組織晶元

組織晶元

組織晶元(tissue chip),也稱組織微陣列(tissue microarrays),是生物晶元技術的一個重要分支,是將許多不同個體組織標本以規則陣列方式排佈於同一載體(使用載玻片最多)上,進行同一指標的原位組織學研究。該技術自1998年問世以來,以其大規模、高通量、標準化等優點得到大範圍的推廣應用。其最大優勢在於,晶元上的組織樣本實驗條件完全一致,有極好的質量控制。節省時間、節省試劑更是顯而易見的。

基本介紹


組織晶元(tissue chip)又稱組織微陣列(tissue microarray,TMA),是將數十至上千個小組織整齊地排列在一張載玻片上而製成的組織切片,它是繼基因晶元蛋白質晶元之後出現的又一種重要的生物晶元,主要用於研究同一種基因或蛋白質分子在不同細胞或組織中表達的情況。
組織晶元與基因晶元、蛋白質晶元、細胞晶元一起構成了生物晶元系列,使人類第一次能夠有效利用成百上千份組織標本,在基因組、轉錄組蛋白質組三個水平上進行研究,被譽為醫學、生物學領域的一次革命。組織晶元技術可以與其他很多常規技術如免疫組織化學(IHC)、核酸原位雜交(ISH)、熒光原位雜交(FISH)、原位PCR等結合應用,它的應用領域正在不斷地拓展。作為一項新興的生物學研究技術,正以它絕對的優越性展示著自己的潛力。目前,組織晶元主要是向製作技術提高及樣本病歷資料完善倆個方向發展,冰凍組織晶元、超高密度組織晶元都是在原有組織晶元方面有了更大的突破。
組織晶元
組織晶元
TMA構建原理
可以概括為以下四個步驟:
1.選取待研究的組織。現在人們利用組織晶元技術對人體各組織均有研究,包括肝臟,前列腺,心臟,乳房等等,據相關數據顯示,在大腦組織中的應用最多。醫學上常選取一些病變器官進行研究。根據製作方法來分,微陣列主要有石蠟包埋的組織微陣列和冰凍微陣列兩種。
2.經檢測后標記出待研究的區域。組織微陣列的檢測儀主要是高性能顯微鏡熒光顯微鏡或共聚焦熒光顯微鏡。適用的檢測技術有蘇木精—HE染色,免疫組織化學(IHC)染色,原位雜交(ISH),熒光原位雜交(FISH),原位PCR寡核苷酸啟動的原位DNA合成(PRINS)等。
3.使用組織晶元點樣儀將標記好的組織按設計排列在空白蠟塊上。首先要利用打孔機在已經標記好的靶位點上進行打孔,將組織芯轉入蠟塊孔中,重複操作可轉入上千個樣品組織芯。
4.使用切片機對陣列蠟塊進行連續切片即獲得組織晶元。根據製作方法來分,微陣列主要有石蠟包埋的組織微陣列和冰凍微陣列兩種。後者可以克服上述前者的多種缺陷(含醛基的化合物(可能損傷RNA或使目標抗原結構斷裂或破壞抗原——抗體結合位點,另外,石蠟包埋乙醇固定過的組織也無法避免RNA降解)。
組織晶元的出現,與基因晶元配合使用在尋找疾病基因中有很好的互補作用。在腫瘤研究中發揮著重要作用。將基因晶元篩選出的基因作成探針,再將探針與組織晶元中眾多的腫瘤組織進行熒光原位雜交,尋找腫瘤發生發展的相關因素。