生物過程
漢斯出版社發行的學術期刊
本刊支持思想創新、學術創新,倡導科學,繁榮學術,集學術性、思想性為一體,旨在為了給世界範圍內的科學家、學者、科研人員提供一個傳播,分享和討論生物過程領域內不同方向問題與發展的交流平台。
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主編
副主編
編委會
梅樂和 教授 浙江大學 (Prof. Lehe Mei, Zhejiang University)
彭永臻 教授 北京工業大學 (Prof. Yongzhen Peng, Beijing University of Technology)
王永華 教授 華南理工大學 (Prof. Yonghua Wang, South China University of Technology)
王劍文 教授 蘇州大學 (Prof. Jianwen Wang, Soochow University)
周新華 研究員 嘉和生物葯業有限公司、入選者 (Dr. Joe Zhou, Genor Biopharma Co. Ltd.)
文章
• 樹鼩原代肝細胞分離培養條件優化
AUTHOR(S):
KEYWORDS:
Tree Shrews; Primary Hepatocytes Were Isolated and Cultured; Optimization
ABSTRACT:
目的:通過優化樹鼩原代肝細胞的分離及體外培養條件,獲得能夠在體外進行長期穩定培養的樹鼩原代肝細胞。方法:優化肝臟灌流液、酶消化液及細胞離心速度等原代肝細胞分離條件,培養細胞密度和培養基配方等原代肝細胞培養條件,用台盼藍染色細胞計數法、MTT檢測法及EDU標記法評價所分離、培養樹鼩原代肝細胞的數量、活力及生長狀態。結果:添加葡萄糖的D-Hank’s液作為灌流液,含有0.005 mol/L CaCl2及12 × 104 units/L膠原酶IV的D-Hank’s液作為消化液,37℃消化15~20分鐘,所獲得細胞梯度離心洗滌三次,可獲得最高得率及活力的原代肝細胞。在Williams’ ME基礎培養基中添加生長因子(10 ng/ml),葡萄糖(0.25%)、ITS-X(1 × multiple)、1%青鏈黴素及2% DMSO時可以維持樹鼩原代肝細胞體外穩定增殖生長達42天。結論:樹鼩原代肝細胞分離與體外培養條件的優化,可大大提高細胞得率,延長細胞穩定增殖生長時間,有助於以樹鼩為模型研究肝細胞生理代謝特性及嗜肝病毒感染機制。