燈刷染色體

燈刷染色體（lampbrush chromosome）是卵母細胞進行第一次減數分裂時，停留在雙線期的染色體。它是一個二價體，含4條染色單體，由軸和側絲組成，形似燈刷。染色體軸由染色粒（chromomere，是指染色質凝集而成的顆粒）軸絲構成，每條染色體軸長400μm，從染色粒向兩側伸出兩個相類似的側環，伸出的環是成對對稱的，一個平均大小的環約含100kb DNA。

較普遍存在於魚類、兩棲類和爬行類動物的卵母細胞中的一類形似燈刷的特殊巨大染色體。通常出現在卵母細胞第一次減數分裂的雙線期（diplotene stage），為二價體，兩條同源染色體通過幾處交叉而相連，含四條染色單體。由染色深、高密度的顆粒（即染色粒，chromomere）串連組成染色單體的主軸，由主軸染色粒向兩側伸出成對側環，染色粒是染色單體緊密摺疊區域，其直徑約為0.25～2微米，為不進行轉錄的片斷。側環 是脫氧核糖核酸（DNA）轉錄活躍區域。一套燈刷染色體約有10000個側環。側環軸是由DNA分子外被以基質所組成，基質成分為核糖核酸（RNA）和蛋白質。每個側環由一個轉錄單位或幾個轉錄單位組成。轉錄過程中由於基質之厚薄和轉錄RNA分子之長短不同，側環具有粗細變化之過程。電鏡下觀察從側環垂直伸出之細絲為DNA軸轉錄產物，隨轉錄之進展，RNA鏈不斷延長，外形呈“聖誕樹”（christmastree）樣結構。每條燈刷染色體的形態和側環在卵母細胞的生長期是一定的，故可成為編號染色體的標誌。燈刷染色體是研究基因表達極為理想的實驗材料。有證據表明，存在於燈刷型染色體上的環形結構可能與基因的活性有關。燈刷型染色體只有在兩棲類動物卵細胞發生減數分裂時才能被觀察到，它是染色體充分伸展時的一種形態。此時，兩對姐妹染色體常常通過“交叉點”連成一體。高倍電鏡下觀察發現，燈刷型染色體上存在許多突起的“泡”狀或“環”狀結構，有時還能看到RNP沿著這些突起結構移動，表明這些DNA正在被RNA聚合酶所轉錄。

兩棲類燈刷染色體

兩棲類卵母細胞中，第一次減數分裂的雙線期時，每條染色體的兩條同源染色體經複製而形成總數為4條姊妹染色單體的結構併產生交叉。這一狀態在卵母細胞中可維持數月或數年之久。

每條染色單體由一條去氧核糖核蛋白 (DNP）纖維構成。纖維在一定部位包裝緻密成為染色粒，其間由很短的DNP相連，稱為軸絲。染色粒和軸絲構成燈刷染色體的軸。從染色粒向外伸展出的DNP纖維稱為側環。軸上除側環外，還有著絲粒、球體、端粒、軸顆粒等結構。這些結構和某些巨大側環常出現在特定染色體的固定部位，據此可以鑒別各條染色體，稱為界標。

染色粒 配對同源染色體中，染色體軸上染色粒的數目和分佈大體相同，但形狀不很規則。有肋螈的染色粒在掃描電鏡下可見由若干小型側環組成。染色粒的數量較多，例如冠螈的單倍體染色體組中約有5000個染色粒。染色粒的數目和大小不僅與物種有關，也隨側環轉錄活性而變化。年輕的卵母細胞中由於側環轉錄活性處於高峰，染色粒較小，但數目較多。此時若用放線菌素D抑制側環的轉錄活性，相鄰的染色粒會彼此融合而在染色體軸上產生少數較大的緻密體。在正常情況下隨著卵母細胞漸趨成熟，側環轉錄活性逐步降低，側環回縮，染色粒也彼此逐漸融合，數量變少，最終成一條無法認出染色粒的染色體軸。

著絲粒 燈刷染色體的著絲粒通常位於交叉附近。著絲粒有二種形態：一種為顆粒狀，大小形態與前後染色粒不易區分，如東方蠑螈；另一種在著絲粒的前後帶有由相鄰染色粒彼此融合而成的軸棒，例如冠螈。著絲粒和軸棒上均無側環。燈刷染色體著絲粒指數與體細胞的大抵相同。側環與轉錄 側環是DNA活躍地轉錄的區域。它們的長度相差很大，兩棲類中側環平均長度為10～15微米，長的可達200～300微米，小的在光學顯微鏡下難以分辨。通常一個染色粒具一對側環，但有些染色粒可有數個側環。在側環上從轉錄起始點到終點稱為一個轉錄單位。用電鏡鋪展術觀察到側環DNA細絲的轉錄過程：直徑約為12.5微米的一系列的RNA聚合酶附著在轉錄單位的DNA細絲上。轉錄產物核糖核蛋白（RNP）在起始處較短，以後逐步增長。所以轉錄單位的寬窄不同（寬端約2～3微米），使每一轉錄單位在形態上呈現極性。多數側環上只有一個轉錄單位，有些側環則具數個轉錄單位，這些單位的轉錄方向可以相同，也可以不同。由於轉錄產物(基質-RNP）的種類、數量和堆積狀態的不同，在某些染色體軸的特定部位可以形成不同類型的側環。這些側環是燈刷染色體的重要界標。

各個側環不是同步地產生的。某些側環能出現在不同成熟程度的卵母細胞的燈刷染色體上，而另一些僅在年青的卵母細胞中伸展並顯示活躍的轉錄活性，以後即失去轉錄活性並回縮到染色粒中。在較大的卵母細胞中出現較長的側環，回縮也遲。激素處理也能影響側環的伸展和回縮，並能誘生象側環樣的其他類型的結構，這些形態變化的意義尚不清楚。

球體 在特定部位出現的球體相當於一般染色體的次縊痕，並含有酸性蛋白。球體周期性地脫落到核質中，並在同一部位形成新的球體。球體間常見彼此融合現象，但大小並不增加。電子顯微鏡下可見球體內層為圓而緻密的髓心被電子密度較弱的外鞘包圍著。在不同的亞種之間球體的大小是相對恆定的。

端粒 位於某些染色體兩端，是一種在蛋白質中包埋著DNP的小球體。端粒兩側無側環，其大小具種的特性。

軸顆粒 結構與端粒相似。也可見到軸顆粒間的融合。有些軸顆粒在染色體上具明顯而較恆定的位置，可作為鑒定染色體的界標。

其他界標和工作圖譜 在某些兩棲類燈刷染色體軸上尚有其他界標，如雙軸結構、軸棒狀結構，幾對較大的側環成簇地出現在軸的特定部位等。在形態學基礎上現在已經繪出了多種兩棲類燈刷染色體的工作圖譜。這樣的圖譜反映一整套燈刷染色體的相對長度、著絲粒部位和各種不同界標著生的位置，是利用燈刷染色體進行深入研究的基礎。

果蠅的Y染色體

多種動物精母細胞染色體上可以看到周圍有絨毛狀的結構，提示精子發生中存在燈刷期。多種果蠅其生長期的初級精母細胞中的燈刷樣結構比較典型，研究得也最為清楚。果蠅精母細胞第一次成熟分裂到雙線期，在某一染色體上會出現成對的側環。由於XO型的果蠅的精母細胞中不具側環，而XYY果蠅的精母細胞中側環數目加倍，因而很容易判定只有Y染色體是燈刷染色體。Y染色體在減數分裂中不配對，所以和兩棲類的不同，果蠅的燈刷染色體不是二價體。果蠅的 Y染色體共有平均長度為50微米 的5對側環，每對側環都有專門的名稱。

環套 位於染色體短臂上的一對側環。DNP軸含260千鹼基對（kb），在超薄切片上可見其上有直徑為40納米的RNP顆粒，是典型的燈刷樣側環。

杵狀環 位於長臂近著絲粒處，帶有2個體積很大的杵狀體故名。杵狀體由0.2～1微米的蛋白質球體和彌散的纖絲物質組成。這對側環是否象燈刷側環那樣正在轉錄，目前還缺乏染色質鋪展實驗的證據。

管狀帶 這對側環在光學顯微鏡可見由含緻密小顆粒的彌散物質組成。在電子顯微鏡下可見彌散物質由直徑35納米的小管組成，而緻密的顆粒由小管緊密包裝而成。鋪展實驗表明管狀帶的結構類似燈刷側環。

假核仁 這對側環具有大的假核仁和前後各一個假核仁球部，兩者超微結構相似，均由纖絲物質組成，其中含有小的 RNP顆粒。鋪展實驗中可見轉錄本長達1000kb，說明這對側環上可能只有一個轉錄單位。

絲狀體 位於長臂端部，由兩部分組成。遠端的彌散部分由纖絲組成，其中分佈著35～40納米的富含RNP的顆粒，一端與假核仁球部相接；近端的緻密部分由緊密包裝的纖絲組成，無RNP顆粒。鋪展實驗證明DNP軸上有長約500kb的轉錄單位。果蠅燈刷染色體的側環活躍地合成其他染色體不能合成的一種對生育必不可少的RNA。沒有Y染色體的XO型雄果蠅是完全不育的。Y染色體有缺陷的果蠅精子發生中出現的形態學異常是十分多樣的：精子細胞在伸長時生長受阻；精子中細胞器格局被打亂以及這些細胞器出現種種異常。這就說明側環上的基因的機能（即Y染色體雄性生育因子）不是為這些細胞器分化時所需的某一蛋白質編碼，而是調節著細胞生長和精子細胞器的自我裝配。而且這種Y染色體畸形的果蠅，其精子發生受阻在早期或晚期，取決於缺少哪一對側環。這提示不同的生育因子可能依次地作用於精子形成的不同的階段。

植物的燈刷染色體

有關植物燈刷染色體的報道不多。在垂花蔥雄性減數分裂雙線期、玉米雄性減數分裂終 變期均有燈刷期的記載。但所報道的燈刷染色體，只是一條較長的染色體，周圍有絨毛狀的結構。真菌減數分裂雙線期的燈刷染色體與此大同小異。只有地中海傘藻具有典型的燈刷染色體的結構。燈刷染色體是一類包裝不象一般染色體那麼緊密，並且正在進行轉錄的巨大染色體，因而歷來是研究染色體結構和功能的獨特材料。燈刷染色體研究中所取得的進展，也促進了對一般染色體結構的了解。

70年代以來，曾利用同位素標記的DNA與燈刷染色體上新產生的 RNA進行原位雜交，以確定單個基因的定位。但是陸續發現這些DNA探針專一性不強，例如組蛋白基因和5sDNA探針都能與許多側環上轉錄的RNA雜交，而燈刷染色體同一區域也可為不同探針所標記，這樣就使人們對用這種方法所定位的基因的真實性產生了懷疑。

隨著更精確的實驗技術的發展和應用，可以預期在卵子發育中燈刷染色體的基因活動將逐漸得到闡明，這不僅對於理解胚胎早期發育十分重要，而且還可以幫助了解體細胞分化中基因的調節與控制。