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超活性多細胞生長因子
sPL技術是一項基於自體外周血來源生物活性因子的臨床再生醫療技術,可應用於骨、軟骨、皮膚、肌腱韌帶、血管等軟、硬組織損傷的臨床修復。
黑龍江省幹細胞工程技術研究中心聯合哈爾濱醫科大學楊寶峰院士工作站在傳統PL超低溫凍融製備技術的基礎上開發出全新的PL臨床應用技術——超活性多細胞生長因子(super-activated Platelet Lysates),簡稱sPL技術。該技術是通過專利技術對自體富血小板血漿中血小板的體外高效誘導、激活作用,來實現血小板中高濃度生物活性因子的快速釋放,同時特定誘導VEGF、TGF-beta等強效生物活性因子,使其作用於局部組織創面能夠直接刺激內源性幹細胞、前體細胞以及組織受損細胞的恢復、高效增殖、分化,以達到組織再生與功能恢復的目的。目前可應用於骨科、美容整形、產後損傷修復、女性美乳、口腔頜面外科醫療、皮膚潰瘍及燒傷治療、神經及血管損傷修復、重大手術圍術期應用及生髮治療九大領域。
sPL技術是楊寶峰院士工作站聯合黑龍江省幹細胞工程技術研究中心張怡博士團隊共同研究的一種利用自體血液來源生物活性因子進行臨床應用的自體醫療技術。sPL技術可以通過天晴幹細胞專利技術獲得血液來源的生物活性因子150多種
血小板裂解液技術(PL)發展始於2005年,2005年Doucet率先發現將血小板裂解后,其修復因子、趨化因子可以快速釋放,對幹細胞體外擴增有明顯的促進作用,從此拉開了PL技術研究與應用的序幕。PL技術主要通過反覆凍融或超聲波等物理方法直接裂解血小板,達到血小板內溶物快速釋放的目的。目前PL技術在兩個方面有獨特的潛力,第一,PL成為幹細胞無血清培養擴增的金標準。單采濃縮血小板或者全血合併製備濃縮血小板在臨床上用於防止因血小板數量減少或血小板功能缺陷所致的出血,然而血小板的生命周期僅僅5-7天,美國FDA對成分血小板有效期規定在5天,因此5-7天的體外血小板做成PL就可以為臨床級別的幹細胞擴增提供豐富的生物活性成分。第二,PL成為臨床治療的新技術,在運動損傷、美容整形、產後盆底損傷等領域有廣泛應用價值。
近年來,國內外的學者們對PL在骨科領域中的作用進行了大量的實驗。Tan等採用自體PL原位注射治療了56例頑固性肱骨外上髁炎。通過VAS疼痛量表分析和Mayo量表分析,1,6,12月後治療結果明顯較治療前改善。總體來說,自體PL注射后可以改善病灶部位並且,所有病人均在12個月治療后恢復了正常的肘部功能。Al-Ajlouni報告了在關節中注射自體PL治療膝關節炎的臨床研究。48個雙膝慢性疼痛和腫脹的OA病人年齡在35-70歲之間,K/L分級I-II級,經皮每隔3周注射自體PL共三次,隨訪分析其KOOS分數在32、52周較治療之前明顯提高。癥狀分數32、52周時對比基數11.1分別改善到9.0(P,0.0001)和8.7(P,0.0001),僵硬指數在周32和52分別由基線值2.2改善到1.7(P,0.022)和1.6(P,0.016)。疼痛分數在32和52周分別從基線14.2改善到9.8(P,0.0001)and 9.2(P,0.0001)。每日生活指數從25.0改善到18.7(32周)和15.6(52weeks(P,0.0001)周)。運動指數從10.7降低到8.4(32周)和8.1(52周)。因此通過KOOS隨訪分析,自體PL經皮局部注射對治療KOA既安全且有效。
通過NIH網站的PL臨床研究分析,除了大量以PL為培養材料獲得的幹細胞進行的臨床研究之外,更有單獨採用PL或者PL+細胞的臨床研究正在開展中,範圍包括骨、軟骨、韌帶、皮膚、毛髮、外周血管和眼科等各個領域的疾病治療研究。
sPL技術是一種利用自體血液來源生物活性因子進行臨床應用的自體醫療技術。sPL技術可以通過天晴專利技術獲得血液來源的生物活性因子150多種,成為細胞信號轉導途徑的關鍵因子,如血小板衍生生長因子(PDGF),轉化生長因子β(TGF-β),類胰島素生長因子(IGF),表皮生長因子(EGF),血管內皮生長因子(VEGF)等,這些因子可通過協同作用刺激局部損傷組織細胞的增殖、分化與遷移,以及細胞外基質的合成和分泌能力,達到組織修復與再生的目的。
2012年,黑龍江省幹細胞工程技術研究中心張怡博士團隊聯合楊寶峰院士工作站在早期PL技術平台基礎上,開展自體血液來源生物活性因子研究。
2015年,超活化血液因子裂解液技術突破了臨床製劑的有效成分定量化,建立了嚴格的質量控制體系,實現了臨床前研究工作,並將此技術正式命名為sPL(super-activated platelet lysates)。同年,黑龍江省幹細胞工程技術研究中心陸續與多家重點三甲級醫院合作募集骨科疾病志願者開啟安全性、有效性研究,並證實自體sPL治療膝關節骨性關節炎、骨折延遲癒合等骨科疾病具有顯著、長期療效、無嚴重不良事件產生,可臨床安全使用。
2016年11月,sPL技術通過黑龍江省衛計委審批,納入全省新增醫療服務。
2017年3月,黑龍江省物價監督管理局批准sPL臨床收費准入,並全面與黑龍江省三甲級醫院骨科及骨病專科醫院開展項目合作。同年年底,sPL技術入選“中國國家品牌創新發展工程”,實現向全國推廣。
黑龍江省國家級高新技術企業天晴幹細胞股份有限公司,憑藉與哈爾濱醫科大學楊寶峰院士工作站聯合攻關取得重大突破性進展的sPL再生技術,成功入選“中國品牌創新發展工程”,成為黑龍江省首家入選該工程的科技企業。
由省工信委主辦、哈爾濱職業技術學院承辦的2018年“創客中國”黑龍江省創新創業大賽總決賽在哈爾濱舉行。黑龍江省幹細胞工程技術研究中心依託單位天晴幹細胞股份有限公司參賽項目“sPL技術在疾病治療中的應用”以總分170.78分榮獲企業組創客創新一等獎。
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張怡博士:
韋爾斯利大學博士后
哈佛大學短期培訓研究
香港大學醫學院博士
sPL技術(超活性多細胞生長因子)研發者
天晴幹細胞股份有限公司首席科學家
NeoStemChina首席科學家
sPL應用於骨科領域的原理是在傳統PL超低溫凍融製備技術的基礎上,增加新型自體血液細胞的體外高效誘導、激活技術,來實現血小板中高濃度生物活性因子的快速激活和釋放,通過sPL製備技術獲得的細胞因子、趨化因子、血小板微囊和粘附因子等種類更多、含量更高,其作用於局部組織創面能夠直接刺激內源性幹細胞以及組織受損細胞的恢復、高效增殖、遷移、歸巢、增加膠原合成、激發血管長入和誘導細胞分化,從而達到更好的體內骨、軟骨、肌腱韌帶的修復與再生。
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1骨關節炎
sPL療法通過自己體內損傷部位的滑膜間充質幹細胞、骨髓間充質幹細胞向軟骨細胞分化,並直接刺激軟骨細胞再生來修復軟骨損傷、退化,此療法對早、中、晚期的骨關節炎病症都適合,主要作用是對軟骨撕裂得到修復癒合,讓磨損的軟骨得以再生,利用細胞原理重新長出新的軟骨,再生的軟骨和自身的軟骨無異。
sPL技術獲得的細胞因子能夠為壞死創面提供充足的骨再生與新血管形成所需的營養,促進骨髓間充質幹細胞分化成骨細胞,從而快速達到新骨形成,達到重建股骨頭,恢復正常骨結構,保存關節,治癒骨壞死的目的。在股骨頭壞死前期能夠有效控制病程,促進壞死組織的再生與修復。而在股骨頭壞死中後期可以與手術、骨移植相結合,提高術后癒合成功率,達到長期骨組織修復效果。
3骨折及骨折延遲癒合
sPL技術通過專利方法激活血小板,可以釋放獲得大量促骨組織修復生長因子、抗炎症因子,在骨折端局部移植sPL能夠給創面提供最佳的生長因子濃度,在多因子協同效應下快速激活骨髓間充質幹細胞、滑膜間充質幹細胞、成骨細胞等內源性幹細胞的增殖與分化,以及細胞外基質的沉積,並通過抑制破骨細胞生成素的表達,從而抑制骨吸收作用,保護新骨的形成,提高成骨密度;此外sPL能夠顯著提高血管內皮細胞的增殖能力,為斷骨端提供良好的血管修復和血液供應作用,從而提高在骨折癒合部位的再生修復作用。且sPL可以單獨使用或者在較大骨折情況下和組織工程材料相結合應用,這種組織工程材料結構可以作為骨髓基質幹細胞的遷移骨架和載體,植入骨折端可促進自身骨髓幹細胞遷移、增殖、骨痂形成、骨癒合,並加快骨塑性的過程,在臨床骨折修復中具有重要應用價值。
sPL經體外激活、裂解可釋放PDGF、TGF-β、IGF、EGF、VEGF 等促進軟骨細胞再生因子,在半月板損傷處進行局部移植后能夠長時間維持高濃度、適合軟骨再生的生長因子。在濃縮生長因子刺激下,患者體內固有的滑膜間充質幹細胞、軟骨前體細胞等幹細胞快速激活,通過高效的增殖、分化以及細胞外軟骨基質分泌能力,短時間內形成全新的平滑軟骨組織,達到半月板修復的目的。sPL技術臨床操作簡單便捷,是不動刀的關節再生術。通過微創注射的方式治療半月板損傷,所用原材料來自於患者的自身血液,從而大大降低了術后異物排斥的副作用產生,是臨床半月板損傷的最有效修復技術之一。
5肌腱韌帶損傷
sPL促進局部血液循環,內含生長因子促進韌帶肌腱細胞修復,體現出更優越的治療效果及臨床安全性,具體特點如下:
②sPL中有多種高濃度的VEGF、FGFs、IGF等生長因子,從細胞、分子水平角度修復肌腱細胞損傷、促進血供、改善損傷組織微環境,提高組織修復所需營養。
③sPL含有大量纖維蛋白,為修復細胞提供良好的支架,還可以收縮創面,具有促進凝血的作用,可刺激肌腱韌帶組織再生,促進傷口早期閉合。
④sPL對患者的損傷小且製作簡單,能有效降低醫療成本,縮短患者病程。
6康復注意事項
接受sPL技術治療后,1-2周減少損傷部位的活動。2周后酌情增加活動強度以及負重行為。6-12個月內不要進行劇烈的運動,如爬山、打籃球等,可根據臨床恢復情況判斷時間。
膝關節治療后,可根據需要使用膝關節內側或外出減壓繃帶;術后1周減少活動;在術后6-12周可逐漸增加負重。
股骨頭壞死治療后,在疼痛恢復到術前基準之前(通常1-2周),患側肢體不可負重;之後1-2周,負重可逐漸增加。
肩袖關節損傷治療后,根據耐受程度確定鍛煉程度;6周內避免提重物;如果肩部酸疼,應避免使用;如果肩部不再酸痛,逐步增加使用。
骨折不癒合或者延遲癒合治療后,應該有固定措施,不能負重。
美容抗衰
毛孔:毛孔粗大、毛細血管擴張。
敏感肌:sPL對於敏感肌修復具有劃時代意義。
此外,sPL還可以用於整形外科,達到對手術修復后組織的血液循環系統的快速重建、損傷組織的細胞修復、減少瘢痕、預防整形組織可能發生的壞死;還具有有抑制炎症反應、控制感染、有利於創面快速修復,且具有操作簡單、方便、快捷,患者依從性較好。在臨床選擇上sPL不僅可單獨用於美容抗皮膚衰老,還可以配合整形手術,進一步加強治療效果。
盆底功能障礙性疾病是分娩女性常見疾病,其發病率逐年增加,我國高達30%-50%。女性一生盆腔脫垂手術的風險是10%,複發率高達20%-40%,2年內再次手術率為29%。100%的婦女在分娩后都有不同程度的盆底器官損傷,在65歲以上的婦女中,50%以上會有不同形式的盆底功能障礙。其中壓力性尿失禁的患病率高達36.6%,子宮脫垂的發生率約為25.8%,而陰道前、後壁膨出發生率分別是41.6%和32.1%,並隨著年齡增大呈現上升趨勢。
sPL專利工藝及技術,通過快速激活損傷部位大量軟骨幹細胞,促進軟骨幹細胞分化成軟骨細胞[盆底位置,應該不是軟骨,主要是筋膜損傷],快速修復筋膜損傷;韌帶損傷和肌肉損傷,從根源上解決盆腔韌帶、筋膜損傷及陰道鬆弛等問題。
sPL具有促進骨組織和軟組織生長的作用。在骨移植和骨再生的過程中,血管的快速生長和形成是早期和長期骨形成的關鍵。在骨修復的過程中血管的成長異常活躍,而口腔頜面部血運豐富,加之sPL內所含生長因子具有促進血管再生的作用,使得sPL非常適合在口腔骨缺損修復中的應用。研究表明,由於sPL具有刺激骨髓幹細胞的作用,促進成骨細胞生長,進而達到頜骨的生長、發育以及癒合,在牙周組織損傷中有顯著促進癒合的作用。sPL製備方便、不會發生免疫排斥、安全有效,在口腔組織工程上具有廣闊的應用前景,可成為臨床醫生的新幫手。
糖尿病性皮膚潰瘍和重度皮膚燒傷是難癒合皮膚創面的典型病症。糖尿病是一種全球性疾病,其患病人數正隨著生活水平提高、人口老齡化、生活方式的改變迅速增加,我國糖尿病患者已列全球第二,而由於糖尿病下肢神經、血管病變以及生長因子含量降低或糖基化等原因導致的糖尿病皮膚潰瘍發生率高達全部糖尿病患者的15%。此外燒傷是我國由於意外導致皮膚損傷重要原因,據統計我國每年開展燒傷相關治療或外科手術超過千萬次,每年醫療費用約為千億元。而重度皮膚燒傷由於皮膚表皮、真皮及皮下組織受損嚴重,炎症以及感染等原因致使損傷部位不僅無法自行癒合,甚至危及生命。傳統治療方法包括抗菌敷料、負壓引流、外敷藥物、胰島素、單一生長因子類藥物等治療手段無法取得理想的創面癒合效果,而皮瓣移植、組織工程皮膚等技術因來源緊缺、價格昂貴等原因在臨床上限制較大。
sPL含有高濃度的血小板裂解液釋放出來的生長因子、抗炎因子、外泌體等高活性因子,還包含大量的免疫細胞,對皮膚受損部位可有效抗感染。此外sPL採用凝膠凍的方式,隔絕傷口與外界的接觸,可做到局部隔絕細菌、病毒等對傷口的侵害。