細胞，因能識別鼠的CR3受體，CR3受體位於小膠質細胞的分支，故OX42抗體特異性標記小膠質細胞。在正常成年腦組織中，小膠質細胞處於靜息狀態，胞體很小，突起很細，OX42染色呈陰性或弱陽性，稱之為“靜息型”小膠質細胞。當機體受到某種刺激(如外傷、感染、物理化學或電刺激)后小膠質細胞被激活，早期胞體變大、突起變粗、棘明顯清晰，OX42染色較深成為早期反應狀態，稱之為“早期反應型”小膠質細胞。隨著刺激灶的存在，小膠質細胞的胞體進一步肥大，突起回縮變短，而成為巨噬細胞樣的“吞噬型”小膠質細胞。在年輕組、老年組正常腦組織切片中沒有OX42的陽性小膠質細胞，而在大鼠腦出血組中，老年組活化的OX42陽性的小膠質細胞明顯增多，而且多於年輕組。故認為OX42單克隆抗體在正常小膠質細胞染色淺或無，而在非正常小膠質細胞染色多或深。

離子鈣結合銜接分子1(IBA-1)是一個EF手型蛋白，特異性表達單核細胞譜系，如小膠質細胞。IBA-1是一個具有肌動蛋白屬性進化的保守蛋白，已發現與F-肌動蛋白存在共定位，在巨噬細胞集落刺激因子的膜褶皺樣運動和吞噬作用中發揮重要作用。IBA-1在人、猴、馬、大鼠和小鼠組織的小膠質細胞均有發現。有研究用免疫細胞化學和激光共聚焦顯微鏡的方法檢測IBA-1蛋白只存在小膠質細胞、腦脊膜、室管膜的巨噬細胞和脈絡叢淺表的基質細胞的巨噬細胞中表達，而這些細胞均具有吞噬功能，小膠質細胞為巨噬細胞的一種，進一步證實IBA-1在中樞神經系統中特異性表達於小膠質細胞。因IBA-1在小膠質細胞含量豐富且穩定，故認為是小膠質細胞的可靠的特異的標誌物。另外，IBA-1也是同種異體移植炎症因子-1(AIF1)，還可在造血細胞中表達。