革蘭陰性菌

細菌中的一大類

革蘭陰性菌是細菌中的一大類。人們為對細菌進行分類,常用一種染色方法,即先將細菌塗在玻片上,用結晶紫初染,加入古典液後用酒精脫色,最後用稀復紅復染。經一系列處理后,菌體呈現紫色的為革蘭氏陽性菌,如乳酸桿菌破傷風桿菌鏈球菌葡萄球菌等,均屬這種類型;反之,有些細菌經以上的處理菌體呈紅色為革蘭氏陰性菌,如痢疾桿菌、腦膜炎雙球菌等。這種方法最初是丹麥醫師革蘭首先發現和使用的,所以得此名。

簡介


革蘭陰性菌泛指革蘭氏染色反應呈紅色的細菌。在革蘭氏染色實驗中,首先添加了龍膽紫(crystal violet),再添入另一種復染染料,通常使用番紅(safranin)或品紅(fuchsine),從而將所有的革蘭氏陰性菌染成紅色或粉色。通過這種測試我們可以區分兩種細胞壁結構不同的細菌。革蘭氏陽性菌在反應后的除色溶液中將呈現龍膽紫的顏色。
無論陽性菌還是陰性菌都有桿菌和球菌。葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌是臨床最為常見的病原菌,葡萄球菌屬於革蘭陽性球菌,大腸桿菌屬於革蘭陰性菌中的腸桿菌科,除大腸桿菌以外,臨床較常見的腸桿菌科細菌還有變形桿菌沙門氏菌克雷白桿菌;綠膿桿菌屬於假單胞菌,為非發酵菌,是臨床常見的較耐葯革蘭陰性桿菌。

特徵


革蘭陰性桿菌
有鞭毛
有菌毛和微莢膜,不形成芽胞
專性需氧菌
嗜肺軍團菌引起軍團菌病,多流行於夏秋季節,治療不當,死亡率可達15%。

革蘭氏染色反應


革蘭陰性菌
革蘭陰性菌
革蘭氏染色反應是細菌分類和鑒定的重要性狀。它是1884年由丹麥醫師Gram創立的。革蘭氏染色法(Gram stain)不僅能觀察到細菌的形態而且還可將所有細菌區分為兩大類:染色反應呈藍紫色的稱為革蘭氏陽性細菌,用G+表示;染色反應呈紅色(復染顏色)的稱為革蘭氏陰性細菌,用G-表示。
細菌對於革蘭氏染色的不同反應,是由於它們細胞壁的成分和結構不同而造成的。革蘭氏陽性細菌的細胞壁主要是由肽聚糖形成的網狀結構組成的,在染色過程中,當用乙醇處理時,由於脫水而引起網狀結構中的孔徑變小,通透性降低,使結晶紫-碘複合物被保留在細胞內而不易脫色,因此,呈現藍紫色;革蘭氏陰性細菌的細胞壁中肽聚糖含量低,沒有磷壁酸,其細胞壁中游肽橋、肽尾和雙糖形成的網狀結構較為疏鬆,而脂類物質含量高,當用乙醇處理時,脂類物質溶解,細胞壁的通透性增加,使結晶紫-碘複合物易被乙醇抽出而脫色,然後又被染上了復染液(番紅)的顏色,因此呈現紅色。

常見種類


革蘭氏陽性細菌:金黃葡萄球菌、鏈球菌、腸球菌、利斯特菌等
革蘭氏陰性桿菌:克雷白桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、流感嗜血桿菌、沙門氏菌等

治療方法


主要是各種抗生素。但由於日益嚴重的抗藥性,許多抗生素已失去往日的輝煌,如青霉素等。而且對於革蘭陰性菌,如使用抗生素不當,會加重病情的發展。因為革蘭陰性菌的多聚糖外還有一層外膜,外膜由特異多糖,核心多糖和脂類A組成。而脂類A是內毒素的毒性部分和主要成分,若亂用抗生素,會破壞特異多糖和核心多糖,使得脂類A暴露,釋放內毒素,加重病情。不少醫生也在亂用抗生素,患者應當去正規醫院接受治療與用藥。
革蘭陰性菌
革蘭陰性菌

討論


重症肺炎患者因常伴有基礎疾病,往往預后不佳,死亡率高,而抗感染對其治療至關重要,本次研究發現,重症肺炎的主要致病菌是革蘭陰性菌,佔74.8%,其中銅綠假單胞菌位於首位,表2中可看到該菌除頭孢吡肟(25.0%),哌拉西林-三唑巴坦(27.8%),頭孢他啶(27.8%),亞胺培南(30.5%),環丙沙星(33.3%)以外,對其他各葯均耐葯嚴重,銅綠假單胞菌可通過多種機制產生耐葯,包括與酶的修飾作用,膜孔蛋白丟失,靶位改變以及反泵作用,還認為此菌表面可產生生物被膜,而大環內酯類藥物可抑制中的藻酸鹽的合成,從而使抗生素對銅綠假單胞菌的滲透力增強。而氟喹諾酮類被認為是對生物被膜滲透性最佳的抗生素。值得關注的是,銅綠假單胞菌可以長期處於帶菌狀態,在對重症肺炎的診治過程中,曾有2例氣管插管患者,氣管吸出痰標本以及肺灌洗液多次培養均為銅綠假單胞菌,但按照其葯敏實驗結果,規則使用抗銅綠假單胞菌藥物治療后,患者臨床癥狀無改善,複查痰培養仍為銅綠假單胞菌,故認為,即使患者多次培養均為銅綠假單胞菌,但治療者仍應結合患者的臨床情況、痰液的變化綜合判斷究竟此菌是帶菌狀態,還是感染狀態,對降低銅綠假單胞菌對各種抗生素的耐葯率也有很大意義。
鮑曼不動桿菌共分離出16株,除亞胺培南和阿米卡星以外,對其他抗生素的耐葯率高達43.8%~93.8%,這與其耐葯機制複雜多變有關,此外,因此菌生命力很強,容易造成感染爆發流行。治療上首選亞胺培南,必要時可聯用氨基糖甙類藥物。而酶抑製劑舒巴坦不動桿菌有獨特的抗菌活性,故治療上可選用含舒巴坦的複合製劑。
本次研究發現,大腸埃希菌,腸桿菌屬,肺炎克雷伯菌的ESBLs的檢出率最高,分別是55.6%,40.0%和25.0%,對這三種細菌抗菌活性最高的是亞胺培南,哌拉西林—三唑巴坦和頭孢吡肟,對產ESBLs菌而言,不同的ESBLs對不同的三代頭孢菌素具有不同的活性,某些ESBLs能賦予細菌對所有B-內醯胺類抗生素高水平的耐葯,而僅輕微提高耐藥性,而頭孢噻肟和頭孢他啶則是識別不同ESBLs的最佳底物。亞胺培南是治ESBLs菌的首選葯。
嗜麥芽窄食單胞菌也是重症肺炎較常見的多重耐葯致病菌,本次監測,除對左氧氟沙星(33.3%)外,對其他抗生素均耐葯嚴重,因其外膜通透性低,且可誘導B-內醯胺類L2、L1存在,所以對B-內醯胺類抗生素,氨基糖甙類,碳青黴烯類均高度耐葯,故該菌的感染已成為臨床治療的難題,研究發現,復方磺胺甲惡唑和替卡西林-棒酸是治療嗜麥芽窄食單胞菌感染最為有效的藥物。
近年來,因廣譜抗生素的廣泛使用,使革蘭陰性菌如銅綠假單胞菌,肺炎克雷伯菌和鮑曼不動桿菌的感染日益增加,這些致病菌的耐葯嚴重,則是重症肺炎治療困難,死亡率高的主要原因之一。在重症肺炎治療上,宜採用抗生素降階梯療法策略,抗菌譜應儘可能覆蓋所有致病菌,可經驗性優先選用亞胺培南、哌拉西林—三唑巴坦和頭孢吡肟,加酶抑製劑的第三代頭孢菌素以及新喹諾酮類,獲得細菌學結果后,再根據葯敏結果和臨床情況,改用針對性強的抗生素及降階梯治療。同時必須注意對ESBLs的檢測,加強監控和管理,防止ESBLs菌株的擴散和爆發流行。