副溶血性弧菌

副溶血性弧菌（Vibrio Parahemolyticus,VP）是一種嗜鹽性細菌。副溶血性弧菌食物中毒，是進食含有該菌的食物所致，主要來自海產品，如墨魚、海魚、海蝦、海蟹、海蜇，以及含鹽分較高的腌制食品，如鹹菜、腌肉等。本菌存活能力強，在抹布和砧板上能生存1個月以上，海水中可存活47天。臨床上以急性起病、腹痛、嘔吐、腹瀉及水樣便為主要癥狀。本病多在夏秋季發生於沿海地區，常造成集體發病。由於海鮮空運，內地城市病例也漸增多。

此菌對酸敏感，在普通食醋中5分鐘即可殺死；對熱的抵抗力也較弱。副溶血性弧菌食物中毒多發生在6~10月，海產品大量上市時。中毒食品主要是海產品，其次為鹹菜、熟肉類、禽肉、禽蛋類，約有半數中毒者為食用了腌製品后。中毒原因主要是烹調時未燒熟煮透或熟製品被污染

1950年，以日本大阪府為中心的泉州地方，發生了第二次世界大戰以來最嚴重的集體食物中毒事件。患者出現劇烈腹痛及下痢的癥狀，原因不明。最後統計共有272名患者中毒，其中有20名死亡。發病的患者全部都食用了大阪府的行商所販賣的青魚乾，因此當局立刻對這批魚乾進行分析。然而，在魚乾中並未發現任何已知會導致食物中毒的細菌。因此，當局懷疑有人刻意將毒物混入魚乾中，將這個事件作為刑事案件調查。

由於前一年的1949年才剛發生了並稱為“日本國鐵三大謎案”的松川事件、下山事件及三鷹事件，在這樣的背景下，導致了民眾的恐慌。有人認為，這起集體食物中毒事件是為了使社會混亂而進行的下毒。然而，在魚乾中並未化驗出包括砒霜、亞硝酸鹽等任何有毒化學物質，事件的原因仍然不明。

對此，大阪大學的藤原恆三郎教授從未知感染菌的角度進行了分析。他使用洋菜培養基培養菌種，並進行動物實驗，最後終於從魚乾樣品中分離了一種新種細菌，即腸炎弧菌，找出了食物中毒的原因。由於這種新種細菌是日本人發現的，在當時的日本醫學界掀起了一陣波瀾。當時大多數的日本學者對病菌的概念，都還停留在19世紀的老舊觀念；腸炎弧菌的發現震撼了他們。發現者藤原教授用“粗大且筆直，不斷的活動”（日文：ふとっちょで真っ直ぐで、よく動き回る）來形容這種細菌的外型。此種病菌與當時弧菌屬的代表霍亂弧菌外型差異甚大，因此藤原認為此菌應歸類為巴斯德菌屬，在1951年將其命名為Pasteurella parahaemolyticus並發表。

1955年，日本國立橫濱醫院的醫師滝川巖在腌漬物中發現了食物中毒的病原菌，後來證明與大阪中毒事件的病原菌是相同的。同時，他也發現了這種細菌是嗜鹽性的，因此，將此菌的日文名稱定為病原性好鹽菌（日文：病原性好塩菌）。

1960年，日本東京及千葉縣一帶發生了多起因食用竹莢魚而導致食物中毒的事件，檢驗后發現病原菌是腸炎弧菌，引起了醫學界的注意。對此，厚生省(今厚生勞動省，日本中央政府的衛生主管單位)將腸炎弧菌列為引起食物中毒的重要病原菌之一，進行相關研究。

1963年，日本國立預防衛生研究所（今日本國立傳染病研究所）的福見秀雄和坂崎利一證明了此種細菌應屬於弧菌屬，將學名改定為Vibrio parahaemolyticus，同時也將此種細菌的日文名稱改為腸炎弧菌（日文：腸炎ビブリオ），沿用至今。

腸炎弧菌和霍亂弧菌、創傷弧菌等細菌，都是弧菌科弧菌屬的成員。但是，腸炎弧菌和其他弧菌在一些特徵上，有著相當的不同。腸炎弧菌的長度約是0.3×2µm，其細菌本體不像典型弧菌的彎曲狀，反而是筆直的棒狀（類似桿菌）。此外，腸炎弧菌不能使乳糖及蔗糖發酵，與可以發酵葡萄糖及蔗糖的其他弧菌科細菌不同，這也是區別腸炎弧菌與其他弧菌的方法之一。由於這個特性，腸炎弧菌在tcbs培養基上呈現亮綠色，與一般弧菌的黃色不同。

腸炎弧菌對酸鹼改變敏感，適合生長的pH值約在7.5-8之間，可耐受的酸鹼值為pH5-11。腸炎弧菌與霍亂弧菌相同，都喜歡偏鹼性的環境，但是與霍亂弧菌不同的是，腸炎弧菌必須要在環境有氯化鈉存在的條件下才能增殖（但是如果使用血液洋菜膠培養基時則不需要添加氯化鈉）。適合腸炎弧菌生長的鹽度約在2-3%，超過10%或低於0.5%均不能增殖。

適合腸炎弧菌生長的溫度約在20℃以上，溫度在15℃以下時，生長會受到抑制。腸炎弧菌對熱的耐受力相當低，使用一般的高溫滅菌法即可完成殺菌。因此，因腸炎弧菌而造成食物中毒的患者，通常是肇因於食用未經煮熟的海產。此外，腸炎弧菌菌株在低溫時也容易死亡。腸炎弧菌不耐乾燥(aw=0.948時無法生長)，在乾燥環境中會迅速死亡。

腸炎弧菌的增殖速度很快，在含3%氯化鈉的腦心浸出物培養液中，只要8分鐘左右就會分裂一次。而該菌在海產中的繁殖也相當迅速，例如：30℃時，腸炎弧菌在章魚中從102CFU/g繁殖到107CFU/g僅需六小時。腸炎弧菌的增殖迅速是造成食物中毒的一大原因。

腸炎弧菌擁有一大一小的兩個染色體(分別有3.2×106和1.9×106個鹼基對)，是人類首次發現擁有複數染色體的細菌品種。

副溶血弧菌系弧菌科弧菌屬，革蘭染色陰性，兼性厭氧菌，為多副溶血弧菌形態桿菌或稍彎曲弧菌。本菌嗜鹽畏酸。最適宜的培養基：溫度為30℃—37℃，含鹽2.5%—3%(若鹽濃度低於0.5%則不生長），pH值為8.0—8.5。本菌對酸較敏感，當pH6以下即不能生長，在普通食醋中l一3min即死亡。在固體培養基上菌落常隆起，圓形，表面光滑，濕潤。在3%一3．5%含鹽水中繁殖迅速，每8～9min為一周期。對高溫抵抗力小，50℃ 20 min；65℃ 5 min 或80℃ 1 min 即可被殺死。本菌對常用消毒劑抵抗力很弱，可被低濃度的酚和煤酚皂溶液殺滅。

潛伏期自1小時至4天不等，多數為10小時左右。起病急驟，常有腹痛、腹瀉、嘔吐、失水、畏寒及發熱。腹痛多呈陳發性絞痛，常位於上腹部、臍周或回盲部。腹瀉每日3～20餘次不等，大便性狀多樣，多數為黃水樣或黃糊便。約2%～16%呈典型的血水或洗肉水樣便，部分病人的糞便可為膿血樣副溶血性弧菌或粘液血樣，但很少有里急后重。

由副溶血性弧菌引起的食物中毒一般表現為急發病，潛伏期2~24h，一般為10h發病。主要的癥狀為腹痛，優勢腹痛在臍部附近劇烈。腹痛是本病的特點，多為陣發性絞痛，並有腹瀉、噁心、嘔吐、畏寒發熱，大便似水樣。便中混有黏液或膿血，部分病人有里急后重，重症患者因脫水，使皮膚乾燥及血壓下降造成休克。少數病人可出現意識不清、痙攣、面色蒼白或發紺等現象，若搶救不及時，呈虛脫狀態，可導致死亡。

由於吐瀉，患者常有失水現象，重度失水者可伴聲啞和肌痙攣，個別病人血壓下降、面色蒼白或發紺以至意識不清。發熱一般不如菌痢嚴重，但失水則較菌痢多見。國內報道的副溶血弧菌食物中毒，臨床表現不一，可呈典型、胃腸炎型、菌痢型、中毒性休克型或少見的慢性腸炎型型。本病病程自1～6日不等，可自限，一般恢復較快。

預防措施與其他細菌所致者似。

1、動物性食品應煮熟煮透再吃。

2、隔餐的剩菜食前應充分加熱。

3、防止生熟食物操作時交叉污染。

4、梭子蟹、蟛蜞、海蜇等水產品宜用飽和鹽不浸漬保藏（並可加醋調味殺菌），食前用冷開水反覆沖洗。

分佈極廣，主要分佈在海水和水產品中，我國華東地區沿岸的海水的副溶血性弧菌檢出率為47.5%~66.5%，海產魚蝦的平均帶菌率為45.6%~48.7%，夏季可高達90%以上。除了海產品以外，畜禽肉、鹹菜、鹹蛋、淡水魚等都發現有副溶血性弧菌的存在。

海水是本菌的污染源，海產品、海鹽、帶菌者等都有可能成為傳播本菌的途徑，另外有腸道病史的居民、漁民帶菌率偏高，也是傳染源之一。

預防措施包括：動物性食品應煮熟煮透再吃；隔餐的剩菜食前應充分加熱；防止生熟食物操作時交叉污染；海產品宜用飽和鹽水浸漬保藏（並可加醋調味殺菌），食前用冷開水反覆沖洗。

吞服10萬個以上活菌即可發病，個別可呈敗血症表現。該菌有侵襲作用，其產生的TDH和TRH的抗原性和免疫性相似，皆有溶血活性和腸毒素作用，可引致腸袢腫脹、充血和腸液瀦留，引起腹瀉。 TDH對心臟有特異性心臟毒，可引起心房纖維性顫動、期前收縮或心肌損害。有人發現脲酶病腹瀉有關。患者體質、免疫力不同，臨床表現輕重不一，呈多型性。山區、內陸居民去沿海地區而感染者病情較重，臨床表現典型；沿海地區發病者病情一般較輕。

1、傳染源傳染源為病人，集體發病時往往僅少數病情嚴重者住院，副溶血性弧菌而多數未住院者可能成為傳染源，但由於病人僅在疾病初期排菌較多，其後排菌迅速減少，故不至因病人散布病菌而造成廣泛流行。

2、傳播途徑本病經食物傳播，主要的食物是海產品或鹽腌漬品，常見者為蟹類、烏賊、海蜇、魚、黃泥螺等，其次為蛋品、肉類或蔬菜。進食肉類或蔬菜而致病者，多因食物容器或砧板污染所引起。

3、地區分佈特點：日本及我國沿海地區為副溶血性孤菌食物中毒發病率的高發區。據調查，我國沿海水域、海產品中副溶血性弧菌檢出率較高，尤其是氣溫較高的夏秋季節。但近年來隨著海產食品的市場流通，內地也有副溶血性弧菌食物中毒的散在發生。

4、季節性特點及易感性：7～9月常是副溶血性弧菌食物中毒的高發季節。男女老幼均可患病，但以青壯年為多，病後免疫力不強，可重複感染。

5、食物的種類：主要是海產品，其中以墨魚、帶魚、蝦、蟹最為多見，如墨魚的帶菌率達93%，其次為鹽漬食品。食品中副溶血性弧菌的來源：人群帶菌者對各種食品的直接污染。沿海地區飲食從業人員、健康人群及漁民副溶血性弧菌帶菌率為11.7%左右，有腸道病史者帶菌率可達31.6～88.8%。間接污染，沿海地區炊具的副溶血性弧菌帶菌率為61.9%，被副溶血性弧菌污染的食物，在較高溫度下存放，食用前加熱不徹底或者生吃，或熟製品受到帶菌者、帶菌的生食品、帶菌容器及工具等的污染

用於檢測該菌的PCR方法主要有任意引物PCR(abritrarilyprimedPCR，Ap-PCR)、針對任意引物PCR、多重PCR(muhiplex-PCR)、實時PCR(Real-timePCR)。 1、任意引物PCRMatsumoto等採用任意引物PCR對副溶血性弧菌進行檢測。針對該菌的tdh基因和trh基因一段特異的序列，設計兩條引物，

引物1：5’--GGTGCGGGAA--3’

引物2：5’一GTTTCGCTCC一3’

對1977～1998年所收集的227株副溶血性弧菌進行PCR。通過電泳分析發現，1996~1998年收集的22株血清型為03：K6菌株與1996年以前收集的03：K6血清型菌株基因序列有所不同，為03；K6血清型新出現的變異株，並最初出現在孟加拉國。這是目前最簡單的以基因為基礎的細菌亞分型方法。

2、針對任意引物PCR由於臨床分離株絕大多數含有tdh基因，因此絕大部分研究者都根據tdh設計引物進行特異擴增。1993年，Lee等根據tdh基因設計引物，對36株TDH+株、89株TDH-株以及46株其他弧菌和腸道菌進行PCR檢測。結果顯示，36株TDH+株全部特異擴增出來，其餘菌株都沒有擴增；而檢測靈敏度高，最低檢測量可至40pg DNA，並可直接檢測糞便標本，無需分離培養，方便快速。1999年，Kim等選擇toxR基因序列設計兩對引物，5’--GTCTTCTGACGCAATCGTTG--3’和5’一ATACGAGTGGTTGCTGTCATG一3’，對14株副溶血性弧菌、14株其他弧菌進行PCR。結果顯示，14株副溶血性弧菌都得到一條368bp的特異擴增亮帶，而其他菌株沒有特異擴增。此外，Venkateswaran等選擇gyrB基因設計引物對副溶血性弧菌進行PCR、Cordova等選擇pR72H基因設計引物進行PCR，特異性、靈敏度都很好。

3、多重PCR由於不是全部副溶血性弧菌都含tdh基因或trh基因，所以只針對tdh或trh的單一PCR，有時會漏檢。多重PCR能全方位高效率地檢測該菌。1994年研究人員等針對tdh、trh設計不同的引物對，在同一PCR反應體系內同時擴增tl、tdh、trh。結果顯示，所有的副溶血性弧菌都擴增出tl基因，tl基因是該菌特異的；54％的副溶血性弧菌擴增出tdh基因；只有38．73％的副溶血性弧菌擴增出trh基因；該法靈敏度很高。與其他常規生化方法相比，多重PCR更快速，僅8h就能完成檢測，結果更為準確、可靠，而且還可改進成定量競爭PCR，對標本中靶序列進行定量。

4、實時PCR常規PCR檢測，需要從反應體系中吸取產物做電泳或Southern雜交等試驗進行鑒定，轉移過程中易污染，造成假陽性，而且耗費時間。1996年，Tyagi開創了一種實時PCR(Real-time PCR)。實時PCR是在PCR反應體系中加入標記有報告基團和淬滅基團的線性Taqman探針或莖環型熒光分子信標探針，在基因擴增過程中，與產物雜交，此時，報告基團和淬滅基團分開，根據能量共振轉移現象，報告基團發出熒光而被檢測。這種方法操作簡單，閉管檢測，減少污染，靈敏度高，並且可以在PCR結束或PCR過程進行同步定性或定量檢測，面且可以進行臨床大規模快速檢測。

1、支持及對症治療 脫水者需輸入生理鹽水及葡萄鹽水，或口服補液鹽，以糾正失水。血壓下降者，除被動補充血容量，糾正酸中毒等外，可酌用血管活性葯。

2、抗菌藥物 輕度患者可不用抗菌藥物，較重者可給復方新諾明或慶大黴素、阿米卡星和諾氟沙星等喹諾酮類抗菌藥物【上述抗生素類可能使細菌產生耐藥性，使用須謹慎】。

3、發生中毒后要立即停止食用可疑中毒食品，併到醫院醫治。副溶血性弧菌對氯黴素敏感。嘔吐、腹瀉嚴重者要補充水和鹽。

加工海產品的案板上副溶血弧菌的檢出率為87.9%。因此，對加工海產品的器具必須嚴格清洗、消毒。海產品一定要燒熟煮透，加工過程中生熟用具要分開。烹調和調製海產品拼盤時可加適量食醋。食品燒熟至食用的放置時間不要超過4個小時。主要病理變化為空腸及迴腸有輕度糜爛，胃粘膜炎、內臟（肝、脾、肺）淤血等。

輔助檢查

1、白細胞計數總數多在1萬mm3以上，中性粒細胞偏高。

2、便檢查鏡檢可見白細胞或膿細胞，常伴有紅細胞，易被誤診為菌痢。糞便培養可檢出副溶血弧菌，絕大多數迅速轉陰，僅少數持續陽性2～4天。

2020年7月15日，廣東衛健委通報了廣州市6月的1起副溶血性弧菌食物中毒事件，發病48例，無死亡。