羊膜移植

用羊膜修復眼結膜、角膜缺損區的創面，可提供一個理想的基底膜，使其迅速上皮化及創口癒合，已受到眼科學界的廣泛重視。

低溫（－80℃）保存的羊膜可重建靜止期眼表疾病的眼表。此法保存的羊膜其上皮細胞已經滅活，移植后羊膜需要受眼的眼表上皮細胞增殖、移行並覆蓋才能完成眼表病灶區的上皮化，同時羊膜組織中所含的各種利於促進眼表組織正常修復的活性成分保存后是否會出現效價衰減或其他變化等不詳。為使某些嚴重眼表疾病在治療上能很快地完成創面的上皮化，陳家祺等1998年用新鮮羊膜移植重建嚴重急性期和瘢痕期的眼表，獲良好效果。

新鮮羊膜的製備（PreparationofFreshAmioticMembrane）

按照陳家祺等的介紹：取HbsAg、衣原體、HIV及梅毒均陰性的健康孕婦剖宮術所獲得的胎盤羊膜。取材操作均在無菌條件下完成。

將羊膜用無菌生理鹽水沖洗乾淨，置於含青霉素5×104U/L、鏈黴素5×104U/L及兩性黴素B 2.5mg/L的生理鹽水中浸泡10min，鈍性剝離羊膜，使其與絨毛膜分離。將羊膜平鋪於粘貼手術巾的紙片上，羊膜上皮面向上。將附有羊膜的紙片修剪成5cm×8cm大小，置於青霉素1×105U/L、鏈黴素1×105U/L的DMEM培養基中，4℃冰箱中保存，備用。取材后12h內使用。

新鮮羊膜移植（TransplantationofFreshAmnioticMembrane）

羊膜是一種具有透明、有一定韌性又無神經、血管和淋巴管的組織，其厚度約0.02～0.05mm；是胚胎來源的組織，抗原性甚微。Akle等報道單純的新鮮羊膜在人體幾乎不引起異物反應，抗原性極低；在志願者的上肢皮下植入7周后仍未見受者血中淋巴細胞殺傷羊膜上皮細胞。陳家祺等用新鮮羊膜植片移植后98.4%不發生溶解和潰爛。儘管羊膜中含有極少量成纖維細胞，但新鮮羊膜移植后並不引起急性免疫排斥反應。他們發現術后3個月植片表面未見呈PAS（periodic acid Schiff staining）陽性的杯狀細胞長入，4個月時方可見PAS陽性細胞。同時可見術后的羊膜表面光滑，熒光素染色陰性。此後羊膜上皮細胞則被結膜上皮細胞平穩更替。

新鮮羊膜因其帶有完整的上皮層，可立即重建眼表上皮，防止膠原組織暴露，阻止膠原的溶解。有活性的羊膜上皮還可分泌細胞因子，如β-轉化生長因子、干擾素等成分，它們可能在眼表重建的過程中發揮積極作用。但是羊膜移植並不能改善已經失代償的角膜內皮。嚴重的眼表燒傷者常伴有眼瞼缺損，使淚膜受到破壞。因此，應先重建眼瞼，否則羊膜植片也會出現血管化甚至溶解。

利用羊膜重建瘢痕期瞼球粘連的眼表，能提供一個含基底膜和基質成分的膠原支架，以使受體的結膜或角膜表面的上皮細胞擴展及移行於其上，達到真正的結膜及角膜眼表的重建，減少新生血管的形成，阻止假性胬肉的長入，甚至可延長角膜緣的存活，是眼表重建的重要進展。

羊膜取材方便，來源廣泛，成本低，不失為一種富有前景的眼表重建生物學材料。

①徹底清除病變組織使鞏膜達到正常界面，角膜的基質基本正常。瞼球粘連要切除增殖的瘢痕組織，恢複眼球的運動功能。否則影響術后羊膜植片的存活，甚至發生溶解。

②創面的燒灼止血，用微型止血器充分止血，否則引起羊膜植片下積血，導致植片延遲癒合甚至溶解、壞死。

③羊膜植片縫合固定，羊膜與結膜及鞏膜和瞼板裸露創面仔細縫合固定至關重要。它不僅有利於羊膜植片的細胞增殖、移行、貼附和生長，還有利於受體正常表型的眼表上皮細胞增殖、移行於羊膜植片之上。