尿沉渣

原尿經過離心后形成的沉渣

尿沉渣是尿液中的有形狀成分,是原尿經過離心后形成的沉渣,也是尿液有形成分質和量的組合。尿沉渣包括細胞、管型、結晶、細菌、精子等各種有形成分。

檢查指標


尿沉渣的檢查指標通常包括對、管型檢測。
尿沉渣檢查注意事項:
患者采尿后應該迅速地進行鏡檢,否則放置時間過長長,如果是低張尿可出現溶血;如果是高張尿有可能現脫水而使紅細胞形狀發生變化;如果是鹼性尿可使血細胞成分和管型崩壞,影響檢驗的準確性。

正常值


紅細胞<3個/高倍視野,白細胞<5個/高倍視野。所謂每高倍視野是指顯微鏡擴大400倍時的每一個視野。管型可根據橫徑大小分為(1)狹窄型(為1-2個紅細胞直徑大小),(2)中等寬度型(3-4個紅細胞直徑大小),(3)寬型(5個紅細胞直徑大小)。寬型管型提示腎實質有嚴重損害。在尿沉渣中同時還可以見到少數透明管型及少數扁平上皮細胞、尿酸鹽、磷酸鹽草酸鹽等結晶。

重要性


尿沉渣
尿沉渣
探討尿液分析儀與尿沉渣鏡檢在檢測白細胞和紅細胞方面的不同。方法 對85例尿液分析儀測定全部為陰性及281例分析儀測定隱血(++)~(++++)的尿液標本,做尿沉渣鏡檢。結果 85例尿液分析儀測定全部為陰性的標本鏡檢可見3~10/HP白細胞10.6%及1~3/HP紅細胞4.7%;對281例分析儀測定隱血(++)~(++++)的尿液標本檢測發現,隱血陽性級別與鏡檢紅細胞不同步,1.4%的隱血陽性標本鏡檢實為酵母菌。結論 尿液分析儀與尿沉渣鏡檢聯合檢測,才能提高尿液檢驗的質量。
[關鍵詞] 尿液分析儀;尿沉渣鏡檢
隨著尿液分析儀的普及使用,尿液分析既簡單又快速,為臨床診斷提供了方便,但在實際應用中可能會出現許多新的問題。為此,筆者對尿十項分析儀測定中結果全為陰性和隱血(++)~(++++)這兩種情況的標本用顯微鏡作沉渣鏡檢,並將結果加以比較報告如下。
1 材料與方法
1.1 標-本 我院2006年6月送檢的住院患者晨尿標本,其中85例尿液分析儀測定全部為陰性及281例分析儀測定隱血(++)~(++++)的尿液標本,收到標本2 h內檢測完畢。
1.2 儀器與試紙 德國寶靈曼公司生產的Miditron尿十項分析儀及配套生產的Combur 10 Test M尿十項試紙條。
1.3 檢測方法 按儀器的操作規程進行,之後,取混勻尿液10 ml,以1500 r/min離心5 min,去上清液,留沉渣0.2 ml,輕搖離心管,使尿沉渣有形成分充分混勻,用10×10鏡頭,觀察其中有形成分的全貌及管型,再用10×40鏡頭觀察鑒定細胞成分和計算數量,連續觀察10個不同視野,取所見的最低和最高值,記錄結果[1]。
2 結果
85例尿液分析儀測定全部為陰性的標本尿沉渣鏡檢結果
3 討論
表1中鏡檢發現有白細胞的患者,大多為腎炎、腎病綜合征、上呼吸道感染和術後患者。用分析儀法只能測定中性粒細胞中的酯酶,不與淋巴細胞反應。以上病例中,不能排除由於病因引起的淋巴細胞尿及尿中含有大劑量抗生素等藥物產生的影響。大劑量青霉素滴注的患者,尿液干化學法測定蛋白會產生假陰性結果。此外,干化學法測定蛋白對尿液中不同類型蛋白質檢測的敏感性不同,其測量球蛋白的敏感性僅是白蛋白的1/100~1/50,這也是造成尿蛋白測定假陰性的原因之一[2]。因此,對於腎病患者,特別是在疾病發展過程中需要系統觀察蛋白含量的病例,最好結合使用磺柳酸法(或加熱醋酸法)進行實驗。對紅細胞鏡檢為陽性的患者,考慮為臨床維生素C用藥干擾隱血所致,因維生素C具有較強的還原性,對尿液成分的測定產生競爭性抑制反應,使結果減弱或出現假陰性。
通過對錶2的分析,筆者認為:(1)標本存放時間過長,因為住院患者早晨統一送檢,可能標本放置太久,引起紅細胞溶解,所以出現隱血(+++)~(++++)而鏡檢紅細胞並不多的現象。(2)紅細胞在腎臟或泌尿道經擠壓等遇到破壞,或尿比重過低,尿pH值偏高,造成紅細胞破壞,釋放出血紅蛋白出現在尿中,而鏡下不見或少見紅細胞。這時,應對患者做進一步的檢查。(3)收集標本用的容器進行強氧化殺菌消毒后殘餘物能催化過氧化氫氧化鄰甲苯胺而使結果受影響。(4)尿路感染時,由於某些細菌產生過氧化物酶活性物質,或者本身為了代謝的需要,在繁殖過程中合成觸酶、過氧化物酶超氧化物歧化酶,這些物質使紅細胞測定產生假陽性結果[3]。(5)大量酵母菌出現時,可干擾儀器,使儀器無法辨認,因此將其誤認為紅細胞及使紅細胞分析出現假陽性現象。
鏡檢時應注意紅細胞形態的改變,有助於出血部位的定位診斷。上泌尿道出血時,紅細胞形態往往縮小、變形或只剩下胞影,有時要與酵母菌加以區別,必要時可做瑞氏染色。腎小球出血者,80%以上的紅細胞有多形性改變,如紅細胞膜出現粗刺、細刺、帶泡、穿孔、環狀等改變。腎小球除外出血時,紅細胞形態多正常或僅有中空現象。
4 小結
從以上結果可以看出,許多常用藥物及外在因素對尿檢結果存在一定的影響。此外,嚴格操作規程、不使用過期的或已被污染的試劑條、尿液新鮮、試劑條於陰涼乾燥處保存等,都是提高檢測結果準確性的重要環節。尿液化學分析儀檢測僅是一個篩選手段,尿沉渣鏡檢可發現和糾正尿分析儀檢測報告中的誤差,在平時工作中應將所有標本都作尿沉鏡檢的必要性。尿液分析儀檢測應與手工操作相結合,提高尿液檢驗的質量。
[參考文獻]
1 葉應嫵,王毓三。全國臨床檢驗操作規程,第2版。南京:東南大學出版社,1997,133.
2 叢玉隆,王淑娟。今日臨床檢驗學.北京:中國科學技術出版社,1997,236-239.
3 馬駿龍,叢玉隆。菌尿對尿液分析儀測定尿紅細胞的影響。中華醫學檢驗雜誌,1999,22(4):206.

分析


尿沉渣中紅細胞:紅細胞超標(尿沉渣紅細胞>3個/高倍視野)時可提示腎臟和泌尿系統的多種疾病,包括腎外傷。也可見於劇烈運動后,外傷性的導尿后、結石的通過、或月經的污染。血尿可見於腎孟腎炎、腎結石、腎腫瘤和泌尿道的其它惡變、也可見於出血性疾病。尿沉渣中白細胞:大量白細胞(白細胞>5個/高倍視野)的存在提示泌尿道感染。膿尿還可見於急性腎小球腎炎
尿沉渣中上皮細胞:如出現大量的腎性上皮細胞可提示活動性的腎小管變性。這些細胞常見於急性壞死和腎乳頭炎壞死期病人尿沉渣中。
尿沉渣中管型可分紅細胞管型、白細胞管型顆粒管型和透明管型。尿沉渣中紅細胞管型指標異常提示急性腎小球腎炎、腎梗塞、膠原組織疾病、或亞急性細菌性心內膜炎所致的腎損害的唯一指證;而尿沉渣中白細胞管型指標異常可見於急性腎小球腎炎腎綜合症、或腎盂腎炎的患者尿液中;顆粒管型分為"粗顆粒"和"細顆粒",在正常尿液中可見到一個顆粒管型。大多數情況下,顆粒管型提示腎盂腎炎,還可見於慢性腎臟疾病;透明管型的形成與腎小球毛細管的損害有關,此損害會使蛋白質通過腎小球濾過而漏出。這種腎臟損害可以是永久性的也可是暫時性的,有可能是由高熱、體位的影響(軀位、立位)、情緒壓抑、或劇烈運動所致。

臨床意義


1.紅細胞大於3個/高倍鏡視野即為鏡下血尿。增多見於泌尿系統的炎症、腫瘤、結石性等疾病。如以形態異常的紅細胞為主,提示腎性疾病;但也見於全身性疾病,如特發性血小板減少性紫癜、血友病、再生障礙性貧血系統性紅斑狼瘡等,以及泌尿系統鄰近器官的疾病,如前列腺炎、盆腔炎等。攝入別瞟醇、抗凝劑環磷醯胺青霉素、磺胺類葯等藥物也可有紅細胞增多
2.白細胞大於5個/高倍鏡視野即為鏡下膿尿。增多主要見於泌尿系統的感染,尤其是急性腎盂腎炎、泌尿道結石、膀胱炎等;也可見於泌尿系統臨近器官疾病,如前列腺炎、陰道炎、盆腔炎等。
3.上皮細胞腎實質損害時,如腎小球腎炎,可見較多的腎小管上皮細胞;泌尿系統炎症時,可見較多鱗狀上皮細胞、移行上皮細胞。
4.管型出現管型表示腎實質損害,見於急性或慢性腎小球腎炎、腎功能衰竭等。出現紅細胞管型,特別有助於證明腎性出血。出現白細胞管型,特別有助於腎盂腎炎與膀胱炎鑒別,後者為陰性。顆粒管型、蠟樣管型的出現進一步表明腎疾病的惡化或進入晚期。脂肪管型多見於腎病綜合征、慢性腎炎等。如攝入卡那黴素、兩性黴素B、頭孢菌素等藥物,尿液中可出現管型。
5.結晶生理性結晶常見的有草酸鈣、尿酸、磷酸銨鎂結晶。病理性結晶主要有胱氨酸結晶、亮氨酸結晶、酪氨酸結晶、膽固醇結晶、放射造影劑結晶、磺胺類藥物結晶、阿司匹林結晶、磺基水楊酸結晶等。

檢查方法


製片鏡檢

直接鏡檢法
將尿液充分混勻,取其中1滴尿直接塗於載玻片上,依據各種有形成分的形態特點,用顯微鏡觀察作出報告。
玻片畫框法
用標定好的滴管加混勻尿2滴塗滿蠟筆畫好的25.2 mm×25.2 mm框內,靜止3 min后累計20個高倍視野細胞數,結果以每微升細胞數報告。細胞數/μl=T×1/20×A/B×1/V。式中T=細胞累計數,20=所觀察的視野數,A=標本分佈面積,B=高倍視野面積=(高倍視野直徑/2)2.π,V=標本用量(μl),高倍視野直徑=目鏡中光欄直徑/目鏡放大倍數,光欄直徑可用千分尺測出。
自然沉降法
將尿液在室溫下放置一定時間(15 min~30 min)后,移去上層的尿液,保留底層大約0.2 mL左右,然後混勻,取其中1滴沉澱於載玻片上,鏡檢同直接鏡檢法。
離心沉澱法
尿液10 ml離心5 min,相對離心力(RCF)為400,棄上清留沉渣尿量0.2 ml混勻,吸取20 μl,滴在玻片上用18 mm×18 mm蓋片覆蓋,先用10×10低倍鏡觀察全片,再用10×40高倍鏡仔細觀察,檢查細胞至少10個視野,檢查管型至少20個低倍視野,報告以高倍視野所見最低至最高數字錶示。建議國內逐步以每微升細胞數報告。
染色法
包括濕潤染色法及特定成分染色法。
相差顯微鏡法
相差顯微鏡又稱相襯顯微鏡,是以光的衍射和干涉現象照射標本,產生明暗不同的反差識別,有助於增強透明與半透明的有形成分的輪廓,尤其是透明管型、不典型紅細胞、血小板的辨別。
干涉顯微鏡法
在不同位相時,當兩種相同顏色的光波相遇時,其亮度發生增強或減弱的變化,從而提高物體的清晰度,可觀察到細胞或管型的三維空間結構。
偏振光顯微鏡法 利用光的偏振特性對光有雙折射性的物體進行鑒別,可觀察活細胞的內含物、神經纖維、植物纖維的結構細節和動物肌肉纖維等。可分析變性過程,觀察到細胞的死活:正常細胞對光偏振呈左旋,腫瘤細胞多數呈右旋,可顯示鹽類結晶在自然光下見不到的精細結構。
透射電鏡法
利用電子束作為“照明波源”可明顯提高解析度,將尿沉渣標本切成超薄片在電子顯微鏡下觀察,可準確分辨出細菌管型、白色念珠菌管型、血小板管型、粗顆粒管型和細顆粒管型等。

定量計數

取一定量(10 ml)尿液置特製的離心管內,在規定離心時間和轉速的條件下離心沉澱,移去上清尿液,保留一定量的尿沉澱物,取1滴滴人計數板內,在顯微鏡下計數,然後換算成一定體積(1/μl)內尿有形成分的含量。
Li?Ucc型尿沉渣計數板[5] 計算室為正方形邊長9 mm,池深0.125 mm,混勻尿滴入池內計數規定區結果除以5,細胞少時計數全室結果除以10,即為每微升細胞數。
牛鮑計數板法 將混勻尿充池,計數9大格細胞數×10÷9,即為每微升細胞數。
FR定量板法[6] 混勻尿10 ml於Biostd離心管內,經1 500 r/min 離心5 min,傾去上清餘0.25 ml沉渣即留在管底縮小區內,將沉渣混勻滴入FR板內,計數10大格即得每微升細胞數。每板10人份一次性使用,保濕,細胞形態及分佈穩定。

干化學法

將試劑包含在纖維素中作為反應部分粘附在塑料支持片上乾燥而成試紙帶,以鏡檢為標準半定量檢測尿中成分。Schumann認為干化學檢查陰性再鏡檢是浪費時間,周仲玲等認為即使干化學檢查全部陰性,而滴蟲、黴菌及病理性結晶等仍需鏡檢。1996年的推薦方法中確定,干化學檢驗只有符合下列四項要求才可以不作鏡檢:尿白細胞結果為陰性;紅細胞結果陰性;尿蛋白為陰性;亞硝酸鹽為陰性。來源於腎科標本不適合干化學篩選,應一律顯微鏡檢查。叢玉隆等6 349例研究結果:干化學分析結果同時存在紅細胞陰性、白細胞陰性、蛋白質陰性時免於鏡檢對病理性管型檢出率影響不大。

影像分析

尿沉渣分析自動化的研究由來己久,但難度較大。直到1986年才由美國國際遙控攝像系統有限公司研製生產了世界上第一台高速攝像機式的尿沉渣自動分析儀。
目前,尿沉渣分析儀主要有兩大類:基於尿沉渣鏡檢影像分析原理;基於尿沉渣流式細胞術和電阻抗檢測原理。
影像式尿沉渣(或稱“工作站”)其檢測原理與人工顯微鏡檢查原理基本相似,都是直觀地觀察有形成分的形態,但它須經過嚴格的定時、定速離心,而後留取定量的尿沉渣,由配套動力裝置將其轉移至顯微鏡載物台上刻有標尺的流動樣品池內,通過頻閃光源燈、相聚光鏡、彩色攝像機等,在電腦顯示屏上得到清晰的尿沉渣畫面,再由操作者在屏幕上統計出各種有形成分的數目,由計算機自動換算成每微升單位的數據。同普通光學顯微鏡方法相比,其分析標準定量、視野清晰、速度快捷、準確度高。
1983年,美國國際遙控影像系統有限公司(International Remote imaging systems Co,Ltd)研製生產了世界上第一台“Yollow IRlS”高速攝影機式的尿沉渣自動分析儀,簡稱Y—1尿自動分析儀。這種儀器是將標本的粒子影像展示在計算機的屏幕上,由檢驗人員加以鑒別。
1996年,德國寶靈曼推出圖像式尿沉渣自動分析儀,採用兩個快速|檢驗地帶網|移動的CCD攝像頭對樣品計數池進行掃描。
1997年,美國戴西斯公司(DiaSys R/S Corporation)推出流動池式尿沉渣定量分析工作站,1999年引入中國,由於解決了尿沉渣鏡檢中精確定量問題,該產品引起了國內檢驗界的關注。

流式分析

1995年,Sysmex研製出經典機型 UF-100,被譽為"尿分析史的革命"。UF-100每小時可分析約100個樣本,大大提高了提高了實驗室的自動化水平和工作效率。
在UF-100全自動尿沉渣分析檢測分析中,應用流式細胞和電阻抗分析的原理:尿液中細胞等經熒光色素染色后,在鞘流液的作用下,形成單個、縱列細胞流,通過氬激光檢測區,儀器檢測熒光、散射光和電阻抗的變化;當儀器在捕獲了熒光強度Fl、前向熒光脈衝寬度Flw、前向散射光強度Fsc、前向散射光脈衝寬度Fscw、電阻抗信號后,綜合識別和計算得到了相應細胞的大小、長度、體積和染色質長度等資料,並做出紅細胞、白細胞、細菌、管型等的散射圖及定量報告。