多重PCR

用於檢測病原微生物的分型鑒定

多重PCR(multiplex PCR),又稱多重引物PCR或複合PCR,它是在同一PCR反應體系裡加上二對以上引物,同時擴增出多個核酸片段的PCR反應,其反應原理,反應試劑和操作過程與一般PCR相同。一般PCR僅應用一對引物,通過PCR擴增產生一個核酸片段,主要用於單一致病因子等的鑒定。

應用


多重PCR的主要用於多種病原微生物的同時檢測或鑒定某些病原微生物、某些遺傳病癌基因的分型鑒定。
多種病原微生物的同時檢測或鑒定,是在同一PCR反應管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,進行PCR擴增。可用於同時檢測多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染,可系統組合的有:①肝炎病毒的感染,在同一病人或同一供血者體內,有時存在多種肝炎病毒重疊感染,有時是甲乙丙型肝炎病毒重疊;有時可能是甲乙型肝炎病毒重疊;有時是乙丙型肝炎病毒重疊.②腸道致病性細菌的檢測,如傷寒痢疾霍亂,有時具有較相同的腸道癥狀,有時痢疾霍亂同存一病人並同時發病.③性病的檢測,如梅毒淋病艾滋病的診斷.④戰傷細菌及生物戰劑細菌的檢測,如破傷風桿菌,產氣莢膜桿菌炭疽桿菌鼠疫桿菌等偵檢.⑤需特殊培養的無芽胞厭氧菌,如脆弱類桿菌、艱難桿菌的鑒定等.
某些病原微生物,某些遺傳病或癌基因,型別較多,或突變或缺失存在多個好發部位,多重PCR可提高其檢出率並同時鑒定其型別及突變等可系統應用的有:乙型肝炎病毒的分型;乳頭瘤病毒的分型;單純皰疹病毒的分型;杜氏肌營養不良症的分型及癌基因的檢測等.

特點


多重PCR的特點有:
①高效性
在同一PCR反應管內同時檢出多種病原微生物,或對有多個型別的目的基因進行分型,特別是用一滴血就可檢測多種病原體.
②系統性
多重PCR很適宜於成組病原體的檢測,如肝炎病毒,腸道致病性細菌,性病,無芽胞厭氧菌,戰傷感染細菌及細菌戰劑的同時偵檢.
③經濟簡便性
多種病原體在同一反應管內同時檢出,將大大的節省時間,節省試劑,節約經費開支,為臨床提供更多更準確的診斷信息.