血乳酸

血液生化檢查、氨基酸、氮化物、有機酸測定

全血乳酸測定（分光光度法）：在NAD存在下，LDH催化乳酸脫氫，氧化成丙酮酸。加入硫酸肼使丙酮酸不斷被轉換消除，並促進反應完成。反應完成後生成的NADH與乳酸為等摩爾，在340nm波長下測定NADH的量，計算乳酸的含量。

血漿及血清乳酸測定（比色法）：以氧化型輔酶Ⅰ（NAD）作氫受體，LDH催化L-乳酸脫氫，生成丙酮酸，NAD轉變成還原型輔酶Ⅰ（NADH）。酚嗪二甲酯硫酸鹽（PMS）將NADH的氫傳遞給氯化硝基四氮唑藍（NBT），使其還原。在530nm波長的吸光度與乳酸含量呈線性關係。

全血乳酸測定（分光光度法）：

①50g/L偏磷酸（MPA）：稱取5.0g MPA，溶於蒸餾水中，並稀釋到100ml，新鮮配製。

②30g/L偏磷酸：稱取3.0g MPA，溶於蒸餾水中，並稀釋到100ml，新鮮配製。

③Tris-硫酸肼緩衝液，pH9.6（Tris 79mmol/L；硫酸肼400mmol/L）；取1mol/L氫氧化鈉350ml，加入Tris 4.79g，硫酸肼26g，EDTA-Na2 0.93g，以1mol/L氫氧化鈉調至pH 9.6，用蒸餾水稀釋到500ml，4℃保存可穩定8天。

④27mmol/L NAD溶液：根據需要量稱取NAD溶於蒸餾水中，4℃可穩定48h。

⑤LDH溶液：取LDH原液，用生理鹽水稀釋成1500U/ml（如用SigmaⅢ型LDH，該製品從牛心提制，每毫升含10mg蛋白，每毫克蛋白具有LDH活性400～600U，用鹽水稀釋成3mg/ml蛋白即可）。

⑥1mmol/L（9.08mg/dl）乳酸標準液：精確稱取L-乳酸鋰9.6mg（或DL-乳酸鋰19.2mg），以少量蒸餾水溶解，加入25μl濃硫酸，用蒸餾水稀釋到100ml，4℃保存可長期穩定。

血漿及血清乳酸測定（比色法）：

①0.1mol/L Tris-HCl緩衝液（pH 9.0）：取Tris 12.12g，溶於約800ml蒸餾水中，加入TritonX-100 40ml，混勻，以1mol/L鹽酸調節至pH9.0，蒸餾水稀釋至1L。

②無乳酸蛋白液：取Sephadex G25，用蒸餾水充分溶脹后裝柱。層析柱內徑16mm，裝柱高360mm。有蒸餾水反覆流洗后，取20ml肝功能試驗正常的混合血清上柱，用蒸餾水洗脫。待洗脫物開始出現混濁時收集，共收集20ml，加入少許氯化鈉（約0.1g）及疊氮鈉20mg，置冰箱保存。按本法測定乳酸（即無乳酸蛋白液代替標本進行測定），測定管與對照管吸光度之差應小於0.015。可按100ml上述緩衝液加無乳酸蛋白液5ml，混合後置冰箱保存。

③乳酸脫氫酶溶液：用全血法。

④5mmol/L乳酸標準液：溶解DL-乳酸鋰96mg或L-乳酸鋰48mg於蒸餾水中並稀釋至100ml，4℃保存。LDH只催化L（+）-乳酸。

⑤呈色劑：溶解NBT82mg於20ml蒸餾水中，可稍加熱助溶，不溶物需離心去除。再加入NAD200mg，最後中入PMS 5mg，混合後置棕色瓶中，4℃保存，至少可用6個月。

（1）全血乳酸測定（分光光度法）①應在空腹及休息狀態下抽血。不用止血帶，不可用力握拳。如用止血帶，應在穿刺后除去止血帶2min后再抽血。最好用肝素化的注射器抽血，抽取后立即注入預先稱量的含冰冷蛋白沉澱劑的試管中。如用血漿測定，每毫升血用10mg氟化鈉及2mg草酸鉀抗凝，立即冷卻標本，並在15min內離心。

抽血前試管編號，稱重（Wt）並記錄。加入6ml MPA（50g/L），再稱重（Wm）後放入冰浴中，每份標本最好作雙管分析。抽血后，立即注入上述試管中，每管2ml。顛倒混合3次，不可產生氣泡。待試管溫度與室溫平衡后，再稱重（Wb）。靜置至少15min后，離心沉澱（400r/min，15min）。上清液必須澄清。計算稀釋因數D：

D=Wb－Wt/Wb－Wm

②偏磷酸在水溶液易中形成多聚體（HPO3），水化成正磷酸（HPO3+H2O→H3PO4）。正磷酸不沉澱蛋白質，偏磷酸溶液沉澱蛋白的能力在4℃時僅能維持大約1周。

③本法線性範圍達5.6mmol/L（50mg/dl）。

④本法不用過氯酸作蛋白沉澱劑。

⑤一般乳酸鋰未標明L-或DL-者，均為DL-型，L-型乳酸鋰價格昂貴。

（2）血漿及血清乳酸測定（比色法）混勻后，用分光光度計在530nm波長，10mm光徑比色杯，以蒸餾水調零讀取各管吸光度。

①本法條件下，NBT還原生成物在反應液中十分穩定，無混濁和沉澱，吸光度久置不變。

②肝素抗凝血漿、血庫ACD保養液抗凝血漿、腦脊液、尿液、胃液等均可用本法測定。

③加入蛋白質對反應及生成物溶液的穩定是必要的。同時加入蛋白質及表面活性劑，可提高靈敏度及穩定性。Brij-35和TritonX-100有同樣效果。人血清白蛋白中含乳酸濃度較高，不適用。因人血清白蛋白的顯色強度平均較牛血清白蛋白高1.06倍，如用牛血清白蛋白，且僅加於標準管中時，標準管吸光度須乘此數。

④無乳酸蛋白液可與緩衝液預先混合后再加入1ml，代替表2中分別加入。

⑤本法線性範圍達8.0mmol/L（73mg/dl）。

⑥吸光度隨孵育時間延長而增加，必須準確10min。加入0.1mol/L鹽酸后吸光度不變。

⑦抗凝劑用肝素-氟化鈉較好（1mg肝素，6mg氟化鈉可抗凝5ml血）。血液抽出后，血標本管置冰浴中送檢，儘快分離血漿，放冰室保存待測。草酸鉀對LDH有一定抑制作用，抽血較少而草酸鉀相對多時尤為明顯。

全血乳酸測定（分光光度法）：全血乳酸0.5～1.7mmol/L（5～15mg/dl）。尿液乳酸為5.5～22mmol/24h。

血漿及血清乳酸測定（比色法）：小於2.4mmol/L（22.0mg/dl，呈正偏態分佈，95%百分位數上限）。

組織嚴重缺氧可導致三羧酸循環中丙酮酸需氧氧化的障礙，丙酮酸還原成乳酸的酵解作用增強，血中乳酸與丙酮酸比值增高及乳酸增加，甚至高達25mmol/L。這種極值的出現標誌著細胞氧化過程的惡化，並與顯著的呼吸增強、虛弱、疲勞、恍惚及最後昏迷相聯繫。即使酸中毒及低氧血症已得到處理，此種高乳酸血症常為不可逆的。見於休克的不可逆期、無酮中毒的糖尿病昏迷和各種疾病的終末期。

在休克、心失代償、血液病和肺功能不全時，常見的低氧血症同時有高乳酸血症，在低氧血症及原發條件處理后常是可逆的。在肝臟灌流量降低的病例，乳酸由肝的移除顯著降低，會出現乳酸酸中毒。

1.不慎與眼睛接觸后，請立即用大量清水沖洗並徵求醫生意見。

2.穿戴適當的防護服、手套和護目鏡或面具。

3.若發生事故或感不適，立即就醫(可能的話，出示其標籤)。