抗體檢測

在免疫應答中，細胞免疫和體液免疫是兩個密切相關、互為調節的生理過程，對這兩種免疫反應都有許多檢測方法，但迄今為止，在臨床檢驗工作中，以體液免疫反應中的特異性抗體的檢測應用最廣泛。

現在抗體檢測的方法眾多，除傳統的沉澱反應，凝集試驗，補體結合試驗外，標記免疫測定(如酶聯免疫測定、放射免疫測定、熒光免疫測定、發光免疫測定等)已成為主要的免疫測定技術，免疫印跡法也發揮了明顯的作用，一些快速測定法(如快速斑點免疫結合試驗)也被廣泛使用。

首先抗體檢測用於診斷時，要考慮到患者所在地區該疾病的發病情況及與該疾病密切相關的情況，如正常人血清中抗體的水平，這一點在病原微生物感染的疾病中尤為重要。有些感染性疾病(例如病毒感染性疾病)，往往採用“雙份血清法”，根據發病初期及患病後某個時期抗體增長的情況進行診斷。

眾所周知，許多感性疾病初期，機體產生的是IgM型抗體，此後才產生IgG型抗體，因此在條件許可的情況下，有合格的試劑盒供應時，建議儘可能在患病初期進行IgM型抗體檢測，有助於早期診斷。

對許多疾病的預后及機體免疫狀況的觀察，也並非特異性抗體檢測可以完全替代的。另一類情況，對某些疾病的診斷，檢測抗原的意義並不大，而依靠的是對這些抗原所引起機體產生抗體的檢測，而這些抗體是致病因素之一，也是臨床診斷的重要依據。自身免疫病中自身抗體的檢出就是最好的例子之一。結締組織病與自身抗體的關係，可能是研究最多的一類疾病。事實上，其他如呼吸、消化、泌尿、心血管、血液、內分泌、神經等系統的一些疾病都與自身免疫有關，都可檢測到相應的自身抗體，如胰島素依賴型糖尿病與胰島細胞抗體、橋本氏甲狀腺炎與甲狀腺微粒體抗體、重症肌無力症與乙醯膽鹼受體抗體等等的關係已得到公認；還有，不孕症和衰老與自身抗體關係的研究也正在不斷深入；自身受體抗體的研究，亦具有廣泛的應用前景。由此可見，自身抗體的檢測對於許多疾病的診斷或闡明致病機理都有重要價值。隨著研究的深入，還會有更多疾病與自身免疫的關係將隨著新的自身抗體的發現而得以明確。本期刊登的張學軍等和吳慶軍等的論著文章就反映了這方面工作的一些進展。可以設想，自身抗體的檢測將成為大家關注的課題及臨床免疫學檢驗中一個重要的組成部分。除自身免疫病外，在諸如免疫缺陷病、免疫增生性疾病、及某些型別的超敏反應疾病的診斷中，需檢測的也是各類免疫球蛋白，而不是抗原。

一般來說，診斷感染性疾病，如能從標本中直接檢測到病原體是最理想的，但由於某些病原體生長所需條件高，生長時間長、檢出的陽性率低，給臨床診斷帶來一定困難。特異性抗體的檢出在一定程度上可彌補以上的不足。近年來逐步發展起來的用免疫學方法測定標本中的病原抗原，或用分子生物學技術測定感染因子，無疑對感染性疾病的早期診斷是一個巨大的進步。儘管如此，也還不能完全代替特異性抗體的檢測，如人類免疫缺陷病毒(HIV)，測定其抗體仍是診斷艾滋病的重要依據。

為了保證試驗的特異性和敏感性，無論是顆粒性抗原、組織提取物、多肽抗原、重組抗原都必須純化，否則容易產生非特異性反應。在應用標記免疫分析中，可引起本底數值的增高，極大地影響試驗的準確性。在檢測自身抗體時，許多抗原是用組織提取物，更應注意抗原的純化問題。由於不同組織、器官間可存在相同抗原成分，使得同一自身免疫病，可檢出幾種不同自身抗體，同一自身抗體又可出現在不同自身免疫病中，這就影響了檢驗的特異性。因此提示我們，關於這方面特異性抗原的提取、純化和合成，還有許多工作要做，是一項任重道遠的任務。還必須指出，無論檢測哪一種抗體，所用抗原的片段或成分的不同，都可影響其特異性及敏感性。因此採用一種新抗原時，需要進行嚴格對照，方可確定其應用價值。

必須明確，不同的檢測方法，靈敏度、準確性、重複性並不完全相同，加上試劑盒質量不一，都影響到試驗結果。在應用或建立一個方法時，檢測系統中所有成分的濃度必須經過嚴格滴定，選擇最恰當的濃度範圍。例如酶聯免疫吸附試驗(ELISA)，抗原及酶結合物濃度低，最後吸光度值太小，易出現假陰性，如濃度太高，吸光度值偏大，甚至移到標準曲線的平台，即處於不敏感的範圍便會明顯影響結果的可靠性。

抗體有保護性抗體，非保護性抗體之分，有些抗體的水平達到高峰后旋即下降乃至消失，有些抗體可長期存在直至終身。如乙肝核心抗體(抗-HBc)，陽性率可高達70%左右，臨床醫生常因此產生困惑。其實這是抗-HBc的總抗體，可能長期存在。如其滴度低，即為既往感染過乙肝，有流行病學意義，高滴度才有臨床診斷意義。再如自身抗體測定中，少數正常人也存在有少量自身抗體，它不僅對機體無害，而且能幫助機體清除衰老及變質的細胞對機體有利。另外，在臨床診斷中，須針對不同發病機理檢測相應抗體，如I型超敏反應應檢測IgE，而在Ⅱ型超敏反應主要測IgG、IgM型抗體，又如鼻咽癌患者查的是EB病毒殼膜抗原-IgA(IgA/VCA抗體)。另外抗體測定和其他檢驗一樣，存在著假陽性、假陰性的問題，可能由於方法學的不完善引起，或者由於機體反應性的不同所致，在解釋結果時務必注意。