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- 細菌種類之一
- 厭氧培養基
厭氧菌
細菌種類之一
厭氧菌(anaerobic bacteria)是一類在無氧條件下比在有氧環境中生長好的細菌,而不能在空氣(18%氧氣)和(或)10%二氧化碳濃度下的固體培養基表面生長的細菌。
這類細菌缺乏完整的代謝酶體系,其能量代謝以無氧發酵的方式進行。它能引起人體不同部位的感染,包括闌尾炎、膽囊炎、中耳炎、口腔感染、心內膜炎、子宮內膜炎、腦膿腫、心肌壞死、骨髓炎、腹膜炎、膿胸、輸卵管炎、膿毒性關節炎、肝膿腫、鼻竇炎、腸道手術或創傷后傷口感染、盆腔炎以及菌血症等。
厭氧菌尚無公認的確切定義,但通常認為這是一類只能在低氧分壓的條件下生長,而不能在空氣(18%氧氣)和(或)10%二氧化碳濃度下的固體培養基表面生長的細菌。按其對氧的耐受程度的不同,可分為專性厭氧菌、微需氧厭氧菌和兼性厭氧菌。
根據對O₂的耐受程度,可將厭氧菌分為三大類:
(1)對氧極端敏感的厭氧菌:代表菌種為月形單胞菌,這類細菌對厭氧條件要求很高,在空氣中暴露10min即死亡,臨床上很難分離出。
(2)中度厭氧菌:代表菌種為脆弱擬桿菌、產氣莢膜梭菌等臨床分離常見的厭氧菌。它們在空氣中暴露60~90min或在膿汁抽出72h后仍然能分離出來。
(3)耐氧厭氧菌:代表菌種為溶組織梭菌。這類細菌不能利用氧,在無氧條件下生長好,而在有氧條件下生長不佳。
普遍存在
厭氧菌是人體正常菌群的組成部分,廣泛存在於人體皮膚和腔道的深部黏膜表面,在組織缺血、壞死,或者需氧菌感染的情況下,導致局部組織的氧濃度降低,才發生厭氧菌感染。
厭氧菌
在治療某些感染性疾病時,有時候即使使用再高級的抗生素,效果也不好,反而導致菌群失調,加重病情。這種情況,可能是因為我們忽視了對厭氧菌的治療。
多為混合感染
由於甲硝唑被還原的中間產物對氧十分敏感,所以在有氧環境下容易失活,故只對厭氧菌發揮作用。但厭氧菌感染多為混合感染,即厭氧菌和需氧菌摻雜,兩種細菌互相促進生長,因此在治療厭氧菌感染時,須採用分別對需氧菌和厭氧菌敏感的藥物,一般與頭孢類藥物合用,提高療效。
由於厭氧菌培養需要一定的條件和時間,所以常在獲得實驗結果以前,醫生已作出抗厭氧菌治療的決定。因為感染的常見部位為口腔、腹腔、腸道及盆腔等,所以當這些部位發生感染性疾病時,治療上一般會使用抗厭氧菌類藥物。此外,當膿液或滲出液有腐敗性臭味或甜味時,提示厭氧菌感染的可能性大。
牙周炎致病菌
“口腔部位腔隙較多,利於細菌生長。”首都醫科大學附屬北京朝陽醫院口腔科主任陳世璋說,研究顯示,成年人牙周炎時,革蘭氏陰性厭氧菌所佔的比例,約為75%。
在口腔科炎症的治療中,抗厭氧菌類藥物應用比較普遍。主要用在以下方面:慢性成人牙周炎,口服甲硝唑或替硝唑,一周后停葯,藥效可以維持1―2周;慢性牙周炎急性發作,或由厭氧菌造成的嚴重感染性疾病,如頜面部的間隙厭氧菌感染、上頜竇炎等,需要與其他抗生素聯合用藥,靜脈點滴3―5天。
迴腸、結腸細菌高
胃腸道組織,幾乎處在半封閉狀態,氧氣供應不好,所以厭氧菌容易生長。首都醫科大學附屬北京友誼醫院普外科張忠濤主任說,腸蠕動使絕大多數細菌被送入下段腸道,因此,末端迴腸及結腸細菌含量高,且99.9%為厭氧菌。
做直腸、結腸手術時,容易發生腸管破裂,或者需要手術切斷,所以其內的厭氧菌可以進入腹腔。為了防止感染,此類手術前一般口服一天甲硝唑類藥物預防感染,手術后還要繼續靜點三天。
對於已被污染的手術操作,例如各種腸管破裂的急診手術,腸管內的厭氧菌感染腹腔的可能性極大,因此在手術中,可以將甲硝唑液體倒入腹腔,進行浸泡和沖洗。
易感染盆腔
“甲硝唑最早用於婦科陰道毛滴蟲的治療,所以又叫滅滴靈,後來發現,這個葯還具有很好的抗厭氧菌作用。”首都醫科大學附屬北京婦產醫院陳素文副主任醫師說,因為盆腔組織臨近直腸、肛門,容易感染到厭氧菌;盆腔解剖位置比較深,環境相對封閉、無氧,厭氧菌容易繁殖,在這種特殊的環境下,幾乎大多數女性生殖道感染均不除外厭氧菌感染,所以抗厭氧菌類藥物在婦科抗感染治療中應用非常廣泛,包括盆腔感染和陰道炎。
陰道炎治療時,一般採用口服配合局部用藥,7天為一個療程;盆腔炎多與其他類抗生素聯合靜點,7―10天為一個療程。
甲硝唑可能會導致胎兒畸形,懷孕前三個月和哺乳期最好不用,但陰道用栓劑相對安全。
段主任最後說,抗厭氧菌類藥物的副作用,主要是消化道反應,如噁心、嘔吐等;還可能會有錐體外系反應,如頭痛、頭暈等;無明顯肝、腎功能損害,相對比較安全。
厭氧菌
抗生素必須選擇對厭氧菌敏感的抗生素(見表6-5)。厭氧菌對氨基糖甙類抗生素常有抗藥性。[color=red]大多數厭氧菌,除脆弱類桿菌外,均對青霉素G敏感。林可黴素的抗菌譜與青霉素G相仿,如病人對青霉素過敏時可選用。氯黴素幾乎對所有的厭氧菌包括脆弱類桿菌在內均有效,但缺點是有骨髓抑制的危險性。厭氧菌對四環素、紅黴素和氯黴素的敏感性有差異,且在治療過程中迅速產生抗藥性,氯林可黴素對厭氧菌感染的療效優於林可黴素,但它和林可黴素一樣,有時會引起致命的假膜性結腸炎。在目前的抗菌葯中,療效最好的首推甲硝唑,對所有的厭氧菌包括脆弱類桿菌有效。Sharp等(1977)發現甲硝唑的療效優於氯林可黴素和林可黴素,此葯價格便宜,即使長期使用也無嚴重併發症。甲硝唑不僅可口服(500mg,每日三次),灌腸(每次1~2g),最近國內已有靜脈製劑,0.5%100ml,靜滴每日2~3次。口服甲硝唑和靜脈滴注甲硝唑在結腸手術前準備中的作用,證明這兩種方法均能有效地降低傷口的感染率。
表6-5 厭氧菌對抗生素的敏感性
青霉素+ +- ++
林可黴素± +- ++
頭孢菌素± ±- ±-
氯黴素+ ++ ++
氯林可黴素+ ++ ++
甲硝唑+ ±+ ++
四環素± ±- ±±
紅黴素± +± +±
+敏感;±稍敏感;-不敏感
前已述及,厭氧菌與需氧菌之間伴有協同作用,因此在治療厭氧菌感染時須分別採用對需氧菌和厭氧菌敏感的藥物。頭孢西丁(Cefoxitin)對類桿菌屬有效,但療效不如氯林可黴素、氯黴素或甲硝唑。頭孢孟多是一種新的靜脈用頭孢菌素,抗菌譜較廣,對革蘭氏陽性和革蘭氏陰性的需氧菌和厭氧菌均有效。
高壓氧能提高組織的氧張力,抑制厭氧菌的繁殖,這一療法是梭形芽孢桿菌感染治療中的一個重要方面,但對於無芽孢厭氧菌感染究竟有多少價值,不少人表示懷疑。
過氧化氫是治療厭氧菌感染傷口的一種有效藥物,它所釋放的新生氧能殺死厭氧菌。過氧化鋅糊劑則可用於治療某些厭氧菌感染,特別是Meleney潰瘍。
目前鑒定厭氧菌/微需氧菌的方法較多,但培養鑒定法始終是可靠性與準確性最高的鑒定方法。
厭氧/微需氧培養設備
厭氧培養設備包括:厭氧袋、厭氧罐和厭氧工作站
微需氧培養設備包括:微需氧罐和微需氧工作站
由於厭氧袋、厭氧罐(微需氧罐)只能對培養階段的樣品提供相應的氣體環境,卻無法提供操作階段的氣體環境,再因操作不便、耗材成本高等原因,而逐漸趨於淘汰。而既可操作又可培養全過程式的厭氧工作站(微需氧工作站)已越來越成為厭氧/微需氧培養的必選設備。
一般而言,各製造品牌(包括國產與進口)的厭氧工作站與微需氧工作站均為獨立機型,厭氧工作站無法進行微需氧培養,微需氧工作站無法進行厭氧培養。這就給微生物實驗室的使用者帶來了採購與使用的高成本投入,也讓原本就擁擠緊張的微生物實驗室更加空間危機。
英國Electrotek(依萊泰科)厭氧/微需氧工作站首次實現了“一箱雙用”,既可厭氧又可微需氧,成為當前該設備技術的前沿代表。
厭氧菌
厭氧菌
厭氧/微需氧培養基
用於厭氧菌和微需氧菌培養的培養基。
其根據用途不同主要分為:增菌培養基、選擇性培養基與鑒定培養基。
目前該實驗材料已普遍實現國產化,只有極少部分專業領域的培養基還需採用進口品牌。